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基于核糖体工程理论的常压室温等离子体诱变筛选多杀菌素高产菌 被引量:11
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作者 乔长晟 赵男 +2 位作者 石漫漫 朱明 李雪 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期71-78,共8页
利用核糖体工程理论,采用常压室温等离子体(ARTP)诱变对刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)进行诱变筛选。以刺糖多孢菌QYLZ 88912菌株为出发菌株,对其进行ARTP诱变,选取三个不同致死率的照射时间,将孢子悬液混合,以增加抗性筛选几... 利用核糖体工程理论,采用常压室温等离子体(ARTP)诱变对刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)进行诱变筛选。以刺糖多孢菌QYLZ 88912菌株为出发菌株,对其进行ARTP诱变,选取三个不同致死率的照射时间,将孢子悬液混合,以增加抗性筛选几率。然后基于核糖体工程技术理论对混合孢子悬液进行初筛,最终筛选出了1株多杀菌素高产菌Sg200Rif110St40Er90-028。该菌株同时具有磺胺胍、利福平、链霉素、红霉素的多重抗性,摇瓶发酵试验表明,发酵7d后多杀菌素浓度可达到1 516.93 mg/L,较出发菌株QYLZ 88912的产量610.75 mg/L提高了148.37%,且遗传性稳定。以得到的高产菌Sg200Rif110St40Er90-028作为出发菌株,对发酵培养基进行响应面优化实验,优化后的培养基(g/L):葡萄糖46.97、麦芽糊精35、酵母粉40.36、水浸棉籽粉32.88、碳酸钙3,多杀菌素的产量为2 361.81 mg/L,比出发菌株的产量提高了286.71%。 展开更多
关键词 多杀菌素 核糖体工程 常压室温等离子体诱变
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响应面法对出芽短梗霉黑色素提取工艺的研究 被引量:5
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作者 汪建明 赵博 乔长晟 《井冈山大学学报(自然科学版)》 2013年第4期19-27,共9页
本研究以出芽短梗霉发酵液为原料提取黑色素,在单因素实验基础上选取实验因素与水平,用二水平实验确定影响黑色素色价的主要因素,然后根据Box-Behnken中心组合实验设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,得到最佳提取工艺为:酸沉时间9... 本研究以出芽短梗霉发酵液为原料提取黑色素,在单因素实验基础上选取实验因素与水平,用二水平实验确定影响黑色素色价的主要因素,然后根据Box-Behnken中心组合实验设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,得到最佳提取工艺为:酸沉时间90 min、乙醇添加量93.17%、乙醇浓度90.42%。在此条件下提取黑色素色价可达44.8μ/mL。 展开更多
关键词 芽短梗霉 黑色素 响应面法 提取
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聚谷氨酸发酵液菌体去除工艺研究 被引量:7
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作者 杨树峰 楼鹏 +1 位作者 李振海 乔长晟 《食品与发酵科技》 CAS 2013年第1期13-16,共4页
针对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)CGMCC3336发酵生产得到的聚谷氨酸发酵液粘度高,传统的板框过滤、平板超滤等菌体分离方法分离菌体非常困难的问题,本文研究了酸化絮凝工艺进行菌体分离的可行性,研究确定了最适合聚谷氨酸发酵... 针对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)CGMCC3336发酵生产得到的聚谷氨酸发酵液粘度高,传统的板框过滤、平板超滤等菌体分离方法分离菌体非常困难的问题,本文研究了酸化絮凝工艺进行菌体分离的可行性,研究确定了最适合聚谷氨酸发酵液菌体分离的工艺参数:利用50%(v/v)的硫酸调节发酵液pH 3.0,酸化絮凝8h,经过200L工艺放大证明,酸化絮凝除菌体是一条适合聚谷氨酸发酵分离菌体的新工艺。 展开更多
关键词 聚谷氨酸 酸化絮凝 分离菌体 收率
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不同浓缩方法枸杞膏美拉德反应产物及其体外活性对比
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作者 韩璐瑶 王龙龙 +6 位作者 李清 李铭 程一凡 牛思思 余君伟 徐波 乔长晟 《食品研究与开发》 CAS 2024年第16期27-34,48,共9页
该文以中宁枸杞为原料,对比分析真空浓缩、常压浓缩所制备枸杞膏的美拉德反应产物、活性物质、色差等指标,并对枸杞膏的多种功能特性进行综合评估。结果表明,常压浓缩法制备的枸杞膏色泽更深,其中5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethyl furfural... 该文以中宁枸杞为原料,对比分析真空浓缩、常压浓缩所制备枸杞膏的美拉德反应产物、活性物质、色差等指标,并对枸杞膏的多种功能特性进行综合评估。结果表明,常压浓缩法制备的枸杞膏色泽更深,其中5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethyl furfural,5-HMF)含量、类黑精含量、多酚含量、黄酮含量分别为(1 516.42±11.88)μg/mL、163.77±11.35、(28.23±3.40)mg/mL、(623.45±4.39)μg/mL,对比真空浓缩法分别提高351.64%、104.13%、12.69%、48.95%。同时,通过对功能特性的研究,发现枸杞膏具有良好的抗氧化、降血糖、降血脂、降尿酸、美白性能,其中常压浓缩法制备的枸杞膏功效更好。 展开更多
关键词 枸杞 膏剂 浓缩 美拉德反应 生物活性
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红酒泥成分的UPLC-Q-TOF-MS分析 被引量:6
5
作者 於洪建 李赫宇 +2 位作者 于滢慧 李欢 吴春福 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2017年第3期162-165,共4页
为了更好地综合开发利用红酒泥,本试验采用超高效液相色谱仪联用四级杆串联飞行时间质谱仪(UPLC-QTOF-MS)技术,对红酒泥中主要化学成分进行了分析及鉴定。结果表明:经分析共鉴定出23种化学成分,主要分为以下五类:有机酸类,酚酸类,多酚类... 为了更好地综合开发利用红酒泥,本试验采用超高效液相色谱仪联用四级杆串联飞行时间质谱仪(UPLC-QTOF-MS)技术,对红酒泥中主要化学成分进行了分析及鉴定。结果表明:经分析共鉴定出23种化学成分,主要分为以下五类:有机酸类,酚酸类,多酚类,黄酮类,以及糖苷类。 展开更多
关键词 红酒泥 化学成分 UPLC-Q-TOF-MS 多酚 抗氧化
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3型肺炎球菌荚膜多糖结合疫苗的研制 被引量:6
6
作者 张涛 孟欣 +3 位作者 朱涛 刘正 张立平 郝杰清 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1361-1365,共5页
目的:研制3型肺炎球菌荚膜多糖-CRM197结合疫苗。方法:将3型肺炎球菌的荚膜多糖与蛋白CRM197通过化学方法偶联结合,制备成多糖蛋白结合疫苗并使用该疫苗免疫幼小鼠。结果:经过实验条件的考察,发现在85℃,0.2mol/L乙酸水解处理多糖1 h,... 目的:研制3型肺炎球菌荚膜多糖-CRM197结合疫苗。方法:将3型肺炎球菌的荚膜多糖与蛋白CRM197通过化学方法偶联结合,制备成多糖蛋白结合疫苗并使用该疫苗免疫幼小鼠。结果:经过实验条件的考察,发现在85℃,0.2mol/L乙酸水解处理多糖1 h,活化度为10.0,投料比为20∶10时制得的疫苗,在小鼠体内产生了高滴度的抗体。结论:该实验条件下制备的结合疫苗保留了完好的抗原性,以本工艺条件制备3型肺炎球菌荚膜多糖蛋白结合疫苗是可行的。 展开更多
关键词 3型肺炎球菌荚膜多糖 结合疫苗 铝佐剂 免疫原性
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葡萄多酚对心肌保护作用研究进展 被引量:4
7
作者 吕昕泽 吴秀祯 张卫 《药物评价研究》 CAS 2012年第1期46-52,共7页
心血管疾病是目前威胁人类健康的世界头号杀手。近年来,葡萄中多酚类物质在心肌保护作用的研究取得了重要进展。就葡萄中的主要多酚类成分白藜芦醇、花青素、原花青素在心肌保护方面的研究进展进行综述,并讨论这些研究成果在临床上的潜... 心血管疾病是目前威胁人类健康的世界头号杀手。近年来,葡萄中多酚类物质在心肌保护作用的研究取得了重要进展。就葡萄中的主要多酚类成分白藜芦醇、花青素、原花青素在心肌保护方面的研究进展进行综述,并讨论这些研究成果在临床上的潜在应用以及仍需进行的动物实验研究。 展开更多
关键词 葡萄多酚 心肌保护 白藜芦醇 花青素 原花青素
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基于糖蜜原料的γ-聚谷氨酸发酵培养基优化 被引量:1
8
作者 李祥松 王慧超 +6 位作者 赵廷彬 张琳 孙银华 李振海 徐雪天 乔长晟 郑保国 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2022年第20期186-193,共8页
γ-聚谷氨酸(γ-polyglutamic acid,γ-PGA)是一种新型绿色高分子材料,被广泛应用于农业生产、食品、医药等众多领域。目前γ-PGA生产成本高,产量低等问题较为突出。为降低生产成本,该文以廉价甘蔗糖蜜作为碳源。利用单因素与响应面法... γ-聚谷氨酸(γ-polyglutamic acid,γ-PGA)是一种新型绿色高分子材料,被广泛应用于农业生产、食品、医药等众多领域。目前γ-PGA生产成本高,产量低等问题较为突出。为降低生产成本,该文以廉价甘蔗糖蜜作为碳源。利用单因素与响应面法优化发酵培养基。结果显示,最佳培养基组成为糖蜜可溶性固形物浓度8.68%、酵母膏浓度4.23 g/L、FeSO_(4)·7H_(2)O浓度0.78 g/L,味精浓度80 g/L,γ-PGA产量为(67.88±0.41)g/L,与预测值67.17 g/L非常接近,相较于优化前γ-PGA产量提高了1.19倍,为工业化生产奠定基础。 展开更多
关键词 培养基组成 Γ-聚谷氨酸 响应面优化 甘蔗糖蜜 地衣芽孢杆菌
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pH反馈补料方法在γ-聚谷氨酸发酵中的运用 被引量:1
9
作者 乔长晟 兰玲峰 +2 位作者 张帅 李政 郝华璇 《工业微生物》 CAS CSCD 2013年第5期39-43,共5页
建立了一种基于发酵液pH反馈控制γ-聚谷氨酸发酵中葡萄糖补加的方法,即:发酵过程中pH再次回升至7.0时,补加浓缩葡萄糖使发酵液中残糖达到1.5 g/L时停止补加。结果表明,利用该补料方法可较理想地将发酵液中葡萄糖浓度控制在1.0 g/L,发... 建立了一种基于发酵液pH反馈控制γ-聚谷氨酸发酵中葡萄糖补加的方法,即:发酵过程中pH再次回升至7.0时,补加浓缩葡萄糖使发酵液中残糖达到1.5 g/L时停止补加。结果表明,利用该补料方法可较理想地将发酵液中葡萄糖浓度控制在1.0 g/L,发酵终产量达到42.5g/L,产率提高了46.8%,谷氨酸转化率提高了17.7%。 展开更多
关键词 pH反馈 1-聚谷氨酸 分批补料发酵 地衣芽孢杆菌CGMCC3336
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磷钾生物菌肥的菌种筛选及应用研究
10
作者 王凡 李雪 +3 位作者 孙芳艳 罗喆 汪建明 乔长晟 《湖北农业科学》 北大核心 2014年第12期2763-2767,共5页
从保存的47株菌中,根据解磷和解钾能力强、菌株间无拮抗性的原则,确定了3株菌作为菌肥生产菌,分别为巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)。以3株菌作... 从保存的47株菌中,根据解磷和解钾能力强、菌株间无拮抗性的原则,确定了3株菌作为菌肥生产菌,分别为巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)。以3株菌作为生物菌肥生产菌株,对其进行发酵培养,将发酵液施于吊兰土壤进行植株种植试验,结果表明施肥的植株在根长、株高、叶长、鲜重等明显优于空白对照组。 展开更多
关键词 菌肥 解磷菌 筛选 16SrDNA
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聚谷氨酸产生菌的选育及生产条件研究 被引量:1
11
作者 李雪 孙西予 +3 位作者 李镇江 杨志刚 范祎立 乔长晟 《食品与发酵科技》 CAS 2019年第4期28-33,共6页
本文利用谷氨酸依赖型菌Bacillus licheniformis CGMCC3336为出发菌株,通过纯化培养,诱变,高盐-高温复合筛选手段得到高转化率菌株TKBCPG-009;经过200L、20T发酵罐上的逐级放大生产实验验证,TKBCPG-009菌株能将发酵底物谷氨酸钠的转化... 本文利用谷氨酸依赖型菌Bacillus licheniformis CGMCC3336为出发菌株,通过纯化培养,诱变,高盐-高温复合筛选手段得到高转化率菌株TKBCPG-009;经过200L、20T发酵罐上的逐级放大生产实验验证,TKBCPG-009菌株能将发酵底物谷氨酸钠的转化率分别提高了14%,16%。 展开更多
关键词 Γ-聚谷氨酸 诱变 放大生产
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甜菊糖浸提液的絮凝工艺研究
12
作者 李雪 吕爱弟 乔长晟 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2017年第24期62-69,共8页
研究甜菊糖的提取工艺,以絮凝阶段为主要研究点,探讨新的絮凝剂-壳聚糖对甜菊糖浸提液絮凝工艺效果进行试验研究。在单因素试验的基础上,利用响应面法对甜菊糖浸提液的絮凝条件进行优化,建立了二次回归模型,通过分析得出,确定壳聚糖的... 研究甜菊糖的提取工艺,以絮凝阶段为主要研究点,探讨新的絮凝剂-壳聚糖对甜菊糖浸提液絮凝工艺效果进行试验研究。在单因素试验的基础上,利用响应面法对甜菊糖浸提液的絮凝条件进行优化,建立了二次回归模型,通过分析得出,确定壳聚糖的添加工艺为:第1、4次浸提液中添加分子量为150 kDa、0.3 mL 1%壳聚糖溶液中添加1 g甜菊叶(干重)、絮凝温度为48℃、絮凝时间为2.9h,甜菊糖的保留率为92.36%,溶液澄清率为94.17%。第2、3次浸提液中添加分子量为50 kDa的壳聚糖,添加量为0.3 mL1%壳聚糖溶液/g甜菊叶,31℃下絮凝1.9h,甜菊糖的保留率为93.61%,溶液澄清率为96.01%。新的絮凝剂-壳聚糖避免了对生产设备的腐蚀,大大降低了生产成本,同时也减轻了对环境的污染。 展开更多
关键词 甜菊糖 提取 絮凝剂 壳聚糖
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浅谈北交所新规如何助力“专精特新”中小企业发展
13
作者 董海华 《市场周刊·理论版》 2022年第17期51-54,共4页
北交所开市,是我国资本市场改革发展的又一重要标志性事件,其与沪深交易所错位发展,主要服务于创新性中小企业,特别是“专精特新”中小企业。 北交所制订了契合中小企业特点的制度,致力于解决这些企业融资难、融资贵等资金筹措难题。 ... 北交所开市,是我国资本市场改革发展的又一重要标志性事件,其与沪深交易所错位发展,主要服务于创新性中小企业,特别是“专精特新”中小企业。 北交所制订了契合中小企业特点的制度,致力于解决这些企业融资难、融资贵等资金筹措难题。 北交所新规不仅成为影响资本市场改革脚步的重要因素之一,同时也是中小企业实现蓬勃发展的关键要素,它使中小企业能够从多方面、多角度获得资本市场的助力,从而为中小型企业实现高质量发展奠定良好的基础。 文章主要说明了中小型企业融资发展现状以及问题成因,并详细介绍了北交所新规如何助力“专精特新”中小企业发展。 展开更多
关键词 北交所新规 创新型中小企业 新三板 专精特新
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核酸疫苗技术平台在预防性疫苗开发中的前瞻性观点
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作者 汪萱怡 王宾 +11 位作者 熊思东 高晓明 彭育才 金侠 朱涛 英博 寸韡 姜春来 于继云 陈则 陈建军 莘春林 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期565-572,共8页
2023年11月,第七届全国核酸疫苗大会召开,会议深入探讨了核酸疫苗的免疫机制、安全风险及优劣势,并回顾了新型冠状病毒核酸疫苗的安全性和有效性。最终形成了会议观点,即在后疫情时代,核酸疫苗技术将在以下几个领域发挥作用:一是应对传... 2023年11月,第七届全国核酸疫苗大会召开,会议深入探讨了核酸疫苗的免疫机制、安全风险及优劣势,并回顾了新型冠状病毒核酸疫苗的安全性和有效性。最终形成了会议观点,即在后疫情时代,核酸疫苗技术将在以下几个领域发挥作用:一是应对传统疫苗难以应对的病原体;二是促进传统减毒活疫苗的升级换代;三是助力开发多价与联合疫苗;四是快速响应新发及再现传染病挑战。这些观点为核酸疫苗技术的未来发展指明了方向。 展开更多
关键词 核酸 免疫保护机制 安全性 预防性 疫苗
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猪伪狂犬疫苗研究进展 被引量:10
15
作者 刘涛 赵京媛 孙晓成 《兽医导刊》 2012年第12期72-74,共3页
目前,疫苗接种是预防、控制甚至消灭猪伪狂犬病主要的措施之一。国内外已研制出猪伪狂犬病的灭活疫苗、弱毒疫菡、基因缺失弱毒疫苗已经相对成熟,而病毒载体重组疫苗、核酸疫苗、亚单位疫苗尚处于实验室研究阶段。本文对猪伪狂犬疫苗... 目前,疫苗接种是预防、控制甚至消灭猪伪狂犬病主要的措施之一。国内外已研制出猪伪狂犬病的灭活疫苗、弱毒疫菡、基因缺失弱毒疫苗已经相对成熟,而病毒载体重组疫苗、核酸疫苗、亚单位疫苗尚处于实验室研究阶段。本文对猪伪狂犬疫苗做简要综述。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 狂犬疫苗 弱毒疫苗 亚单位疫苗 疫苗接种 灭活疫苗 基因缺失 重组疫苗
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白羽肉鸡现代化密闭鸡舍负压纵向通风管理技术 被引量:8
16
作者 尤永君 乔昌明 +1 位作者 徐良 关飞 《中国家禽》 北大核心 2014年第16期47-50,共4页
现代化白羽肉鸡养殖越来越向规模化、标准化、设备化方向发展,目前白羽肉鸡所建设的鸡舍基本是以密闭式鸡舍为主,密闭式鸡舍有利于通风、温度、湿度、光照等方面的控制管理。尤其对于通风的管理,密闭鸡舍采用负压通风,有利于通风换气均... 现代化白羽肉鸡养殖越来越向规模化、标准化、设备化方向发展,目前白羽肉鸡所建设的鸡舍基本是以密闭式鸡舍为主,密闭式鸡舍有利于通风、温度、湿度、光照等方面的控制管理。尤其对于通风的管理,密闭鸡舍采用负压通风,有利于通风换气均匀,保证鸡舍的空气质量,提高鸡群的生活环境。在夏季炎热气候或育成期后期都宜采用纵向通风模式,不仅能够很好的改善空气质量,还能有效降低育成鸡的体感温度,提高饲料转化率,使肉鸡养殖获得最大利润。 展开更多
关键词 白羽肉鸡 密闭鸡舍 负压 纵向通风 体感温度
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基于药物转运体的元胡止痛方药效成分延胡索乙素、巴马汀、原阿片碱、欧前胡素和异欧前胡素跨血脑屏障机制研究 被引量:2
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作者 文蕊鑫 王泽 +8 位作者 陈玥雯 慈小燕 董艳 崔涛 闫凤英 伊秀林 梁士民 傅鹏 武卫党 《药物评价研究》 CAS 2023年第3期552-558,共7页
目的基于药物转运体研究元胡止痛方药效成分延胡索乙素、巴马汀、原阿片碱、欧前胡素和异欧前胡素跨血脑屏障转运机制。方法建立hCMEC/D3-U87双层细胞模型研究延胡索乙素、巴马汀、原阿片碱、欧前胡素和异欧前胡素的跨血脑屏障吸收情况... 目的基于药物转运体研究元胡止痛方药效成分延胡索乙素、巴马汀、原阿片碱、欧前胡素和异欧前胡素跨血脑屏障转运机制。方法建立hCMEC/D3-U87双层细胞模型研究延胡索乙素、巴马汀、原阿片碱、欧前胡素和异欧前胡素的跨血脑屏障吸收情况;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定hCMEC/D3细胞中相关转运体蛋白多药耐药蛋白1(MDR1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、有机阳离子转运体1(OCT1)、OCT2、OCT3、有机阴离子转运体1(OCTN1)、OCTN2、OATP1A2、OATP2B1的mRNA表达水平;使用6株过表达人转运体的细胞株(S2-OCT1、S2-OCT3、S2-OCTN1、S2-OCTN2、HEK293-OATP1A2、HEK293-OATP2B1)进行摄取实验,判断各药物成分是否为转运体蛋白的底物。结果各成分均可以一定程度地跨越血脑屏障,延胡索乙素、欧前胡素、异欧前胡素具有更好的跨血脑屏障特性,巴马汀和原阿片碱的跨血脑屏障能力较弱。外排型转运蛋白MDR1、BCRP和摄入型转运蛋白OCTN1、OATP2B1、OATP1A2在hCMECD3细胞中有相对高的mRNA表达水平。延胡索乙素是OCT1、OCTN1和OATP1A2的底物;巴马汀是OCT1、OCT3、OCTN1、OCTN2和OATP2B1的底物;原阿片碱是OCT1、OCTN1和OCTN2的底物;欧前胡素、异欧前胡素是OCT3的底物。结论延胡索乙素可能通过转运体OATP1A2、OCT1、OCTN1跨越血脑屏障进入脑组织细胞;巴马汀可能通过OATP2B1、OCT1、OCT3、OCTN1、OCTN2传递进入脑组织细胞;原阿片碱可能通过OCT1、OCTN1和OCTN2传递进入脑组织细胞;欧前胡素、异欧前胡素可能通过OCT3传递进入脑组织细胞。 展开更多
关键词 元胡止痛方 血脑屏障 药物转运体 胡索乙素 巴马汀 原阿片碱 欧前胡素 异欧前胡素
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基于转录组数据探讨不同组织来源的间充质干细胞的生物学异质性
18
作者 王丽波 丁凯 +4 位作者 娄云云 慈小燕 张英驰 李虹 闫凤英 《药物评价研究》 CAS 北大核心 2024年第6期1259-1266,共8页
目的基于转录组数据探讨脂肪组织(AD)、胎盘绒毛膜(HC)、胎盘羊膜(HA)和脐带(UC)来源的间充质干细胞(MSCs)的生物学异质性。方法从人AD、HC、HA和UC中分离MSCs,流式细胞术检测细胞表面阳性标志物(CD73、CD90、CD105)和阴性标志物(CD14、... 目的基于转录组数据探讨脂肪组织(AD)、胎盘绒毛膜(HC)、胎盘羊膜(HA)和脐带(UC)来源的间充质干细胞(MSCs)的生物学异质性。方法从人AD、HC、HA和UC中分离MSCs,流式细胞术检测细胞表面阳性标志物(CD73、CD90、CD105)和阴性标志物(CD14、CD34、CD45、CD79a、HLA-DR)的表达,改良版茜素红染色、油红O染色、阿利辛蓝染色检测细胞的三系分化能力;Trizol法提取细胞总RNA,用于转录组测序,应用GFOLD(1.1.4)进行差异基因表达分析;使用DAVID数据库对差异表达的基因进行基因本体(GO)功能富集分析。结果P2代的不同来源的MSCs,CD73、CD90、CD105均为阳性表达,CD14、CD34、CD45、CD79a、HLA-DR均为阴性表达,培养的MSCs均具有三系分化能力。新生儿来源的MSCs(HA、HC和UC)相关性大于成人来源的MSCs(AD),在功能富集分析中,与来源于AD的MSCs相比,HA和UC来源的MSCs表现出更优异的增殖能力。来源于AD的MSCs有更好的分化潜力以及促进血管生成能力,而来源于UC的MSCs支持神经元的发育并分泌可以调节免疫环境的趋化因子和抗炎因子。结论不同来源的MSCs具有不同的生物学特征,提示不同来源的MSCs可能具有不同临床应用的最佳选择。 展开更多
关键词 间充质干细胞 胎盘绒毛膜 胎盘羊膜 脐带 脂肪 转录组
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人脐带间充质干细胞对传统胎盘屏障模型屏障功能的影响及作用机制
19
作者 韩巧巧 王泽 +7 位作者 郭宇竹 孙英辉 赵天宇 慈小燕 崔涛 傅鹏 伊秀林 闫凤英 《药物评价研究》 CAS 北大核心 2024年第5期1002-1009,共8页
目的通过构建体外胎盘屏障模型,研究人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对传统胎盘屏障模型功能的影响及其可能的分子机制。方法将hUC-MSC、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人滋养层细胞(HTR-8)共同培养于transwell中建立体外胎盘屏障模型,设置对照... 目的通过构建体外胎盘屏障模型,研究人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对传统胎盘屏障模型功能的影响及其可能的分子机制。方法将hUC-MSC、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人滋养层细胞(HTR-8)共同培养于transwell中建立体外胎盘屏障模型,设置对照组(HUVEC+HTR-8)、forskolin组(HUVEC+HTR-8+forskolin)、MSC组(HUVEC+HTR-8+hUC-MSC)、MSC+forskolin组(HUVEC+HTR-8+hUC-MSC+forskolin),通过测量跨膜电阻值、荧光黄CH的渗透性以及P-糖蛋白(P-gp)的活性,评估各组体外胎盘屏障模型的功能;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting检测各组体外胎盘屏障模型中P-gp、紧密连接蛋白5(Claudin-5)、闭合小环蛋白-1(ZO-1)、ZO-2、血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)的mRNA及蛋白表达水平;利用LC-MS/MS检测阿替洛尔、米诺地尔、美托洛尔3种渗透性工具药透过各组体外胎盘屏障模型的表观渗透系数(Papp),验证模型的功能完整性。结果与对照组相比,forskolin、MSC、MSC+forskolin组的跨膜电阻值均显著增高(P<0.05、0.001)、P-gp外排功能均增强、荧光黄的Papp值均显著降低(P<0.05、0.01、0.001),且二者联用后作用效果尤为显著,表明该模型具备完整的屏障功能,且MSC+forskolin屏障功能最好;qRT-PCR和Western blotting结果显示,与对照组相比,forskolin组P-gp、ZO-1、ZO-2、CD31的表达显著增加(P<0.05、0.01、0.001),MSC组P-gp、Claudin5、ZO-1和CD31的表达也显著增加(P<0.05、0.01、0.001);联合应用后,各蛋白的mRNA及蛋白表达水平均更显著增加(P<0.01、0.001),表明hUC-MSC增强传统胎盘屏障功能;与对照组相比,各实验组的Papp值均降低,MSC+forskolin组3个工具药均差异显著,美托洛尔差异最显著。结论hUC-MSC通过增强传统胎盘屏障模型中紧密连接蛋白和外排蛋白的表达,进一步增强了传统胎盘屏障模型的屏障功能。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 人脐静脉内皮细胞 人滋养层细胞 胎盘屏障 P-糖蛋白
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LMH贴壁细胞悬浮驯化及病毒增殖研究
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作者 任培森 吕文静 +2 位作者 黄金海 刘海霞 蔡天宁 《现代畜牧兽医》 2024年第6期28-31,共4页
研究旨在实现LMH贴壁细胞悬浮培养、稳定传代、高密度生长,并应用于血清4型禽腺病毒(FAdV-4)悬浮培养。研究进行LMH贴壁细胞低含量血清适应驯化,并进行无血清悬浮培养筛选及FAdV-4 RP-4毒株接毒盲传试验。结果显示:LMH悬浮细胞可在无血... 研究旨在实现LMH贴壁细胞悬浮培养、稳定传代、高密度生长,并应用于血清4型禽腺病毒(FAdV-4)悬浮培养。研究进行LMH贴壁细胞低含量血清适应驯化,并进行无血清悬浮培养筛选及FAdV-4 RP-4毒株接毒盲传试验。结果显示:LMH悬浮细胞可在无血清培养基中传代第3代后,最终细胞密度达4.00×10^(6)cells/mL以上;FAdV-4连续培养至第4代,毒价可达10^(8.13)TCID_(50)/0.1 mL。研究表明,用特定培养基可使LMH贴壁细胞实现悬浮驯化,并可应用于FAdV-4稳定增殖。 展开更多
关键词 LMH贴壁细胞 驯化 悬浮培养 血清4型禽腺病毒(FAdV-4)
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