目的结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer 1,MACC1)在肿瘤侵袭和转移中起重要作用,在前列腺癌中的研究较少,本研究探讨siRNA转染下调MACC1表达对前列腺癌细胞株PC-3增殖和侵袭的影响。方法采用逆转录聚合酶链反...目的结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer 1,MACC1)在肿瘤侵袭和转移中起重要作用,在前列腺癌中的研究较少,本研究探讨siRNA转染下调MACC1表达对前列腺癌细胞株PC-3增殖和侵袭的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription PCR,RT-PCR)法检测10例前列腺癌和其癌旁组织及4种前列腺癌细胞株(LNCap、PC-3、DU145、C4-2)MACC1mRNA的表达;将前列腺癌细胞株PC-3分为实验组、阴性对照组和空白对照组,实验组转染MACC1特异性小干扰RNA(small RNA interference,siRNA)(MACC1siRNA),阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不做处理。RT-PCR法及蛋白质印迹法检测siRNA转染前后MACC1mRNA及蛋白水平的变化,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测转染后PC-3细胞增殖变化,Transwell小室法检测PC-3细胞侵袭能力的变化,蛋白质印迹法检测Met/MAPK信号通路蛋白改变。结果 10例前列腺癌组织中MACC1mRNA相对表达量为0.82±0.27,高于癌旁组织的0.09±0.05,t=23.20,P<0.001;前列腺癌细胞株PC-3、DU145和C4-2 MACC1mRNA的表达分别为0.86±0.19、0.65±0.23和0.77±0.23,高于LNCap细胞的0.17±0.07。实验组PC-3细胞转染siRNA后,MACC1mRNA表达为0.16±0.03,低于阴性对照组的0.79±0.04,t=7.91,P<0.001;也低于空白对照组的0.81±0.34,t=8.61,P<0.001。实验组MACC1蛋白表达量为0.10±0.01,显著低于阴性对照组的0.39±0.045,t=11.21,P<0.001;也低于空白对照组的0.41±0.10,t=11.73,P<0.001;MACC1siRNA组PC-3细胞增殖能力在72h分别为0.58±0.65,低于阴性对照组的1.18±0.10和空白对照组的1.23±0.05,P<0.001;MACC1siRNA组PC-3细胞侵袭的细胞数目为126.0±9.8,低于阴性对照组233.3±12.0及空白对照组242.3±11.5,P<0.05。转染后Met、p-MEK1/2和p-ERK1/2的MACC1siRNA蛋白相对表达量分别为0.47±0.03、0.34±0.03和0.94±0.03,较对照组的0.26±0.04、0.10±0.11和0.10±0.12明显降低,P<0.05;MEK1/2和ERK1/2蛋白相对表达量无明显下降,P>0.05。�展开更多
