RNAi调下AKT1、PI3K P85表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖 被引量：5

1

作者 梅玫 任玉 +6 位作者 周旋 赵津辉 王凡 高伟 祁艳斌 姚智 蒋伶活 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期51-56,共6页

目的:探讨RNAi(RNA interference)技术抑制乳腺癌MCF-7细胞中AKT1和PI3KP85亚基的表达对MCF-7细胞增殖和侵袭等的影响。方法:将包含AKT1、PI3KP85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K转染... 目的:探讨RNAi(RNA interference)技术抑制乳腺癌MCF-7细胞中AKT1和PI3KP85亚基的表达对MCF-7细胞增殖和侵袭等的影响。方法:将包含AKT1、PI3KP85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K转染至乳腺癌MCF-7细胞。应用real-timePCR和Western blotting检测转染后目的基因mRNA和蛋白的表达水平,并用Western blotting检测目的基因被沉默后PCNA、cyclinD1和P53的表达情况。应用MTT法、流式细胞术、2-D和3-DMatrigel实验检测MCF-7细胞转染前后的细胞增殖周期和侵袭能力。结果:重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K介导的靶向AKT1,PI3KP85shRNA可以有效抑制目的基因AKT1和PI3Kp85的mRNA和蛋白表达;下游相关因子PCNA、cyclinD1的表达亦下调,P53表达则上调。MTT法结果显示rAd5-siAKT1-siPI3K组细胞生长抑制率>50%,与未转染组和rAd5-siCtrl转染组比较,出现明显的G1/G0细胞周期阻滞;2-D和3-DMatrigel实验显示,未转染组和rAd5-siCtrl转染组细胞呈正常形态,而rAd5-siAKT1-siPI3K转染组细胞贴壁生长能力明显减低,细胞团块明显缩小。结论:靶向AKT1、PI3KP85亚基的shRNA技术可以抑制MCF-7细胞中AKT1、PI3KP85亚基的表达,抑制MCF-7细胞的体外增殖。 展开更多

关键词 RNA干扰 乳腺肿瘤 AKT1 PI3KP85 增殖

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活化血小板参与缺血性脑卒中炎症反应机制初探 被引量：8

2

作者 徐士欣 布晓坤 白虹 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期590-593,共4页

目的 通过细胞共培养模型初步探讨活化血小板参与缺血性脑卒中炎症反应的机制.方法 分离健康人血小板,以0.8μmol/L二磷酸腺苷（ADP）作用20 min激活.同时设静息血小板做为对照,应用血细胞分析仪检测血小板平均内含物（MAC）浓度;将静... 目的 通过细胞共培养模型初步探讨活化血小板参与缺血性脑卒中炎症反应的机制.方法 分离健康人血小板,以0.8μmol/L二磷酸腺苷（ADP）作用20 min激活.同时设静息血小板做为对照,应用血细胞分析仪检测血小板平均内含物（MAC）浓度;将静息血小板和活化血小板分别与人脐静脉内皮细胞株共培养12 h,同时设ADP对照组（只加入等量ADP,无血小板）和空白对照组,采用RT-PCR法检测人脐静脉内皮细胞炎性细胞因子白介素-1β（IL-1β）、白介素.6（IL-6）、白介素-8（IL-8）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的mRNA表达情况.结果与静息血小板组[（266.80±22.14）g/L]比较,ADP诱导激活的活化血小板MPC值[（231.90±14.63）g/L]减低,差异有统计学意义（P〈0.05）;RT-PCR检测结果显示活化血小板可以诱导共培养的人脐静脉内皮细胞表达IL-1β、IL-6、IL-8、MCP-1 mRNA,而静息血小板组、ADP对照组和空白对照组均无上述细胞因子的表达.结论 体外活化的血小板能够启动血小板一内皮细胞反应,诱导其表达炎症细胞因子,是缺血性脑卒中炎症反应发生的可能机制之一. 展开更多

关键词 活化血小板 脑缺血 炎症 白细胞介素 趋化因子

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乳腺癌NF-κBHER2 VEGF-C与VEGFR3表达及其意义 被引量：7

3

作者 蔡春友 付金瑞 +1 位作者 刘妍菊 姚智 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第23期1333-1337,共5页

目的:探讨HER2、NF-kB、VEGF-C及其受体VEGFR-3在乳腺癌组织中的表达及相互关系。方法:应用免疫组化方法检测40例人乳腺癌组织和10例癌旁组织HER2、ER、NF-kB、VEGF-C及VEGFR-3的表达情况。结果:乳腺癌组织和癌旁组织NF-kB的阳性率分别... 目的:探讨HER2、NF-kB、VEGF-C及其受体VEGFR-3在乳腺癌组织中的表达及相互关系。方法:应用免疫组化方法检测40例人乳腺癌组织和10例癌旁组织HER2、ER、NF-kB、VEGF-C及VEGFR-3的表达情况。结果:乳腺癌组织和癌旁组织NF-kB的阳性率分别为45.0%(18/40)和30.0%(3/10),差异无显著性(P>0.05),NF-kB与HER2蛋白的表达呈正相关(r=0.442,P=0.004)。Ⅲ级乳腺癌的NF-kB表达显著增强(P=0.018)。VEGF-C和VEGFR-3的表达显著增强,阳性率分别为70.0%(28/40)和57.5%(23/40),两者呈正相关(r=0.761);NF-kB和HER2与VEGF-C呈正相关(r值分别为0.373和0.342)。淋巴结转移组VEGF-C和VEGFR-3的阳性率分别等于90.0%和82.4%,明显高于无淋巴结转移组(56.5%和39.1%)。VEGFR-3阳性脉管数平均为8.44±2.58,明显高于无淋巴结转移组(5.12±3.75)。结论:NF-kB与HER2的表达为正相关,NF-kB和HER2蛋白与VEGF-C的表达呈正相关。 展开更多

关键词 乳腺癌 细胞核因子ΚB 血管内皮细胞生长因子-C 血管内皮细胞生长因子受体-3 人类上皮细胞生长因子受体2

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反义miR-221/222上调p27^(kip1)对MCF-7乳腺癌细胞系的放射增敏作用 被引量：4

4

作者 梅玫 任玉 +7 位作者 周旋 祁艳斌 王鸿梅 张灏 申潇咏 赵川 苏征 姚智 《中华乳腺病杂志（电子版）》 CAS 2009年第6期22-27,共6页

目的探讨敲低miR-221/222表达上调p27kip1对MCF-7人乳腺癌细胞系放射敏感性的影响。方法经生物信息学分析查询miR-221/222成熟体序列和它们与p27kip1的关系。脂质体共转染反义寡聚核苷酸(反义miR-221/222)后,用Northern blot法检测转染... 目的探讨敲低miR-221/222表达上调p27kip1对MCF-7人乳腺癌细胞系放射敏感性的影响。方法经生物信息学分析查询miR-221/222成熟体序列和它们与p27kip1的关系。脂质体共转染反义寡聚核苷酸(反义miR-221/222)后,用Northern blot法检测转染后MCF-7细胞miR-221、miR-222表达水平;将实验细胞分为6组:对照组、对照照射组、无义序列组、无义序列照射组、反义miR-221/222共转染组和反义miR-221/222共转染照射组。用MTT法检测细胞增殖及放射协同作用,流式细胞仪分析细胞周期,克隆形成实验检测细胞增殖,Western blot分析p27kip1蛋白的表达变化。数据间的方差分析采用F检验;两两比较采用LSD-t检验。结果经生物信息学分析显示miR-221/222成熟体序列的种子序列几乎一致,p27kip1是miR-221/222的靶基因。Northern blot显示反义miR-221/222共转染组miR-221、miR-222的表达水平明显下降(miR-221:P=0.000;miR-222:P=0.000)。对照组及无义序列组之间miR-221、miR-222表达水平的差异无统计学意义(miR-221:P=0.371;miR-222:P=0.284)。MTT结果显示转染后第4天共转染组肿瘤细胞生长抑制效果最好,细胞增殖率明显低于对照组和无义序列组(P=0.000),但与放射治疗无协同作用(P=0.091)。流式细胞术检测可见共转染组细胞周期存在G0/G1期阻滞(P=0.000)。经放射治疗后,可明显降低S期比例(P=0.002)。克隆形成实验表明反义miR-221/222可增加MCF-7细胞的放射敏感性。Western blot显示反义miR-221/222共转染组的p27kip1蛋白表达明显上调(P=0.000)。结论反义miR-221/222通过上调p27kip1蛋白表达可以增加MCF-7人乳腺癌细胞系放射敏感性。 展开更多

关键词 MIR-221 MIR-222 乳腺肿瘤 p27~kip1 放射敏感性

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糖尿病大鼠甲状腺组织钠／碘转运体与促甲状腺激素受体mRNA及蛋白表达的变化 被引量：3

5

作者 吴晓明 朱梦瑜 +2 位作者 赵伟 郑凝 方佩华 《中国医药》 2010年第4期289-291,共3页

目的观察糖尿病大鼠甲状腺组织钠／碘转运体（NIS）、促甲状腺激素受体（TSHR）mRNA和蛋白表达的变化及氨基胍、胰岛素的干预作用，探讨高糖毒性致甲状腺组织损伤及其可能机制。方法高脂饲料喂养联合链脲佐菌素制备糖尿病大鼠49只，完... 目的观察糖尿病大鼠甲状腺组织钠／碘转运体（NIS）、促甲状腺激素受体（TSHR）mRNA和蛋白表达的变化及氨基胍、胰岛素的干预作用，探讨高糖毒性致甲状腺组织损伤及其可能机制。方法高脂饲料喂养联合链脲佐菌素制备糖尿病大鼠49只，完全随机分为糖尿病组17只、氨基胍组16只，胰岛素组16只，设对照组9只，成模12周末称重并测血糖后处死，取甲状腺组织，以RT-PCR方法测定NIS、TSHRmRNA表达，Westem印迹方法检测NIS、TSHR蛋白表达。结果糖尿病组大鼠甲状腺组织NISmRNA和蛋白表达显著低于对照组（0．17±0．09VS0．47±0．16；0．42±0．28vs1．44±0．46；P〈0．05），TSHRmRNA和蛋白表达显著高于对照组（0．49±0．25vs0．17±0．18；1．48±0．65VS0．51±0．35；P〈0．05）；氨基胍组与胰岛素组糖尿病大鼠甲状腺组织TSHRmRNA和蛋白表达显著低于糖尿病组（0．29±0．28与0．30±0．15vs0．49±0．25；0．63±0．27与0．96±0．29vs1．48±0．65；P〈0．05），NISmRNA和蛋白表达显著高于糖尿病组（0．40±0．17与0．45±0．20vs0．17±0．09；0．76±0．36与0．75±0．28vs0．42±0．28；P〈0．05）。结论高糖毒性可能通过蛋白非酶糖基化途径致糖尿病大鼠甲状腺组织NIS表达下降、TSHR表达增高。 展开更多

关键词 糖尿病 甲状腺 钠/碘转运体 促甲状腺激素受体

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促炎因子与抗炎因子在冠脉搭桥术围手术期的变化 被引量：3

6

作者 王赞鑫 邵杰 +4 位作者 李培军 刘建实 张金英 魏民新 杨洁 《天津医药》 CAS 北大核心 2008年第2期87-89,共3页

目的:观察比较体外循环冠状动脉搭桥术(CABG)和非体外循环冠状动脉搭桥术(OPCAB)后炎症因子表达水平。方法:选取单纯冠脉搭桥手术患者57例。液相蛋白芯片系统(Liquichip)方法检测术前,术后1、4、24及72h的血浆中IL-6、IL-8、IL-10及TNF... 目的:观察比较体外循环冠状动脉搭桥术(CABG)和非体外循环冠状动脉搭桥术(OPCAB)后炎症因子表达水平。方法:选取单纯冠脉搭桥手术患者57例。液相蛋白芯片系统(Liquichip)方法检测术前,术后1、4、24及72h的血浆中IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α的表达水平,记录患者术后临床资料。结果:CABG组和OPCAB组术后炎症因子水平差异无统计学意义(均P>0.05)。2组术后IL-6、IL-8、IL-10水平均较术前有明显升高,术后1h达高峰(P<0.05),术后72h水平仍高于术前(P<0.05)。TNF-α水平术前术后差异无统计学意义(P>0.05)。结论:2组患者术后炎症因子水平与术前相比有明显的升高;CABG和OPCAB术后炎症因子水平差异无统计学意义。 展开更多

关键词 白细胞介素类 冠状动脉分流术 体外循环 肿瘤坏死因子类

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RNAi抑制PI3Kp85α蛋白活性对人乳腺癌细胞系MCF-7生长抑制的体外研究 被引量：1

7

作者 梅玫 任玉 +5 位作者 周旋 苏征 祁艳斌 张灏 姚智 蒋伶活 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第23期1360-1364,共5页

目的:探讨敲低P13Kp85α表达对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞生长的影响和机制。方法:用靶向P13Kp85α的siRNA转染人乳腺癌细胞系MCF-7,使用Real-time PCR法鉴定转染P13Kp85α表达水平;MTT法评价P13Kp85α siRNA对乳腺癌细胞系MCF-7生长的影... 目的:探讨敲低P13Kp85α表达对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞生长的影响和机制。方法:用靶向P13Kp85α的siRNA转染人乳腺癌细胞系MCF-7,使用Real-time PCR法鉴定转染P13Kp85α表达水平;MTT法评价P13Kp85α siRNA对乳腺癌细胞系MCF-7生长的影响;流式细胞术检测转染后细胞周期分布和凋亡;采用免疫荧光染色及western blot方法观察IA型P13K/AKT通路主要成员的表达。结果:Real-time PCR结果显示P13Kp85αsiRNA转染导致P13Kp85α表达下调;MTF结果显示P13Kp85αsiRNA转染抑制肿瘤细胞生长;流式细胞术检测可见P13Kp85α siRNA转染组细胞周期存在G_0/G_1期阻滞而且凋亡率显著高于对照组与空载体组(F=19.255,P=0.002)。结论:应用P13Kp85α siRNA转染人乳腺癌细胞系MCF-7细胞,可抑制其增殖和诱导细胞凋亡,因此P13Kp85α可以作为人乳腺癌基因治疗的候选靶点。 展开更多

关键词 PI3Kp85α RNA干扰 乳腺癌 基因治疗

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老年2型糖尿病患者血清内生肌酐清除率与代谢综合征的相关性探讨 被引量：2

8

作者 李美 张宏 +1 位作者 朱梦瑜 赵伟 《中国医药》 2011年第3期288-289,共2页

目的 探讨老年2型糖尿病患者血清内生肌酐清除率（Ccr）与代谢综合征（MS）及其主要组成成分的相关性.方法 选择我院住院的老年2型糖尿病患者329例,根据有无MS分为不伴MS组（144例）和伴MS组（185例）,比较2组血清肌酐清除率,分析其与... 目的 探讨老年2型糖尿病患者血清内生肌酐清除率（Ccr）与代谢综合征（MS）及其主要组成成分的相关性.方法 选择我院住院的老年2型糖尿病患者329例,根据有无MS分为不伴MS组（144例）和伴MS组（185例）,比较2组血清肌酐清除率,分析其与代谢综合征及其主要组成成分的相关性.结果 329例老年2型糖尿病患者中代谢综合征患病率达56.23%（185例）;与不伴MS组相比,伴MS组患者BMI、血清TG、收缩压、舒张压明显增高,HDL-C、Ccr[（105.2±28.1）比（93.1±29.1）ml/（min·1.73 m2）]明显降低（均P＜0.05）;Ccr与BMI、TG、SBP、DBP及代谢异常集聚数目呈显著负相关;调整了年龄、性别、糖尿病病程、糖化血红蛋白后,Ccr与代谢综合征及其主要组成成分中的TG、B MI、DBP呈显著负相关.结论 老年2型糖尿病患者代谢综合征患病率高,积极多因素干预治疗可能有助于糖尿病肾病的防治. 展开更多

关键词 糖尿病 2型 代谢综合征 血清内生肌酐清除率

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基质金属蛋白酶在肿瘤血管生成中的作用 被引量：3

9

作者 车绪春（综述） 陆融（综述） 姚智（审校） 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2007年第2期84-87,共4页

血管生成是在原有毛细血管和（或）毛细血管后微静脉基础上生成新血管的过程，是肿瘤持续生长和发生转移的必要条件，其过程极为复杂，需要多种因素的参与。近年来的研究结果显示，基质金属蛋白酶（MMP）在肿瘤血管生成中发挥重要作用。

关键词 基质金属蛋白酶类 新生血管化 病理性 肿瘤转移

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乳腺癌细胞核因子κB活化及其在增殖与演化过程中的作用 被引量：2

10

作者 蔡春友 姚智 《中国综合临床》 北大核心 2006年第5期416-419,共4页

目的探讨NF-κB、雌激素受体(ER)、人上皮细胞生长因子受体-2(HER2)和增殖细胞核抗原(PCNA)等在乳腺癌中的蛋白表达特征,以及NF-κB活化与乳腺癌的ER、HER2、PCNA表达水平以及肿瘤淋巴结转移、肿瘤大小和组织学分级等临床病理学指标之... 目的探讨NF-κB、雌激素受体(ER)、人上皮细胞生长因子受体-2(HER2)和增殖细胞核抗原(PCNA)等在乳腺癌中的蛋白表达特征,以及NF-κB活化与乳腺癌的ER、HER2、PCNA表达水平以及肿瘤淋巴结转移、肿瘤大小和组织学分级等临床病理学指标之间的相关性。方法采用免疫组化方法对60例乳腺癌和对应的癌旁组织的NF-κB、ER、HER2和PCNA等分子标志物的表达情况进行检测分析,同时收集对应的临床病理学数据。结果60例乳腺癌和癌旁组织的NF-κB活化率分别为50.0%(30/60)和40.0%(24/60)。乳腺癌与对应的癌旁组织的NF-κB活化率差异无显著性(P>0.05)。乳腺癌组织中的NF-κB活化与HER2表达呈正相关,与ER表达呈负相关。ER阴性/HER2阳性组的乳腺癌组织的NF-κB活化率为77.8%(14/18),明显高于其他组(P<0.001)。组织学分化低级别的乳腺癌组织的NF-κB活化率分别为57.1%(Ⅲ级)和50.3%(Ⅱ级),明显高于高分化组35.7%(Ⅰ级)(P<0.05)。乳腺癌组织的NF-κB活化率也与其大小和淋巴结转移相关,同时也与乳腺癌细胞的PCNA表达水平相关。结论乳腺癌的演化过程中有不同程度的NF-κB活化,但与HER2表达呈正相关,与ER表达呈负相关。NF-κB具有促进增殖和迁移、抑制分化和凋亡的作用,是乳腺癌形成过程中的一个发生失调的分子,可能成为抗癌治疗的靶位。 展开更多

关键词 乳腺癌 细胞核因子ΚB 雌激素受体 人上皮细胞生长因子受体 增殖细胞核抗原

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罗格列酮对OLETF大鼠肺组织TGF-β1／Smad信号转导途径的影响 被引量：2

11

作者 赵伟 姜丽娟 +4 位作者 朱梦瑜 刘佳 张雅静 陈晓琴 张宏 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期226-231,共6页

目的探讨罗格列酮对自发性2型糖尿病Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty(OLETF)大鼠肺组织转化生长因子(TGF)-β1/Smad信号转导途径的影响。方法 OLETF大鼠16只,分为未治疗的OLETF组和接受罗格列酮治疗组(OLETF/L组)各8只,设Long Evans ... 目的探讨罗格列酮对自发性2型糖尿病Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty(OLETF)大鼠肺组织转化生长因子(TGF)-β1/Smad信号转导途径的影响。方法 OLETF大鼠16只,分为未治疗的OLETF组和接受罗格列酮治疗组(OLETF/L组)各8只,设Long Evans Tokushima Otsuka(LETO)大鼠8只为对照组。免疫组织化学分析各组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7、纤维连接蛋白(FN)和Ⅲ型胶原表达。结果与LETO组大鼠相比,OLETF组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3、FN和Ⅲ型胶原表达均显著增加(P<0.01),Smad7表达显著减少(P<0.01);OLETF/L组比OLETF组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3、FN和Ⅲ型胶原表达均显著减少(P<0.01),Smad7表达显著增加(P<0.01)。结论罗格列酮可能通过调控TGF-β1/Smad信号转导途径抗糖尿病肺纤维化。 展开更多

关键词 糖尿病 肺 罗格列酮 转化生长因子-β1 SMAD 免疫组织化学 大鼠

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新辅助化疗后非小细胞肺癌患者组织中谷胱甘肽S转移酶π的变化

12

作者 王国锦 卢奕 张丽彤 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第14期1278-1279,共2页

关键词 新辅助化疗 非小细胞肺癌 谷胱甘肽S转移酶Π 肿瘤切除术 免疫组织化学法 耐药

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罗格列酮对OLETF大鼠肺组织TGF-β1／JNK信号转导途径的影响 被引量：1

13

作者 赵伟 陈晓琴 +1 位作者 朱梦瑜 张宏 《中国实用医刊》 2011年第4期1-3,6,共4页

目的 探讨罗格列酮对自发性2型糖尿病OLETF大鼠肺组织转化生长因子-1β（TGF-β1）／c—Jun氨基末端激酶（JNK）信号转导途径的影响。方法将16只30周龄成模OLETF大鼠分为OLETF组和罗格列酮治疗组（OLETF／L纽），设LETO大鼠8只为对照组... 目的 探讨罗格列酮对自发性2型糖尿病OLETF大鼠肺组织转化生长因子-1β（TGF-β1）／c—Jun氨基末端激酶（JNK）信号转导途径的影响。方法将16只30周龄成模OLETF大鼠分为OLETF组和罗格列酮治疗组（OLETF／L纽），设LETO大鼠8只为对照组。免疫组织化学分析肺组织TGF—p1、磷酸化（P）-JNK、I型胶原表达。结果与LETO组大鼠相比，OLETF组大鼠肺组织TGF—β1、P—JNK表达（7．4438±0，6397vs1．1844±0．2066、5．7025±0．5530VS1．5875±0．1727）及Ⅰ型胶原的阳性面积比、平均光密度（0．1705±0．0110VS0．0550±0．0048、0．0597±0．0066VS0．0292±0．0019）均显著增加（P〈0．05）。与OLETF组大鼠相比，OLETF／L组大鼠肺组织TGF-β1、PJNK表达（1．8398±0．3591VS7．4438±0．6397、1．7500±0．1690vs5．7025±0．5530）及Ⅰ型胶原的阳性面积比、平均光密度（0．0856±0．0068VS0．1705±0．0110、0．0351±0．0059VS0．0597±0．0066）均显著减少（P〈0．05）。结论罗格列酮可能通过调控TGF-β1／JNK信号转导途径改善糖尿病肺纤维化。 展开更多

关键词 糖尿病 肺 罗格列酮 转化生长因子-β1c—Jun氨基末端激酶

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2型糖尿病大鼠肺组织内皮素-1、降钙素基因相关肽及P物质水平变化及其对肺动脉高压的影响 被引量：1

14

作者 赵伟 马丽云 +2 位作者 朱梦瑜 程静丽 张宏 《中华糖尿病杂志》 CAS 2010年第4期-,共4页

目的 探讨2型糖尿病大鼠肺组织内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)、P物质(SP)的变化.方法 3个月龄健康雄性Wistar大鼠10只,采用高脂饲料喂养联合30μg/g链脲佐菌素尾静脉注射制备2型糖尿病大鼠模型.另设正常对照组(n=8),给予普通... 目的 探讨2型糖尿病大鼠肺组织内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)、P物质(SP)的变化.方法 3个月龄健康雄性Wistar大鼠10只,采用高脂饲料喂养联合30μg/g链脲佐菌素尾静脉注射制备2型糖尿病大鼠模型.另设正常对照组(n=8),给予普通饮食.造模成功后12周末股动脉放血处死大鼠,取右下肺组织行Weigert来复红弹力纤维染色,计算与呼吸性细支气管、肺泡管伴行的肺小动脉管壁厚度占血管外径百分比(WT%)以及管壁面积占血管总面积百分比(WA%).应用免疫组织化学方法观察肺组织ET-1、CGRP、SP表达水平.数据统计采用独立样本t检验.结果 与正常对照组比较,糖尿病组大鼠肺泡隔面积与视场总面积比(0.42±0.10 vs 0.29±0.06,t=5.842,P＜0.05)、肺动脉WT%(26%±8%vs 19%±9%,t=3.023,P＜0.05)和WA%(42%±8% vs 36%±9%,t=2.526,P＜0.05)均显著增加,ET-1、SP平均吸光度(ET-1:86±5 vs 83±4,t=2.402,P＜0.05;SP:101±4 vs 100±3,t=2.530,P＜0.05)和阳性面积/视场总面积比(ET-1:0.016±0.017 vs0.010±0.008,t=2.501,P＜0.05;SP:0.014±0.014 vs 0.009±0.009,t=2.127,P＜0.05)显著增加,CGRP平均吸光度和阳性面积/视场总面积比差异无统计学意义.结论 糖尿病大鼠存在肺动脉高压的病理结构改变,可能与其肺组织ET-1表达增加有关. 展开更多

关键词 糖尿病 2型 肺 内皮素-1 降钙素基因相关肽 P物质

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核糖体蛋白S6激酶1基因沉默对高脂喂养小鼠肝脏炎性因子和肝脏胰岛素抵抗的影响

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作者 李树颖 李晶 +2 位作者 于德民 常柏 姚智 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 2013年第10期624-629,共6页

目的研究核糖体蛋白S6激酶1（S6K1）基因沉默对肝脏炎性因子表达的影响，探讨S6K1在肝脏胰岛素抵抗中的作用机制。方法将48只体重12．6～14．8g的6周龄雄性C57BL／6J小鼠按随机数字表法分为4组：普食对照组[普通饲料（ND）＋含U6启动子... 目的研究核糖体蛋白S6激酶1（S6K1）基因沉默对肝脏炎性因子表达的影响，探讨S6K1在肝脏胰岛素抵抗中的作用机制。方法将48只体重12．6～14．8g的6周龄雄性C57BL／6J小鼠按随机数字表法分为4组：普食对照组[普通饲料（ND）＋含U6启动子空载体腺病毒组（pU6Ax组），即ND＋pU6Ax组]、普食实验组[ND＋S6K1短发夹RNA（shRNA）重组基因腺病毒组，即ND＋S6KIAx组]、高脂对照组[高脂饲料（HFD）’pU6Ax组，即HFD＋pU6Ax组]、高脂实验组（HFD＋S6K1Ax组），分别喂养16周。实验组和对照组尾静脉分别注射S6K1Ax、pU6Ax（均为普食实验组及对照组90ml，高脂实验组及对照组120ml，效价为2．0×10^10pfu／m1）。注射后第6天过夜饥饿后，4组各随机抽取6只行葡萄糖耐量实验，剩余的小鼠处死取肝脏，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测肝脏炎性因子单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-10mRNA的表达，Western blotting观察肝脏蛋白S6K1、S6K1苏氨酸389（S6K1-thr389）、胰岛素受体底物1（IRS1）丝氨酸1101（IRS1-ser1101）、IRS1丝氨酸636／639（IRS1-ser636／639）、蛋白激酶B丝氨酸473（Akt—ser473）、c—Jun氨基末端激苏氨酸183／酪氨酸185（JNK—thr183／tyr185）表达。两组比较采用t检验，多组问比较采用单因素方差分析。结果肝脏S6KI基因沉默后，与高脂对照组相比，HFD＋S6K1Ax组小鼠炎性因子MCP-1、TNF-α、IL-1βmRNA均表达下降（分别为0．549±0．016比0．871±0．081、0．635±0．079比0．905±0．059、0．642±0．042比1．327±0．025；t=9．55、6．71、34．07，均P〈0．05）。IL-6mRNA未表现出组间差异（P〉0．05），抗炎因子IL-10mRNA在HFD＋S6KIAx组肝脏S6K1基因沉默后升高（0．773±0．076比0．436±0．046，t=9．27，P〈0．05）。Western blotting显示与HFD＋pU6Ax组相比，HFD＋S6K1Ax组肝脏S6K1� 展开更多

关键词 核糖体蛋白S6激酶1 胰岛素抵抗 炎性因子 肝脏 高脂饮食

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绒毛膜促性腺激素对NK细胞活性的影响

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作者 李鈜钊 阎燕华 《标记免疫分析与临床》 CAS 2001年第3期147-149,共3页

为探讨绒毛膜促性腺激素 (HCG)对NK细胞活性的影响及其作用的机理 ,将健康人外周血单核细胞(+PBMC组 )及去除单核细胞的 (-PBMC组 )分别与HCG共同孵育后 ,以改良的MTT法检测NK细胞对其靶细胞K5 6 2 的杀伤活性。结果表明 :(1 )一定剂量 ... 为探讨绒毛膜促性腺激素 (HCG)对NK细胞活性的影响及其作用的机理 ,将健康人外周血单核细胞(+PBMC组 )及去除单核细胞的 (-PBMC组 )分别与HCG共同孵育后 ,以改良的MTT法检测NK细胞对其靶细胞K5 6 2 的杀伤活性。结果表明 :(1 )一定剂量 (2 5、50、1 0 0IU/mL)的HCG能显著抑制NK细胞的杀伤活性 ,其中以 50IU/mL的HCG作用最明显 ,而较低剂量 (1 2 .5IU/mL)和较高剂量 (2 0 0IU/mL)的HCG则无抑制作用。(2 ) 展开更多

关键词 绒毛膜促性腺激素 NK细胞 免疫调节

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促甲状腺激素对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响

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作者 朱梦瑜 张雅静 +3 位作者 常柏 崔姗姗 宋旭臣 张宏 《中国医药》 2011年第6期674-676,共3页

目的 探讨促甲状腺激素（TSH）对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）表达的影响。方法体外诱导3T3-L1前脂肪细胞为成熟脂肪细胞。以不同浓度牛TSH（0．01IU／L、0．1IU／L、1IU／L）刺激成熟脂肪细胞，蛋白质印迹法分别检测48h后... 目的 探讨促甲状腺激素（TSH）对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）表达的影响。方法体外诱导3T3-L1前脂肪细胞为成熟脂肪细胞。以不同浓度牛TSH（0．01IU／L、0．1IU／L、1IU／L）刺激成熟脂肪细胞，蛋白质印迹法分别检测48h后成熟脂肪细胞GLUT4蛋白表达水平，ELISA方法检测细胞培养液中白细胞介素6（IL-6）水平。结果与空白对照组相比，以不同浓度（0．01、0．1、1IU／L）牛TSH刺激成熟脂肪细胞48h后GLUT4蛋白表达呈下降趋势，分别下降约23％、44％、74％（均P〈0．05），细胞培养液中IL-6水平明显增加[（101．9300±6．8396）、（104．1533±5．9619）、（129．01674-6．4232）μg／L比（93．2500±2．6695）μg／L，P〈0．05]。结论TSH可下调3T3-L1脂肪细胞GLUT4蛋白的表达。 展开更多

关键词 促甲状腺激素 脂肪细胞 葡萄糖转运蛋白质 白细胞介素6

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CD24分子调节百日咳毒素诱导小鼠急性肝损伤的实验研究

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作者 钟玉霞 葛睿 +2 位作者 吴丽媛 戴钰 张学军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期387-390,共4页

目的:探讨CD24分子对百日咳毒素诱导急性肝损伤的影响及其可能的分子机制。方法:建立百日咳毒素诱导小鼠急性肝损伤的实验模型,观察anti-CD24中和抗体(200μg/mouse)和百日咳毒素(200 ng/mouse)联合注射组小鼠的生存率,H&E染色观察... 目的:探讨CD24分子对百日咳毒素诱导急性肝损伤的影响及其可能的分子机制。方法:建立百日咳毒素诱导小鼠急性肝损伤的实验模型,观察anti-CD24中和抗体(200μg/mouse)和百日咳毒素(200 ng/mouse)联合注射组小鼠的生存率,H&E染色观察小鼠肝组织损伤,血清化学方法检测小鼠谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)等肝功能的生化指标,ELISA方法检测小鼠血清中TNFα-的含量,流式细胞仪分析anti-CD24中和抗体对百日咳毒素诱导小鼠kupffer细胞(存在于肝脏中的巨噬细胞,KC)凋亡率的影响。结果:一定剂量的anti-CD24中和抗体和百日咳毒素联合注射组(实验组)生存率显著低于对照组;H&E染色观察实验组小鼠肝出血程度明显高于对照组,实验组小鼠ALT、AST等肝功能生化指标显著高于对照组(P<0.05);ELISA检测实验组小鼠血清中TNFα-明显升高(P<0.05);流式细胞术分析表明:anti-CD24中和抗体导致小鼠kupffer细胞坏死百分数增加。结论:CD24分子抑制百日咳毒素诱导的小鼠急性肝损伤。 展开更多

关键词 CD24分子 百日咳毒素 急性肝损伤 枯否氏细胞

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雌激素对大鼠实验性自身免疫性甲状腺炎的影响 被引量：17

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作者 郭小芹 田恩江 +2 位作者 张佳丽 赵树君 王金龙 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期151-154,共4页

目的　研究雌激素在诱发实验性自身免疫性甲状腺炎 (EAT)形成中的影响。方法　 10周龄Wistar大鼠进行双侧卵巢切除术后采用同种属SD大鼠甲状腺球蛋白 (Tg)免疫诱发EAT。病理切片HE染色观察甲状腺炎症反应。采用放免方法测定血清中E2 、... 目的　研究雌激素在诱发实验性自身免疫性甲状腺炎 (EAT)形成中的影响。方法　 10周龄Wistar大鼠进行双侧卵巢切除术后采用同种属SD大鼠甲状腺球蛋白 (Tg)免疫诱发EAT。病理切片HE染色观察甲状腺炎症反应。采用放免方法测定血清中E2 、PRL水平。间接酶联免疫吸附实验 (ELISA )测定血清Tg抗体 (TgAb)水平。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测甲状腺组织中γ 干扰素 (IFN γ)、白细胞介素 10 (IL 10 )mRNA的表达水平。结果　大鼠切除双侧卵巢后 ,其血清中雌二醇 ( 17.60± 1.0 2 )pmol/L和PRL( 2 .45± 0 .15 ) μg/L水平明显低于未切除卵巢组〔分别为 ( 5 8.5 6± 6.99) pmol/L和 ( 3 .2 2± 0 .17) μg/L〕(均P <0 .0 1) ,实验性自身免疫性甲状腺炎的发病率和甲状腺组织中炎细胞浸润程度也均较未切除卵巢直接诱发EAT组明显减轻 ,甲状腺组织中IFN γmRNA的表达水平 ( 0 .87± 0 .0 3 )较未切除卵巢直接诱发EAT组 ( 0 .99± 0 .0 0 )明显下降 (P <0 .0 5 ) ,而IL 10mRNA的表达水平 ( 0 .98± 0 .0 1)则高于未切除卵巢直接诱发EAT组 ( 0 .83± 0 .0 5 )。诱发为EAT的两组大鼠血清TGAb平均水平 ( 1.3 9± 0 .0 3 )明显高于非诱发EAT对照组的平均水平 ( 0 .18± 0 .0 0 )(P <0 .0 1)。 展开更多

关键词 雌激素 大鼠 实验性自身免疫性甲状腺炎 雌二醇 Γ-干扰素

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激活素A对RAW264.7巨噬细胞活性的调节作用 被引量：14

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作者 张鹏宇 王世瑶 +3 位作者 霍德胜 徐桂月 张学军 柳忠辉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期137-140,共4页

目的探讨激活素A对参与炎症反应的小鼠巨噬细胞活性调节作用。方法以LPS刺激活化的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞作为阳性参照,ELISA法检测激活素A及LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7细胞IL-1β分泌水平,还原酶法分析NO分泌水平,RT-PC... 目的探讨激活素A对参与炎症反应的小鼠巨噬细胞活性调节作用。方法以LPS刺激活化的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞作为阳性参照,ELISA法检测激活素A及LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7细胞IL-1β分泌水平,还原酶法分析NO分泌水平,RT-PCR检测IL-1β和iNOS mRNA的表达,瑞氏染色检测RAW264.7细胞吞噬活性。结果在激活素A刺激下RAW264.7细胞IL-1β和NO分泌水平均明显升高,IL-1β和iNOS mRNA表达亦增加,巨噬细胞吞噬活性增强;激活素A和LPS共刺激RAW264.7细胞时,激活素A明显抑制LPS刺激的RAW264.7细胞IL-1β和NO产生水平,以及IL-1β和iNOSmRNA表达,巨噬细胞吞噬活性也明显低于LPS单独刺激组。结论激活素对巨噬细胞的活性调节具有双重作用,这种作用与巨噬细胞的激活状态有关。 展开更多

关键词 RAW264.7 激活素A LPS IL-1Β 一氧化氮

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