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内毒素攻击大鼠肺泡巨噬细胞时PI3K/Akt信号通路在一氧化碳上调线粒体融合蛋白-1表达中的作用
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作者 李珍 史佳 +4 位作者 余剑波 王丹 董树安 宫丽荣 张圆 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期112-115,共4页
目的 评价内毒素攻击大鼠肺泡巨噬细胞时1-磷酯酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶（PI3K/Akt）信号通路在一氧化碳（C0）上调线粒体融合蛋白-1（Mfn1）表达中的作用.方法 传代培养12 ～ 20周龄大鼠肺泡巨噬细胞,以密度4×10^4个/ml接种... 目的 评价内毒素攻击大鼠肺泡巨噬细胞时1-磷酯酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶（PI3K/Akt）信号通路在一氧化碳（C0）上调线粒体融合蛋白-1（Mfn1）表达中的作用.方法 传代培养12 ～ 20周龄大鼠肺泡巨噬细胞,以密度4×10^4个/ml接种于96孔板,培养24 h后,采用随机数字法分为4组（n=10）：对照组（C组）、内毒素组（L组）、LPS＋一氧化碳释放剂CORM-2组（L＋C组）和LPS＋CORM-2＋PI3K抑制剂LY294002组（L＋C＋LY组）.C组正常培养,L组、L＋C组和L＋C＋LY组均给予10 μg/ml LPS刺激肺泡巨噬细胞,制备内毒素攻击模型;L＋C组于LPS刺激前1h给予CORM-2 100 μmol;L＋C＋LY组于LPS刺激前1.5、1.0h分别给予抑制剂LY294002 20 μg、CORM-2100 μmol;每组细胞处理完毕后继续孵育24 h.采用ELISA法测定细胞上清液TNF-α和IL-10的浓度,采用RT-PCR和Western blot法测定细胞PI3K、磷酸化Akt（p-Akt）和Mfn1的表达.结果 与C组比较,L组、L＋C组和L＋C＋LY组TNF-α浓度升高,IL-10浓度下降（P＜0.05）;与L组比较,L＋C组IL-10浓度升高,TNF-α浓度下降,PI3K、p-Akt、Mfn1表达上调（P＜0.05）;与L＋C组比较,L＋C＋LY组IL-10浓度下降,TNF-α浓度升高,PI3K、p-Akt、Mfn1表达下调（P＜0.05）.结论 内毒素攻击大鼠肺泡巨噬细胞时,PI3K/Akt信号通路的激活参与了CO上调Mfn1表达的过程. 展开更多
关键词 一氧化碳 线粒体蛋白质类 1-磷酯酰肌醇3-激酶 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶
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核因子E2相关因子2通过上调细胞紧密连接蛋白Claudin-18表达减轻内毒素致急性肺损伤
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作者 刘沙沙 董树安 +3 位作者 史佳 刘华洋 高巧营 余剑波 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期377-380,共4页
目的探讨内毒素致急性肺损伤(ALI)时核因子E2相关因子2(Nrf2)对细胞紧密连接蛋白Claudin-18的影响。方法将18只健康雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、内毒素致ALI模型组(ALI组)及Nrf2激活剂叔丁基对苯二酚(tBHQ)预处理组(tBHQ+... 目的探讨内毒素致急性肺损伤(ALI)时核因子E2相关因子2(Nrf2)对细胞紧密连接蛋白Claudin-18的影响。方法将18只健康雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、内毒素致ALI模型组(ALI组)及Nrf2激活剂叔丁基对苯二酚(tBHQ)预处理组(tBHQ+ALI组),每组6只。通过腹腔注射脂多糖(LPS)15 mg/kg制备小鼠内毒素致ALI模型;对照组注射等量磷酸盐缓冲液(PBS)。tBHQ+ALI组于制模前3 h分3次腹腔注射tBHQ,每次间隔1 h(合计50 mg/kg),最后一次注射tBHQ的同时给予LPS 15 mg/kg;对照组和模型组给予等量PBS,最后一次给药时分别注射PBS或LPS。注射LPS后12 h处死小鼠取肺组织,苏木素-伊红(HE)染色后,光镜下观察肺组织病理学改变,并计算肺损伤评分;测定肺湿/干质量比值(W/D);采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测肺组织Nrf2蛋白表达;采用免疫组化法检测肺组织Claudin-18阳性表达。结果对照组肺组织结构完整,无明显病理学改变。与对照组相比,ALI组肺泡间隔增宽,伴有炎症细胞浸润、毛细血管充血及组织水肿,肺损伤评分及肺W/D比值均明显升高〔肺损伤评分(分):6.50±1.05比1.83±0.75,肺W/D比值:3.79±0.22比3.20±0.14,均P<0.01〕,且肺组织Nrf2蛋白表达及Claudin-18阳性表达均明显降低〔Nrf2蛋白(Nrf2/β-actin):0.41±0.33比1.22±0.33,Claudin-18(A值):0.28±0.07比0.44±0.10,均P<0.05〕。tBHQ预处理后,肺组织病理损伤程度较ALI组明显减轻,肺泡间隔轻度异常,炎症细胞浸润及组织水肿减轻,肺损伤评分及肺W/D比值均明显降低〔肺损伤评分(分):3.00±0.89比6.50±1.05,肺W/D比值:3.28±0.19比3.79±0.22,均P<0.01〕,且肺组织Nrf2蛋白表达及Claudin-18阳性表达均明显升高〔Nrf2蛋白(Nrf2/β-actin):1.26±0.09比0.41±0.33,Claudin-18(A值):0.45±0.04比0.28±0.07,均P<0.05〕。结论Nrf2能通过上调Claudin-18表达减轻肺水肿,从而改善内毒素致ALI。 展开更多
关键词 急性肺损伤 叔丁基对苯二酚 核因子E2相关因子2 紧密连接蛋白Claudin-18
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重症急性胰腺炎急性期中西医结合治疗策略
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作者 余剑波 吴晓炀 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2024年第4期456-461,共6页
重症急性胰腺炎是临床常见的急危重症,极易引发多器官功能障碍。该病的临床管理复杂,病死率高。尽管西医通过使用机械通气、手术和支持性治疗等方法已取得一定进展,但单一的西医治疗效果有限。中医治疗在调整机体内环境、改善微循环和... 重症急性胰腺炎是临床常见的急危重症,极易引发多器官功能障碍。该病的临床管理复杂,病死率高。尽管西医通过使用机械通气、手术和支持性治疗等方法已取得一定进展,但单一的西医治疗效果有限。中医治疗在调整机体内环境、改善微循环和减轻炎症反应方面显示出独特优势。中西医结合治疗已成为提高治愈率、降低并发症和病死率的有效策略。本文将探讨重症急性胰腺炎的中西医结合治疗策略及其临床应用效果。 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎 中西医结合 治疗
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