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应用辛酸硫酸胺法提取小鼠腹水和血清中的IgG抗体 被引量:18
1
作者 白丽 钱金栿 王晶 《大理医学院学报》 2000年第4期2-3,共2页
目的:从小鼠腹水和血清中纯化 IgG抗体。方法:首先用辛酸沉淀小鼠腹水和血清中的非免疫球蛋白,然后用固体硫酸胺提取抗人 T和 B细胞白血病单克隆抗体 (IgG1和 IgG2b)和多克隆 IgG抗体。结果:经 SDS-PAGE和活细胞免疫荧光法鉴定,获... 目的:从小鼠腹水和血清中纯化 IgG抗体。方法:首先用辛酸沉淀小鼠腹水和血清中的非免疫球蛋白,然后用固体硫酸胺提取抗人 T和 B细胞白血病单克隆抗体 (IgG1和 IgG2b)和多克隆 IgG抗体。结果:经 SDS-PAGE和活细胞免疫荧光法鉴定,获得了纯度高、活性好的抗体,腹水中单抗的回收率达 80%以上。结论:本方法是一种简单、价廉且有效的纯化小鼠腹水和血清 IgG抗体的方法。 展开更多
关键词 IGG抗体 辛酸 硫酸胺 纯化 腹水 血清
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应用Protein G纯化细胞培养上清中的大鼠单抗 被引量:17
2
作者 白丽 Dent,L 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期207-209,共3页
用miniPerm系统旋转连续培养大鼠杂交瘤细胞株,获得大量含抗鼠IL-4(IgG1)和IL-5(IgG1和IgG2a)抗体的培养上清;经PM10膜超滤、50%饱和硫酸铵沉淀及链球菌G蛋白-琼脂糖亲和层析纯化IgG单... 用miniPerm系统旋转连续培养大鼠杂交瘤细胞株,获得大量含抗鼠IL-4(IgG1)和IL-5(IgG1和IgG2a)抗体的培养上清;经PM10膜超滤、50%饱和硫酸铵沉淀及链球菌G蛋白-琼脂糖亲和层析纯化IgG单抗。结果每升杂交瘤细胞培养上清得到大鼠IgG22~36mg;1次可纯化抗体达20mg;经SDS-PAGE及ELISA鉴定,所得到的抗体纯度高、活性保持良好。 展开更多
关键词 杂交瘤 大鼠 单克隆抗体 细胞培养
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生物素化抗细胞因子单克隆抗体的制备 被引量:5
3
作者 白丽 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期222-224,共3页
目的探讨生物素化单克隆抗体的制备方法。方法应用经超滤、硫酸铵沉淀、Protein G亲和层析纯化的来源于杂交瘤细胞培养上清中的大鼠抗小鼠 IL - 5、IL - 4和 IFN -γ单克隆抗体 ,以每 mg抗体加入生物素制剂 80μg室温反应6 0 min,其反... 目的探讨生物素化单克隆抗体的制备方法。方法应用经超滤、硫酸铵沉淀、Protein G亲和层析纯化的来源于杂交瘤细胞培养上清中的大鼠抗小鼠 IL - 5、IL - 4和 IFN -γ单克隆抗体 ,以每 mg抗体加入生物素制剂 80μg室温反应6 0 min,其反应液经 Sephadex G- 2 5层析纯化 ,然后用生物素 -亲和素 EL ISA法测定所制备的生物素化抗体活性。结果该法制备的生物素化抗体活性高 ,用于检测感染巴西钩虫的 IL - 5转基因小鼠和非转基因小鼠的血清标本敏感性好。结论该生物素化抗体的制备方法具有制备简单、稳定性好等优点。 展开更多
关键词 生物素 生物素化 单克隆抗体 ELISA 制备
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外周血细胞的分离及其在免疫偶合物研究中的应用 被引量:2
4
作者 白丽 王晶 《大理医学院学报》 2001年第1期3-5,共3页
目的:探讨分离外周血细胞的方法及该方法在免疫偶合物制备过程中的应用价值。方法:应用 Ficoll/Hypaque分离液经密度梯度离心得到单个核细胞、红细胞及混有红细胞的粒细胞;用 0. 83%氯化铵溶解混杂的红细胞得到粒细胞;利用单核细... 目的:探讨分离外周血细胞的方法及该方法在免疫偶合物制备过程中的应用价值。方法:应用 Ficoll/Hypaque分离液经密度梯度离心得到单个核细胞、红细胞及混有红细胞的粒细胞;用 0. 83%氯化铵溶解混杂的红细胞得到粒细胞;利用单核细胞粘附玻璃的特性除去淋巴细胞中的单核细胞;用 AET-E玫瑰花试验分离 T淋巴细胞及 B淋巴细胞。将分到的各血细胞与单克隆抗体及免疫偶合物反应,活细胞免疫荧光法测定。结果:分到的各种血细胞 2h活性达 96%以上,细胞得量较高。所测定的单抗特异性高,活性保持良好。结论:该法是一种简单易行、经济方便的方法,可用于免疫偶合物的制备研究中。 展开更多
关键词 外周血 血细胞 免疫偶合物 单克隆抗体
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一种制备兔抗人IgG抗体的简易方法 被引量:5
5
作者 王晶 白丽 +2 位作者 郭利军 王涛 吴利先 《大理学院学报(医学版)》 1999年第1期60-60+63,63,共2页
目前,制备兔抗人IgG的方法很多,但没有一个统一的具体方案,难以制备出理想的高效价抗体。我们根据抗体产生的基本原理,参照有关文献,探索出一种能得到高效价抗体的简易的方法,介绍如下:材料和方法1抗原制备参照文献[1、2... 目前,制备兔抗人IgG的方法很多,但没有一个统一的具体方案,难以制备出理想的高效价抗体。我们根据抗体产生的基本原理,参照有关文献,探索出一种能得到高效价抗体的简易的方法,介绍如下:材料和方法1抗原制备参照文献[1、2]进行。选取多份健康人混合血清,新... 展开更多
关键词 人IGG 兔抗人IgG抗体 家兔
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测定小鼠细胞因子的双抗体夹心ELISA法的建立及应用研究 被引量:1
6
作者 白丽 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期75-77,共3页
目的 建立敏感的测定小鼠IL - 5、IL - 4和IFN -γ水平的生物素 -链霉亲和素双抗体夹心ELISA法 ,并探讨该法在IL - 5转基因小鼠感染模型中的应用价值。方法 含大鼠抗小鼠IL - 4、IL - 5和IFN -γ单克隆抗体的杂交瘤细胞培养上清 ,经PM... 目的 建立敏感的测定小鼠IL - 5、IL - 4和IFN -γ水平的生物素 -链霉亲和素双抗体夹心ELISA法 ,并探讨该法在IL - 5转基因小鼠感染模型中的应用价值。方法 含大鼠抗小鼠IL - 4、IL - 5和IFN -γ单克隆抗体的杂交瘤细胞培养上清 ,经PM 10膜超滤、5 0 %饱和硫酸铵沉淀及ProteinG -Sepharose亲和层析纯化。应用活化生物素制剂对纯化的TR FK4、BVD6和AN18单克隆体抗体进行生物素化。用纯化的 2 μg/mlTRFK5、8μg/ml 11B11和 4 μg/mlR4 - 6A2分别作为测定小鼠IL - 5、IL - 4和IFN -γ的包被抗体 ,然后逐步加入样品、生物素化TRFK4 (1μg/ml)、BVD6 (2 μg/ml)和AN18(1μg/ml)、SA -HRPO和OPD ,硫酸终止反应后读取A490 值。结果 所建立的生物素 -链霉亲和素双抗体夹心ELISA法特异性和敏感性高 ,用于检测感染巴西日圆线虫感染的IL - 5转基因小鼠和非转基因小鼠的血清标本取得了较好的效果。 展开更多
关键词 细胞因子 生物素-链霉素亲和素 ELISA 巴西日圆线虫 免疫学方法
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细胞因子在支气管哮喘炎症中的作用
7
作者 白丽 钱金栿 《大理学院学报(医学版)》 1999年第4期61-63,共3页
目的: 探索细胞因子在支气管哮喘炎症中的作用。方法: 应用Medline 系统检索资料,并进行综合评述。结果:IL- 5、IL- 4、IL- 8 是增强支气管哮喘炎症的重要细胞因子;而IL-12、IFN- r、IL- 10 则... 目的: 探索细胞因子在支气管哮喘炎症中的作用。方法: 应用Medline 系统检索资料,并进行综合评述。结果:IL- 5、IL- 4、IL- 8 是增强支气管哮喘炎症的重要细胞因子;而IL-12、IFN- r、IL- 10 则起抑制作用。结论:细胞因子调节在支气管哮喘中起着重要作用,进一步的研究结果将为该病的诊断和治疗提供依据。 展开更多
关键词 支气管哮喘 细胞因子 炎症
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活细胞免疫荧光法在免疫偶合物研究中的应用 被引量:1
8
作者 白丽 王晶 《大理医学院学报》 2001年第4期1-2,共2页
目的:探讨活细胞免疫荧光法在免疫偶合物制备过程中的应用价值。方法:将被测试物与活细胞作用,正常兔血清作封闭,加入FITC—羊抗鼠IgG,固定液固定后荧光显微镜观察。结果:含抗T淋巴细胞白血病单抗腹水、单抗纯化物及单抗... 目的:探讨活细胞免疫荧光法在免疫偶合物制备过程中的应用价值。方法:将被测试物与活细胞作用,正常兔血清作封闭,加入FITC—羊抗鼠IgG,固定液固定后荧光显微镜观察。结果:含抗T淋巴细胞白血病单抗腹水、单抗纯化物及单抗偶合物的效价分别为1∶10240、5 x 10-8mol/L和 5 x 10-8mol/L。结论:活细胞免疫荧光法是一种简单、快速、结果易观察的方法,可用于单抗偶合物制备过程中的抗体活性测定。 展开更多
关键词 活细胞 免疫荧光 免疫偶合物 单克隆抗体
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医学细菌学实验课改革的尝试 被引量:1
9
作者 白丽 王晶 +5 位作者 张雷 郭利军 吴利先 王涛 李建蓉 申元英 《山西医科大学学报(基础医学教育版)》 2001年第4期308-308,313,共2页
为了在医学细菌学实验课中培养学生实际操作能力和独立工作的能力,我们在我院98级临床医学及护理学五年制本科学生中进行了精心选择实验内容、将实验课相对独立;以病例讨论开始、开设连续性综合实验;增加学生动手机会、培养学生实际工... 为了在医学细菌学实验课中培养学生实际操作能力和独立工作的能力,我们在我院98级临床医学及护理学五年制本科学生中进行了精心选择实验内容、将实验课相对独立;以病例讨论开始、开设连续性综合实验;增加学生动手机会、培养学生实际工作能力和配以录象及图片教学使教学规范化,内容直观化的细菌学实验课程的改革.结果显示,实验教学方式、方法及内容选择较好,得到了绝大部分学生的认可. 展开更多
关键词 医学细菌学 实验课题 教学改革
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套式RT-PCR在丙型肝炎诊断中的应用
10
作者 李建蓉 王晶 《大理医学院学报》 2001年第2期1-2,共2页
目的:探讨逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)在丙型肝炎诊断中的应用。方法:应用套式 RT- PCR检测肝炎病人血清中 HCVRNA,并同时用固相放射免疫法 (RIA)检测病人血清中抗 HCVRNA抗体。结果: 193份肝炎病人血清中 11. 9% (23/193)可检... 目的:探讨逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)在丙型肝炎诊断中的应用。方法:应用套式 RT- PCR检测肝炎病人血清中 HCVRNA,并同时用固相放射免疫法 (RIA)检测病人血清中抗 HCVRNA抗体。结果: 193份肝炎病人血清中 11. 9% (23/193)可检出 HCVRNA, 10. 9% (21/193)可检出抗 HCVRNA抗体,两种检测结果相符率达 98. 4%,结论:套式 RT- PCR对诊断丙型肝炎快速、特异性高,同时该检测法可避免放射性损伤和污染,在临床上对丙型肝炎的诊断有很大的应用价值。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 逆转录聚合酶链反应 放射免疫法
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解脲脲原体感染及其在不孕症中的致病性研究进展
11
作者 申元英 《大理学院学报(医学版)》 2001年第S1期62-65,共4页
目的:概述解脲脲原体感染在不孕症发生中的作用。方法:作者查阅了近年来的有关文献12篇,结果:解脲脲原体对生殖系统的炎性作用及其所致的男性生殖系统局部免疫功能下降,或女性抗精子抗体的产生是不孕症发生的可能机制。结论:该结... 目的:概述解脲脲原体感染在不孕症发生中的作用。方法:作者查阅了近年来的有关文献12篇,结果:解脲脲原体对生殖系统的炎性作用及其所致的男性生殖系统局部免疫功能下降,或女性抗精子抗体的产生是不孕症发生的可能机制。结论:该结果有可能为解脲脲原体所致的不孕症预防和治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 解脲脲原体 不孕 感染
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HCV重组体转染细胞系的研究
12
作者 李建蓉 《大理医学院学报》 2000年第4期1-2,87,共2页
目的:建立 HCV重组体转染 SMMC7721肝癌细胞模型。方法:采用 FUGENETM6转染法,然后用 RT-PCR法测定细胞内重组体 mRNA瞬时表达情况。结果: 67.5%的培养孔可筛选到转染细胞表达重组体 mRNA。结论:该转染法效率高,建立的细胞模型... 目的:建立 HCV重组体转染 SMMC7721肝癌细胞模型。方法:采用 FUGENETM6转染法,然后用 RT-PCR法测定细胞内重组体 mRNA瞬时表达情况。结果: 67.5%的培养孔可筛选到转染细胞表达重组体 mRNA。结论:该转染法效率高,建立的细胞模型可用于筛选抗病毒转录的药物。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 转梁 聚合酶链反应 重组体
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柯萨奇B组病毒感染与妇女自然流产的关系探讨
13
作者 申元英 杨占秋 邱雨石 《大理医学院学报》 2001年第2期38-40,共3页
目的:探讨柯萨奇 B组病毒与妇女妊娠早期自然流产的关系。方法:本文采用 RT-PCR检测 40例人工流产和 40例自然流产妇女胎盘绒毛组织中特异的 CVB-RNA,采用细胞培养的方法该两组妇女中 CVB-RNA阳性者进行培养。结果:自然流产组妇女... 目的:探讨柯萨奇 B组病毒与妇女妊娠早期自然流产的关系。方法:本文采用 RT-PCR检测 40例人工流产和 40例自然流产妇女胎盘绒毛组织中特异的 CVB-RNA,采用细胞培养的方法该两组妇女中 CVB-RNA阳性者进行培养。结果:自然流产组妇女胎盘绒毛组织 CVB-RNA检出率为 40% (16/ 40),人工流产组检出率为 17.5% (7/ 40)(P0.05)。结论: CVB感染在妇女自然流产中的作用尚待进一步研究。 展开更多
关键词 柯萨奇B组病毒 自然流产 RT-PCR 病毒分离
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机体抗结核分枝杆菌的免疫机制研究进展 被引量:12
14
作者 陶思雨 姜石松 +3 位作者 申元英 张建波 韩婷婷 李洪柳 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第2期233-237,共5页
结核菌是全球因感染而致死的主要因素。特别是结核合并艾滋病病毒感染及结核耐药菌株的出现,结核病发病率又明显现上升,形势非常严峻。了解结核分枝杆菌与机体的免疫关系及结核分枝杆菌如何逃逸免疫对结核病的预防、诊断和治疗尤其重要... 结核菌是全球因感染而致死的主要因素。特别是结核合并艾滋病病毒感染及结核耐药菌株的出现,结核病发病率又明显现上升,形势非常严峻。了解结核分枝杆菌与机体的免疫关系及结核分枝杆菌如何逃逸免疫对结核病的预防、诊断和治疗尤其重要。因此,本文在结核免疫中抗原提呈机制的概述、免疫逃逸中相关细胞因子和结核分枝杆菌自身因素的介绍、再次激活机体免疫的较新方法(如:利用结核重组重叠肽和T细胞反应缺陷的方法)、抗结核病中结核分枝杆菌细胞壁和休眠基因的研究以及结核疫苗展望等方面进行了总结。 展开更多
关键词 结核病 结核分枝杆菌 细胞免疫应答 免疫逃逸 综述
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Nrf2/HO-1通路在氧化应激和炎性反应中的作用 被引量:6
15
作者 于馨雅 申元英 郭乐 《医学研究杂志》 2023年第7期19-22,共4页
氧化应激是指体内氧化与抗氧化作用失衡,倾向于氧化,导致中性粒细胞炎性浸润、蛋白酶分泌增加、产生高活性分子,如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)以及大量氧化中间产物,如白... 氧化应激是指体内氧化与抗氧化作用失衡,倾向于氧化,导致中性粒细胞炎性浸润、蛋白酶分泌增加、产生高活性分子,如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)以及大量氧化中间产物,如白三烯、血栓素A 2等促炎介质,从而引起细胞凋亡和炎性反应。近年来研究表明,核转录因子红系2相关因子2/血红素加氧酶-1(nuclear factor erythroid-2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)通路可以通过抗炎、抗氧化等作用抵抗氧化应激损伤。因此,有效调控Nrf2/HO-1通路可成为治疗氧化应激性疾病和炎性疾病的重要靶点。 展开更多
关键词 核转录因子红系2相关因子2/血红素加氧酶-1 氧化应激 炎性反应
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脓毒血症的研究机制及免疫炎症因子吸附装置 被引量:7
16
作者 蹇艾利 郭乐 +1 位作者 申元英 姜石松 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第20期2550-2554,共5页
脓毒血症是机体感染后引起的一种全身性免疫应答,进展到后期可发展为脓毒血症休克、多器官衰竭甚至死亡。研究表明在脓毒血症的早期阶段,天然免疫系统被激活以便清除入侵细菌,如果控制不当,脓毒症引起细胞因子风暴特别是TNF、IL-1、IL-... 脓毒血症是机体感染后引起的一种全身性免疫应答,进展到后期可发展为脓毒血症休克、多器官衰竭甚至死亡。研究表明在脓毒血症的早期阶段,天然免疫系统被激活以便清除入侵细菌,如果控制不当,脓毒症引起细胞因子风暴特别是TNF、IL-1、IL-6等促炎因子大量释放从而加重炎症反应;到了晚期阶段由于巨噬细胞失活,抗炎因子增加则表现为免疫抑制状态。目前临床对于脓毒血症的治疗除了基础的对症用药外,还用血液净化装置以辅助缓解症状。本文通过文献检索,分析比较国内外常用免疫吸附装置的作用原理及优缺点,以期阐明免疫吸附装置在脓毒血症治疗中的前景及改进设想。 展开更多
关键词 免疫吸附 脓毒血症 炎症反应 治疗现状
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Toll样受体2(TLR2)与结核分枝杆菌感染的相关研究进展
17
作者 陈瑞枫 王瑄 +2 位作者 马枫茜 周鑫沛 吴利先 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期367-372,共6页
Toll样受体2(TLR2)是白细胞表面表达的一种模式识别受体,已发现多种配体可以激动或抑制TLR2的活化,进而调控免疫细胞的炎症和凋亡状态。结核分枝杆菌(MTB)通常寄生在巨噬细胞中,但MTB感染机体后,包括巨噬细胞在内的多种免疫细胞表面的T... Toll样受体2(TLR2)是白细胞表面表达的一种模式识别受体,已发现多种配体可以激动或抑制TLR2的活化,进而调控免疫细胞的炎症和凋亡状态。结核分枝杆菌(MTB)通常寄生在巨噬细胞中,但MTB感染机体后,包括巨噬细胞在内的多种免疫细胞表面的TLR2都可与其相互作用,释放细胞因子,影响MTB在体内的状态和增殖。在分子层面,TLR2的多态性有待更多探索,目前研究的大部分TLR2的多态性被认为与MTB的易感性无关。文中总结了TLR2与配体、感染后免疫调节活动、多态性与MTB易感性等方面的研究进展。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌(MTB) Toll样受体2(TLR2) 细胞因子 多态性 综述
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Xpert MTB/RIF在结核病诊断中的研究进展 被引量:6
18
作者 刘宇 吴利先 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期800-802,共3页
长久以来,结核病(TB)的诊断是依靠传统的结核分枝杆菌(MTB)抗酸染色涂片以及体外培养技术。但是,因为其检出率低,MTB生长缓慢等原因,传统方法并不能完全满足临床诊断的需要。利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(Xpert MTB/RIF)是一种... 长久以来,结核病(TB)的诊断是依靠传统的结核分枝杆菌(MTB)抗酸染色涂片以及体外培养技术。但是,因为其检出率低,MTB生长缓慢等原因,传统方法并不能完全满足临床诊断的需要。利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(Xpert MTB/RIF)是一种新的诊断技术,已经获得了世界卫生组织(WHO)的推荐。因其具有较高的灵敏度和特异性,并且操作简便的优势值得在世界范围内推广。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 Xpert MTB/RIF 结核病 综述
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乡镇卫生院护理管理存在的问题及对策 被引量:6
19
作者 李萍 吴利先 《临床合理用药杂志》 2016年第17期156-157,共2页
随着医药卫生体制改革的不断深入,医疗保障体系尤其是新型农村合作医疗制度的实施,乡镇卫生院住院患者较前大幅度增加,为基层护理管理工作带来了新的挑战和发展机遇。护理质量的好坏直接影响医疗水平,医疗水平的高低又决定了医院的... 随着医药卫生体制改革的不断深入,医疗保障体系尤其是新型农村合作医疗制度的实施,乡镇卫生院住院患者较前大幅度增加,为基层护理管理工作带来了新的挑战和发展机遇。护理质量的好坏直接影响医疗水平,医疗水平的高低又决定了医院的发展,而护理管理是提高护理质量的重中之重,尤其对于无高、精、尖设备和技术的基层医院来说尤为重要[1]。乡镇卫生院所处位置多数自然环境恶劣、交通不便,农牧民群众疾病及地方病罹患率较平原地区高,承担着较为繁重的医疗卫生任务。笔者结合乡镇卫生院护理管理工作实践,在调查医院护理工作运行现状的基础上,对乡镇卫生院护理队伍建设、患者管理、医院感染管理等方面存在的问题进行剖析,结合实际,提出可行的解决办法,为卫生行政部门和乡镇卫生院强化护理管理工作,促进藏区卫生事业的健康发展提供参考。 展开更多
关键词 乡镇卫生院 护理管理 问题 对策
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miR-146a在黏膜免疫中的调控作用 被引量:3
20
作者 李艳丽 申元英 郭乐 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期297-304,共8页
黏膜免疫是机体整个免疫网络的重要组成部分,又是具有独特结构和功能的独特免疫体系,其在抵抗感染方面起着极其重要的作用,是机体抵抗感染的第一道免疫屏障。近年来,越来越多的研究显示,微小RNA(miRNAs)具有强大的免疫调控功能,其中miR-... 黏膜免疫是机体整个免疫网络的重要组成部分,又是具有独特结构和功能的独特免疫体系,其在抵抗感染方面起着极其重要的作用,是机体抵抗感染的第一道免疫屏障。近年来,越来越多的研究显示,微小RNA(miRNAs)具有强大的免疫调控功能,其中miR-146a作为协调免疫反应和炎症信号最重要的miRNAs之一,在包括免疫反应在内的多种生物过程和途径中发挥关键作用。本文综述了miR-146a与黏膜免疫的相关研究进展。 展开更多
关键词 MICRORNAS MIR-146A 黏膜免疫 炎症
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