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M2型肿瘤相关巨噬细胞通过调控肺癌细胞能量代谢重编程促进癌细胞的增殖、侵袭和迁移
1
作者 仇友政 宋政 +2 位作者 杨利杰 李俊 王靖 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第7期1215-1221,共7页
目的:研究M2型肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)对肺癌细胞增殖、侵袭、迁移及能量代谢重编程的影响。方法:利用终浓度为320 ng/mL佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)刺激THP-1细胞为巨噬细胞(M0)后,利用1... 目的:研究M2型肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)对肺癌细胞增殖、侵袭、迁移及能量代谢重编程的影响。方法:利用终浓度为320 ng/mL佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)刺激THP-1细胞为巨噬细胞(M0)后,利用100 ng/mL PMA+IL-4(20 ng/mL)+IL-13(20 ng/mL)刺激48 h诱导成M2型巨噬细胞,qRT-PCR检测iNOS、IL-1β、TNF-α、Arg-1、CCL-18、IL-10的表达,免疫荧光检测CD206、CD86的表达。收集M0型(M0-CM)及M2型巨噬细胞条件培养基(M2-CM),利用M0-CM、M2-CM分别作用肺癌细胞(A549、H1299)48 h后,EdU检测细胞增殖能力变化;Annexin V-FITC/PI双染检测肺癌细胞凋亡;Transwell检测细胞侵袭及迁移能力;LC-MS/MS检测肺癌细胞能量代谢变化。结果:与M0巨噬细胞比较,M2型巨噬细胞中iNOS(P<0.01)、IL-1β(P<0.01)、TNF-α(P<0.01)的表达显著降低,Arg-1(P<0.01)、CCL-18(P<0.01)、IL-10(P<0.01)的表达显著升高;表面抗原CD206的表达显著升高,而CD86的表达显著降低。与M0-CM比较,M2-CM可显著促进肺癌细胞(A549、H1299)增殖(P<0.01)、抑制肺癌细胞(A549、H1299)凋亡(P<0.01)、促进肺癌细胞(A549、H1299)侵袭及迁移(P<0.01)。与M0-CM比较,M2-CM可显著促进D-木酮糖5-磷酸、磷酸乙醇胺、尿苷5-单磷酸、肌苷-1-磷酸、腺苷酸、葡萄糖、D-核酮糖5-磷酸、6-磷酸葡萄糖酸、果糖1,6-二磷酸、2-磷酸-D-甘油酸等含量,降低谷氨酰胺、酪氨酸、亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸等含量。KEGG富集分析发现,差异代谢产物主要富集在氨基酸生物合成、胺酰tRNA生物合成、矿物质吸收、蛋白质的降解及吸收等通路。结论:M2型肿瘤相关巨噬细胞可促进肺癌细胞增殖、侵袭及迁移,抑制肺癌细胞凋亡;其机制可能与调控肺癌细胞能量代谢重编程相关。 展开更多
关键词 肺癌 细胞增殖 肿瘤相关巨噬细胞 肿瘤免疫微环境 代谢重编程
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长链非编码RNA FGD5-AS1在肺癌组织中的表达及其对细胞增殖的影响
2
作者 王靖 杨利杰 +3 位作者 宋政 张钰璐 王瑞宇 李俊 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第9期1619-1625,共7页
目的:研究长链非编码RNA(LncRNA)FGD5-AS1在肺癌组织中的表达及其对肺癌细胞增殖的影响。方法:RNA-seq分析肺癌组织中LncRNA及微小RNA(miRNA)的表达改变,根据表达量的改变确定候选LncRNA FGD5-AS1;RT-qPCR检测分析肺癌组织及肺癌细胞中F... 目的:研究长链非编码RNA(LncRNA)FGD5-AS1在肺癌组织中的表达及其对肺癌细胞增殖的影响。方法:RNA-seq分析肺癌组织中LncRNA及微小RNA(miRNA)的表达改变,根据表达量的改变确定候选LncRNA FGD5-AS1;RT-qPCR检测分析肺癌组织及肺癌细胞中FGD5-AS1的表达;免疫荧光检测分析肺癌组织中细胞增殖和抗原Ki-67的表达;通过线性回归分析肺癌组织中FGD5-AS1与Ki-67的表达相关性。生物在线软件联合miRNA测序结果,并通过荧光素酶检测分析FGD5-AS1与miR-129-5p结合可能性。将A549细胞分成空白对照组(Control)、si-FGD5-AS1组、miR-mimics组(miR-129-5p mimics)、si-FGD5-AS1与miR-mimics联合组,利用脂质体法将si-FGD5-AS1、miR-129-5p mimics分别或联合转染入A549细胞,24 h后,利用CCK-8检测细胞活力、Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡、蛋白印迹(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白(Bad、Bcl-2、Cleaved Caspase-3)的表达。结果:FGD5-AS1在肺癌组织及肺癌细胞中的表达均显著升高(P<0.01),其表达量与Ki-67的表达呈正相关(r=0.641 8,P=0.000)。miR-129-5p在肺癌组织及细胞中的表达均显著降低(P<0.01),生物在线软件及荧光素酶检测验证,FGD5-AS1与miR-129-5p存在结合位点;在肺癌组织中,miR-129-5p的表达与Ki-67的表达呈负相关(r=-0.752 8,P=0.000)。与Control组比较,si-FGD5-AS1可显著抑制A549细胞的增殖(P<0.01)、促进其凋亡(P<0.01),Bad及Cleaved caspase-3的表达均显著升高(均P<0.01),Bcl-2的表达显著降低(P<0.05);与si-FGD5-AS1组比较,si-FGD5-AS1与miR-mimics联合组可进一步抑制细胞增殖(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01),Bad及Cleaved caspase-3的表达均显著提高(均P<0.01),Bcl-2的表达显著降低(P<0.01)。结论:肺癌组织中FGD5-AS1的表达显著上调,可能通过抑制hsa-miR-129-5p的表达而促进肺癌细胞增殖,参与肺癌的发生及进展。 展开更多
关键词 肺癌 长链非编码RNA 细胞增殖 微小RNA
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长链非编码RNA NORAD在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖能力的影响
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作者 王靖 杨利杰 +3 位作者 宋政 王瑞宇 张钰璐 李俊 《海南医学》 CAS 2023年第9期1217-1224,共8页
目的研究长链非编码RNA DNA损伤诱导的非编码RNA(NORAD)在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖的影响。方法RNA-seq分析肺癌组织中LncRNA及miRNA的表达改变,根据表达量确定候选LncRNA;q RT-PCR检测分析肺癌组织及肺癌细胞中候选NORAD的表达... 目的研究长链非编码RNA DNA损伤诱导的非编码RNA(NORAD)在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖的影响。方法RNA-seq分析肺癌组织中LncRNA及miRNA的表达改变,根据表达量确定候选LncRNA;q RT-PCR检测分析肺癌组织及肺癌细胞中候选NORAD的表达;免疫荧光检测分析肺癌组织中细胞增殖核抗原Ki-67的表达;通过线性回归分析肺癌组织中NORAD与Ki-67的表达相关性。生物在线软件联合miRNA测序结果,并通过荧光素酶检测分析NORAD与miR-26b-5p、miR-654-5p结合情况。将A549细胞分成空白对照组(Control)、si-NORAD组、miR-26b-5p mimics、miR-654-5p mimics、si-NORAD与miR-26b-5p mimics联合组、si-NORAD与miR-654-5p mimics联合组,利用EdU检测细胞增殖能力、Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡、蛋白印迹(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白(Bad、Bcl-2、Cleaved Caspase-3)的表达。结果NORAD在肺癌组织及肺癌细胞中的表达均显著升高(均P<0.01),其表达量与Ki-67的表达呈正相关(r=0.646,P<0.01)。miR-26b-5p、miR-654-5p在肺癌组织及细胞中的表达均显著降低(均P<0.01),生物在线软件及荧光素酶检测验证,NORAD与miR-26b-5p、miR-654-5p存在结合位点;在肺癌组织中,miR-26b-5p(r=-0.403,P=0.000)、miR-654-5p(r=-0.423,P=0.000)的表达与Ki-67的表达均呈负相关;miR-26b-5p(r=-0.435,P<0.05)与miR-654-5p(r=-0.395,P<0.05)的表达与NORAD表达均呈负相关。与Control组比较,si-NORAD可显著抑制A549细胞的增殖(P<0.01)、促进其凋亡(P<0.01),Bad及Cleaved caspase-3的表达均显著升高(均P<0.01),Bcl-2的表达显著降低(P<0.05);与si-NORAD组比较,si-NORAD与miR-26b-5p mimics联合组、si-NORAD与miR-654-5p mimics联合组可进一步抑制细胞增殖(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01)。结论肺癌中NORAD的表达显著上调,可能通过抑制mi R-26b-5p、mi R-654-5p的表达而促进肺癌细胞增殖,NORAD可能作为肺癌的诊断标志物。 展开更多
关键词 肺癌 长链非编码RNA DNA损伤诱导的非编码RNA 细胞增殖 微小RNA
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局部枸橼酸抗凝在脓毒症患者连续性肾脏替代治疗中的应用分析
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作者 解瑛 杨利杰 《中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生》 2023年第9期75-77,共3页
观察行连续性肾脏替代治疗(CRRT)的脓毒症患者采用局部枸橼酸钠抗凝疗效。方法 研究对象为脓毒症患者,研究方法为分组对比,74例患者均分至观察组和对照组,两组均行CRRT,不同之处在于抗凝方法,分别使用局部枸橼酸钠抗凝和肝素钠全身抗凝... 观察行连续性肾脏替代治疗(CRRT)的脓毒症患者采用局部枸橼酸钠抗凝疗效。方法 研究对象为脓毒症患者,研究方法为分组对比,74例患者均分至观察组和对照组,两组均行CRRT,不同之处在于抗凝方法,分别使用局部枸橼酸钠抗凝和肝素钠全身抗凝,分析治疗结果。结果 治疗后,两组PT、PLT均发生了变化,和治疗前的数据对比,P均<0.05,观察组治疗后APTT变化不明显(P>0.05),对照组APTT明显升高(P<0.05)。和对照组相比,观察组治疗后APTT、PT均较低,PLT较高(P均<0.05)。治疗后两组的Scr、BUN均下降(P均<0.05),且观察组均低于对照组(P均<0.05)。观察组出血率低于对照组(P<0.05)。治疗前后,组间的疾病严重度评分对比均无差异(P>0.05)。结论 局部枸橼酸钠抗凝与肝素钠全身抗凝用于脓毒症患者的CRRT治疗均有良好抗凝效果,能够减轻疾病严重度,尽快改善患者病情,最终取得较佳的治疗功效。但与肝素钠相比出血风险低,对肾功能的改善作用明显。 展开更多
关键词 局部枸橼酸抗凝 脓毒症 连续性肾脏替代治疗
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促红细胞生成素产生肝细胞受体A2、肝配蛋白A1在乳腺癌组织的表达及意义 被引量：3
5
作者 周凌智 张本斯 +6 位作者 鲁雪静 赵斌 时娅琪 张丽梅 杨利杰 王宁 李庄 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期615-619,共5页
目的观察乳腺癌组织中促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)、肝配蛋白A1(EphrinA1)表达。方法采用免疫组织化学(IHC)法检测乳腺癌组织(选取2013年1月至2018年12月于大理大学第一附属医院行乳腺癌根治术或改良根治术且术前未经放化疗... 目的观察乳腺癌组织中促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)、肝配蛋白A1(EphrinA1)表达。方法采用免疫组织化学(IHC)法检测乳腺癌组织(选取2013年1月至2018年12月于大理大学第一附属医院行乳腺癌根治术或改良根治术且术前未经放化疗或其他治疗的女性患者术后标本250例)中EphA2、EphrinA1蛋白表达,用原位杂交(ISH)检测EphA2、EphrinA1 mRNA表达,间接免疫荧光法(IFA)检测EphA2、EphrinA1表达。组间采用χ^(2)检验进行样本率比较、相关分析。结果250例乳腺癌病理标本中EphA2、EphrinA1蛋白阳性率分为74.80%、71.60%;EphA2、EphrinA1 mRNA阳性率分为83.60%、72.80%。EphA2、EphrinA1蛋白及相应mRNA的阳性率与临床分期、淋巴结转移、组织学分级明显相关(χ^(2)=16.303、23.296、9.119、21.462、6.998、11.807、20.648、11.709、19.816、7.256、7.276、11.510,P值均<0.05)。IFA检测正常乳腺细胞中EphA2、EphrinA1几乎不表达而乳腺癌细胞中高表达。结论EphA2、EphrinA1可能与乳腺癌发生进展有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 基因表达
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