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Survivin基因mRNA分子信标定量检测方法建立及在肠癌中的应用 被引量：3
1
作者 郑红 孙保存 +2 位作者 胡建章 何刚 杨萍 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期602-604,共3页
目的建立分子信标定量检测Survivin基因mRNA表达的方法,对方法进行评估,并应用于临床。方法设计Survivin基因特异性分子信标探针和引物,以cDNA克隆重组质粒为标准品,建立Survivin基因分子信标定量检测方法;用该方法检测结直肠癌样本中Su... 目的建立分子信标定量检测Survivin基因mRNA表达的方法,对方法进行评估,并应用于临床。方法设计Survivin基因特异性分子信标探针和引物,以cDNA克隆重组质粒为标准品,建立Survivin基因分子信标定量检测方法;用该方法检测结直肠癌样本中Survivin基因mR- NA的表达量,分析mRNA表达量与临床资料之间的关系。结果所建立的分子信标定量检测方法,线性范围为1×103～1×1010拷贝数,批间变异为28．16％,批内变异为13．34％,灵敏度为42个拷贝数,平均回收率为109．83％;肠癌组织、癌旁组织和正常组织以及肠良性病变组织间比较,mR- NA表达量差异有统计学意义(P<0．05),肠癌样本中mRNA表达量与病理分型和淋巴结转移有关(P<0．05)。结论成功建立Survivin基因分子信标定量检测方法,为基因诊断提供新的定量检测方法。 展开更多
关键词 分子信标 绝对定量 SURVIVIN MRNA表达 肠癌
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人类Survivin基因的cDNA克隆及序列分析 被引量：4
2
作者 郑红 梁东春 张镜宇 《天津医药》 CAS 北大核心 2004年第1期1-4,共4页
目的 :克隆Survivin基因的cDNA ,为分子信标定量检测其mRNA提供模板标准物。方法 :以国人胎脾为材料提取总RNA作为模板 ,采用逆转录_聚合酶链式反应 (RT_PCR)方法扩增并克隆SurvivincDNA ,并将其重组到 pUC18质粒中 ,用双脱氧末端终止... 目的 :克隆Survivin基因的cDNA ,为分子信标定量检测其mRNA提供模板标准物。方法 :以国人胎脾为材料提取总RNA作为模板 ,采用逆转录_聚合酶链式反应 (RT_PCR)方法扩增并克隆SurvivincDNA ,并将其重组到 pUC18质粒中 ,用双脱氧末端终止法进行序列分析。结果 :克隆的SurvivincDNA序列与GeneBank中的该基因序列相比较仅有1个碱基出现差别 ,并导致编码相应氨基酸的改变。结论 :成功构建了Survivin基因的cDNA克隆 ,为建立Survivin基因mRNA的定量检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 人Survivin基因 CDNA 基因克隆 基因序列 逆转录聚合酶链反应
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FATS在乳腺癌组织中的表达及临床相关性研究
3
作者 张军 张喜凤 +3 位作者 仇丽 顾林 赵路军 李政 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期508-511,共4页
目的:研究FATS在乳腺癌以及癌旁正常组织的mRNA水平,探讨FATS在乳腺癌发生发展中的作用。方法:本研究通过实时定量PCR技术分析检测天津医科大学附属肿瘤医院的156例乳腺癌患者FATS基因表达水平,并且研究其表达水平与患者临床预后的关系... 目的:研究FATS在乳腺癌以及癌旁正常组织的mRNA水平,探讨FATS在乳腺癌发生发展中的作用。方法:本研究通过实时定量PCR技术分析检测天津医科大学附属肿瘤医院的156例乳腺癌患者FATS基因表达水平,并且研究其表达水平与患者临床预后的关系。结果:实时定量PCR的结果显示乳腺癌患者肿瘤组织FATS表达量明显低于其配对的癌旁正常腺体组织(P=0.003)。 FATS基因低表达与高的组织学分级相关(P=0.01),FATS基因低表达的患者无病生存期有统计学意义(P=0.036)。Cox多因素分析显示FATS基因的表达是乳腺癌独立的预后因素(OR=0.549;95%CI:0.308～0.977;P=0.041) 结论:FATS低表达与乳腺癌的发生、发展具有高度相关性,FATS表达是乳腺癌的独立预后因素,有望成为新的肿瘤标记物,为临床诊治提供新的靶点。 展开更多
关键词 乳腺癌 预后 FATS MRNA表达
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FATS在非小细胞肺癌组织中的表达及临床相关性研究 被引量：1
4
作者 闫双双 田寅 +3 位作者 张军 仇丽 马克 李政 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期765-768,共4页
目的:研究脆性位点相关抑癌基因(fraglie-site associated tumor suppressor,FATS)在非小细胞肺癌以及癌旁正常组织的mRNA和蛋白表达水平,探讨FATS在非小细胞肺癌发生发展中的作用方法:通过实时定量PCR技术和Western blot技术分析检测... 目的:研究脆性位点相关抑癌基因(fraglie-site associated tumor suppressor,FATS)在非小细胞肺癌以及癌旁正常组织的mRNA和蛋白表达水平,探讨FATS在非小细胞肺癌发生发展中的作用方法:通过实时定量PCR技术和Western blot技术分析检测天津医科大学附属肿瘤医院2003年5月至2007年10月间91例非小细胞肺癌患者FATS基因和蛋白表达水平,并且研究其表达水平与患者临床预后的关系结果:实时定量PCR和Western blot结果均显示非小细胞肺癌患者肿瘤组织FATS表达量明显低于其配对的癌旁正常组织(P=0.001)。FATS基因低表达患者与高表达患者在总生存期差异有统计学意义(P=0.030)。Cox多因素分析显示FATS基因的表达是非小细胞肺癌独立的预后因素(OR=2.250;95%CI:1.054～4.805;P=0.036)。结论:FATS低表达与非小细胞肺癌的发生发展具有高度相关性,FATS表达作为非小细胞肺癌的独立预后因素,有望成为新的肿瘤标记物。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 预后 FATS MRNA表达
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抑癌基因FATS真核表达载体的构建及其定点突变
5
作者 闫双双 马克 +2 位作者 仇丽 田寅 李政 《山东医药》 CAS 2012年第11期12-14,共3页
目的构建抑癌基因FATS的真核表达载体和针对其单核苷酸多态性(SNP)位点定点突变的真核表达载体,为进一步研究其功能奠定基础。方法通过RT-PCR从小鼠睾丸cDNA中扩增FATS基因,并克隆到p3×Flag-myc-CMV-26载体上,构建FATS真核表达载体... 目的构建抑癌基因FATS的真核表达载体和针对其单核苷酸多态性(SNP)位点定点突变的真核表达载体,为进一步研究其功能奠定基础。方法通过RT-PCR从小鼠睾丸cDNA中扩增FATS基因,并克隆到p3×Flag-myc-CMV-26载体上,构建FATS真核表达载体p3×Flag-FATS;利用定点突变技术构建Flag-FATS-C213G,经测序检测突变结果后将两质粒分别转染FATS基因沉默的U2OS细胞,Western blot检测FATS蛋白和标签蛋白表达。结果重组质粒p3×Flag-FATS经EcoRⅠ/KpnⅠ双酶切出现质粒和目的片段两条带,且大小相符、无其他条带;编码FATS第213位氨基酸的第637-639位碱基由AAU突变为GAU,其他碱基均无突变;p3×Flag-FATS和Flag-FATS-C213G转染U2OS细胞可检测出标签蛋白Flag和目的蛋白FATS表达。结论 FATS基因及其定点突变载体均可成功构建,且转染后表达良好;此为深入研究FATS基因的抑癌功能及与肿瘤发生风险的关系奠定了基础。 展开更多
关键词 脆性位点相关的肿瘤抑制基因 定点突变 真核表达
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