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盐酸克伦特罗完全抗原的合成及其偶联工艺的优化 被引量：9
1
作者 杨香瑜 黄鹤 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第2期355-359,共5页
为获取用于快速免疫分析的免疫抗原和包被抗原,本实验采用重氮化反应制备盐酸克伦特罗(Clenbuterol hydrochloride,CL)完全抗原,在强酸条件下CL先经重氮化,再与鸡卵清白蛋白(OVA)发生共价取代制备了盐酸克伦特罗包被抗原(OVA-CL),并以... 为获取用于快速免疫分析的免疫抗原和包被抗原,本实验采用重氮化反应制备盐酸克伦特罗(Clenbuterol hydrochloride,CL)完全抗原,在强酸条件下CL先经重氮化,再与鸡卵清白蛋白(OVA)发生共价取代制备了盐酸克伦特罗包被抗原(OVA-CL),并以正交实验确定了共价取代反应的关键影响因素,进一步采用单因素实验确定了反应所需的最佳条件,并通过紫外扫描对制得的包被抗原进行了鉴定。结果表明,投料比例是盐酸克伦特罗完全抗原合成的关键因素,搅拌转速和反应时间也起着至关重要的作用。而且偶联反应在1h内基本完成,延长反应时间对提高产物偶联比影响不大。当投料比例为30:1,pH值约为8,低速搅拌状况下,包被抗原和免疫抗原的偶联比分别高达29:1和48:1,盐酸克伦特罗完全抗原合成条件的优化筛选取得了预期的效果。 展开更多
关键词 盐酸克伦特罗 重氮化反应 完全抗原 偶联比
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末端功能化的树枝状聚合物载体与质粒组装的热力学和动力学 被引量：4
2
作者 张维 刘相丽 +1 位作者 张猛 史清洪 《高分子学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1025-1032,共8页
通过二代和四代聚酰胺-胺树枝状聚合物(G2和G4表示)末端分别修饰苯丙氨酸和色氨酸合成了多种新型聚合物载体,进而考察了其与质粒的组装行为.研究结果显示,Phe-G4和Trp-G4与质粒组装为结构致密的纳米粒子,其中Phe-G4与质粒形成的纳米粒... 通过二代和四代聚酰胺-胺树枝状聚合物(G2和G4表示)末端分别修饰苯丙氨酸和色氨酸合成了多种新型聚合物载体,进而考察了其与质粒的组装行为.研究结果显示,Phe-G4和Trp-G4与质粒组装为结构致密的纳米粒子,其中Phe-G4与质粒形成的纳米粒子更加紧密.这一过程是由聚合物载体与质粒间的静电相互作用和结构重排共同驱动的.此外,末端修饰方法显著降低了载体的细胞毒性.细胞转染结果表明,Phe-G4和Trp-G4成功介导质粒pEGFP-CL在COS-7细胞中表达,Phe-G4/pEGFP-CL的转染效率提高到作为阳性对照的脂质体组的4倍以上.因此,Phe-G4载体是一种有应用潜力的新型基因传递系统. 展开更多
关键词 聚酰胺-胺树枝状聚合物 基因传递 质粒组装 光散射 恒温滴定量热 转染
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反离子对牛血清白蛋白在荷电葡聚糖接枝介质中色谱行为的影响 被引量：3
3
作者 韩德涛 白姝 +2 位作者 龚玲莉 余林玲 孙彦 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第1期260-268,共9页
从前期开发的具有极高的吸附容量及传质速率的二乙氨乙基葡聚糖接枝离子交换介质中选取FF-D50-Dex D100和FF-Dex D100为典型代表,利用Cl~–、SCN~–、SO_4^(2–)、HPO_4^(2–)为模型反离子,以牛血清白蛋白(BSA)为模型蛋白,以商品化介质(... 从前期开发的具有极高的吸附容量及传质速率的二乙氨乙基葡聚糖接枝离子交换介质中选取FF-D50-Dex D100和FF-Dex D100为典型代表,利用Cl~–、SCN~–、SO_4^(2–)、HPO_4^(2–)为模型反离子,以牛血清白蛋白(BSA)为模型蛋白,以商品化介质(Q Sepharose FF、Q Sepharose XL、DEAE Sepharose FF)为对照,在离子强度为0.06mol/L下,系统研究反离子对二乙氨乙基葡聚糖接枝介质的蛋白质吸附与洗脱行为的影响。结果表明,二乙氨乙基葡聚糖接枝介质对不同反离子的偏好性存在差异,且该偏好性差异与基团所处位置(接枝链配基或表面配基)无关。同时,介质偏好性弱的反离子会通过促进二乙氨乙基葡聚糖接枝介质的"链传递"效应加快蛋白质的传质速率,从而提高动态吸附容量。因此,在使用二乙氨乙基葡聚糖接枝介质进行蛋白质色谱柱分离过程中,可在吸附操作中使用HPO42–,在洗脱操作中使用SCN–来优化分离效果。 展开更多
关键词 离子交换 二乙氨乙基葡聚糖 反离子 吸附 动力学 线性梯度洗脱
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SLICE体外组装方法的优化和应用
4
作者 冯琪 王颖 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期59-65,共7页
SLiCE(seamless ligation cloning extract)是一种利用细胞裂解物体外无痕组装DNA的方法。针对细胞裂解物来源、λ重组系统的表达及组装片段摩尔比例等方面对现有SLiCE方法进行优化。首先,排除了酿酒酵母和枯草芽孢杆菌的细胞裂解物在... SLiCE(seamless ligation cloning extract)是一种利用细胞裂解物体外无痕组装DNA的方法。针对细胞裂解物来源、λ重组系统的表达及组装片段摩尔比例等方面对现有SLiCE方法进行优化。首先,排除了酿酒酵母和枯草芽孢杆菌的细胞裂解物在现阶段用于体外组装的可能性。同时,在大肠杆菌DH10B中导入L-阿拉伯糖诱导表达的λ重组系统,验证所构建的大肠杆菌的细胞裂解物可在体外拼接DNA片段,并将该种来源细胞裂解物用于后续组装。其次,设计并构建根据转化子颜色筛选阳性克隆的方法,并以该方法计算不同摩尔比例片段组装时的正确率。最后,使用优化过的SLiCE方法,成功组装可在酿酒酵母体内表达的黑色素合成模块。 展开更多
关键词 合成生物学 体外DNA组装 SLiCE方法 大肠杆菌 细胞裂解
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