澳大利亚微生物学与免疫学课程教学特点的研究 被引量：5

1

作者 白丽 《医学教育》 1999年第3期24-25,共2页

如何上好微生物学与免疫学这门课？如何在这门课程中培养学生的实际工作能力？这是我们教师关心的问题。笔者在澳大利亚阿德雷得大学进修学习期间，专题观摩研究了该校微生物学与免疫学系开设的一些课程内容及特点。现将他们具有特色的... 如何上好微生物学与免疫学这门课？如何在这门课程中培养学生的实际工作能力？这是我们教师关心的问题。笔者在澳大利亚阿德雷得大学进修学习期间，专题观摩研究了该校微生物学与免疫学系开设的一些课程内容及特点。现将他们具有特色的教学内容及方法总结如下。一、课堂教... 展开更多

关键词 医学教育 微生物学 免疫学 教学特点

原文传递

大黄注射液对柯萨奇病毒B3感染小鼠的保护作用 被引量：2

2

作者 申元英 杨占秋 王晶 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 2001年第8期36-38,共3页

目的 :探讨中药大黄对柯萨奇病毒B3(CVB3)感染小鼠的保护作用。方法 :利用BALB C小鼠感染CVB3后建立的病毒性心肌炎模型 ,采用正交设计确定治疗方案 ,通过观察小鼠的中位生存期、生存率、病理学检查评价大黄注射液对柯萨奇病毒B3感染小... 目的 :探讨中药大黄对柯萨奇病毒B3(CVB3)感染小鼠的保护作用。方法 :利用BALB C小鼠感染CVB3后建立的病毒性心肌炎模型 ,采用正交设计确定治疗方案 ,通过观察小鼠的中位生存期、生存率、病理学检查评价大黄注射液对柯萨奇病毒B3感染小鼠的保护作用。结果 :经大黄注射液、病毒唑及 0 9%氯化钠治疗组的CVB3感染小鼠 ,中位生存期为 2 3、11、10 5d ,存活率为 35%、5%、5% ,大黄注射液治疗组小鼠组织病变程度减轻 ,病灶减少。结论 展开更多

关键词 大黄注射液 柯萨奇病毒B3 病毒性心肌炎

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柯萨奇B组病毒感染与妇女自然流产的关系探讨

3

作者 申元英 杨占秋 邱雨石 《大理医学院学报》 2001年第2期38-40,共3页

目的：探讨柯萨奇 B组病毒与妇女妊娠早期自然流产的关系。方法：本文采用 RT-PCR检测 40例人工流产和 40例自然流产妇女胎盘绒毛组织中特异的 CVB-RNA，采用细胞培养的方法该两组妇女中 CVB-RNA阳性者进行培养。结果：自然流产组妇女... 目的：探讨柯萨奇 B组病毒与妇女妊娠早期自然流产的关系。方法：本文采用 RT-PCR检测 40例人工流产和 40例自然流产妇女胎盘绒毛组织中特异的 CVB-RNA，采用细胞培养的方法该两组妇女中 CVB-RNA阳性者进行培养。结果：自然流产组妇女胎盘绒毛组织 CVB-RNA检出率为 40％ (16／ 40)，人工流产组检出率为 17.5％ (7／ 40)(P0.05)。结论： CVB感染在妇女自然流产中的作用尚待进一步研究。 展开更多

关键词 柯萨奇B组病毒 自然流产 RT-PCR 病毒分离

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应用辛酸硫酸胺法提取小鼠腹水和血清中的IgG抗体 被引量：18

4

作者 白丽 钱金栿 王晶 《大理医学院学报》 2000年第4期2-3,共2页

目的：从小鼠腹水和血清中纯化 IgG抗体。方法：首先用辛酸沉淀小鼠腹水和血清中的非免疫球蛋白，然后用固体硫酸胺提取抗人 T和 B细胞白血病单克隆抗体 (IgG1和 IgG2b)和多克隆 IgG抗体。结果：经 SDS-PAGE和活细胞免疫荧光法鉴定，获... 目的：从小鼠腹水和血清中纯化 IgG抗体。方法：首先用辛酸沉淀小鼠腹水和血清中的非免疫球蛋白，然后用固体硫酸胺提取抗人 T和 B细胞白血病单克隆抗体 (IgG1和 IgG2b)和多克隆 IgG抗体。结果：经 SDS-PAGE和活细胞免疫荧光法鉴定，获得了纯度高、活性好的抗体，腹水中单抗的回收率达 80％以上。结论：本方法是一种简单、价廉且有效的纯化小鼠腹水和血清 IgG抗体的方法。 展开更多

关键词 IGG抗体 辛酸 硫酸胺 纯化 腹水 血清

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应用Protein G纯化细胞培养上清中的大鼠单抗 被引量：17

5

作者 白丽 Dent,L 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期207-209,共3页

用ｍｉｎｉＰｅｒｍ系统旋转连续培养大鼠杂交瘤细胞株，获得大量含抗鼠ＩＬ－４（ＩｇＧ１）和ＩＬ－５（ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ）抗体的培养上清；经ＰＭ１０膜超滤、５０％饱和硫酸铵沉淀及链球菌Ｇ蛋白－琼脂糖亲和层析纯化ＩｇＧ单... 用ｍｉｎｉＰｅｒｍ系统旋转连续培养大鼠杂交瘤细胞株，获得大量含抗鼠ＩＬ－４（ＩｇＧ１）和ＩＬ－５（ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ）抗体的培养上清；经ＰＭ１０膜超滤、５０％饱和硫酸铵沉淀及链球菌Ｇ蛋白－琼脂糖亲和层析纯化ＩｇＧ单抗。结果每升杂交瘤细胞培养上清得到大鼠ＩｇＧ２２～３６ｍｇ；１次可纯化抗体达２０ｍｇ；经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及ＥＬＩＳＡ鉴定，所得到的抗体纯度高、活性保持良好。 展开更多

关键词 杂交瘤 大鼠 单克隆抗体 细胞培养

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生物素化抗细胞因子单克隆抗体的制备 被引量：5

6

作者 白丽 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期222-224,共3页

目的探讨生物素化单克隆抗体的制备方法。方法应用经超滤、硫酸铵沉淀、Protein G亲和层析纯化的来源于杂交瘤细胞培养上清中的大鼠抗小鼠 IL - 5、IL - 4和 IFN -γ单克隆抗体 ,以每 mg抗体加入生物素制剂 80μg室温反应6 0 min,其反... 目的探讨生物素化单克隆抗体的制备方法。方法应用经超滤、硫酸铵沉淀、Protein G亲和层析纯化的来源于杂交瘤细胞培养上清中的大鼠抗小鼠 IL - 5、IL - 4和 IFN -γ单克隆抗体 ,以每 mg抗体加入生物素制剂 80μg室温反应6 0 min,其反应液经 Sephadex G- 2 5层析纯化 ,然后用生物素 -亲和素 EL ISA法测定所制备的生物素化抗体活性。结果该法制备的生物素化抗体活性高 ,用于检测感染巴西钩虫的 IL - 5转基因小鼠和非转基因小鼠的血清标本敏感性好。结论该生物素化抗体的制备方法具有制备简单、稳定性好等优点。 展开更多

关键词 生物素 生物素化 单克隆抗体 ELISA 制备

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一种制备兔抗人IgG抗体的简易方法 被引量：5

7

作者 王晶 白丽 +2 位作者 郭利军 王涛 吴利先 《大理学院学报（医学版）》 1999年第1期60-60+63,63,共2页

目前，制备兔抗人ＩｇＧ的方法很多，但没有一个统一的具体方案，难以制备出理想的高效价抗体。我们根据抗体产生的基本原理，参照有关文献，探索出一种能得到高效价抗体的简易的方法，介绍如下：材料和方法１抗原制备参照文献［１、２... 目前，制备兔抗人ＩｇＧ的方法很多，但没有一个统一的具体方案，难以制备出理想的高效价抗体。我们根据抗体产生的基本原理，参照有关文献，探索出一种能得到高效价抗体的简易的方法，介绍如下：材料和方法１抗原制备参照文献［１、２］进行。选取多份健康人混合血清，新... 展开更多

关键词 人IGG 兔抗人IgG抗体 家兔

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测定小鼠细胞因子的双抗体夹心ELISA法的建立及应用研究 被引量：1

8

作者 白丽 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期75-77,共3页

目的　建立敏感的测定小鼠IL - 5、IL - 4和IFN -γ水平的生物素 -链霉亲和素双抗体夹心ELISA法 ,并探讨该法在IL - 5转基因小鼠感染模型中的应用价值。方法　含大鼠抗小鼠IL - 4、IL - 5和IFN -γ单克隆抗体的杂交瘤细胞培养上清 ,经PM... 目的　建立敏感的测定小鼠IL - 5、IL - 4和IFN -γ水平的生物素 -链霉亲和素双抗体夹心ELISA法 ,并探讨该法在IL - 5转基因小鼠感染模型中的应用价值。方法　含大鼠抗小鼠IL - 4、IL - 5和IFN -γ单克隆抗体的杂交瘤细胞培养上清 ,经PM 10膜超滤、5 0 %饱和硫酸铵沉淀及ProteinG -Sepharose亲和层析纯化。应用活化生物素制剂对纯化的TR FK4、BVD6和AN18单克隆体抗体进行生物素化。用纯化的 2 μg/mlTRFK5、8μg/ml 11B11和 4 μg/mlR4 - 6A2分别作为测定小鼠IL - 5、IL - 4和IFN -γ的包被抗体 ,然后逐步加入样品、生物素化TRFK4 (1μg/ml)、BVD6 (2 μg/ml)和AN18(1μg/ml)、SA -HRPO和OPD ,硫酸终止反应后读取A490 值。结果　所建立的生物素 -链霉亲和素双抗体夹心ELISA法特异性和敏感性高 ,用于检测感染巴西日圆线虫感染的IL - 5转基因小鼠和非转基因小鼠的血清标本取得了较好的效果。 展开更多

关键词 细胞因子 生物素-链霉素亲和素 ELISA 巴西日圆线虫 免疫学方法

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细胞因子在支气管哮喘炎症中的作用

9

作者 白丽 钱金栿 《大理学院学报（医学版）》 1999年第4期61-63,共3页

目的： 探索细胞因子在支气管哮喘炎症中的作用。方法： 应用Ｍｅｄｌｉｎｅ 系统检索资料，并进行综合评述。结果：ＩＬ－ ５、ＩＬ－ ４、ＩＬ－ ８ 是增强支气管哮喘炎症的重要细胞因子；而ＩＬ－１２、ＩＦＮ－ ｒ、ＩＬ－ １０ 则... 目的： 探索细胞因子在支气管哮喘炎症中的作用。方法： 应用Ｍｅｄｌｉｎｅ 系统检索资料，并进行综合评述。结果：ＩＬ－ ５、ＩＬ－ ４、ＩＬ－ ８ 是增强支气管哮喘炎症的重要细胞因子；而ＩＬ－１２、ＩＦＮ－ ｒ、ＩＬ－ １０ 则起抑制作用。结论：细胞因子调节在支气管哮喘中起着重要作用，进一步的研究结果将为该病的诊断和治疗提供依据。 展开更多

关键词 支气管哮喘 细胞因子 炎症

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套式RT-PCR在丙型肝炎诊断中的应用

10

作者 李建蓉 王晶 《大理医学院学报》 2001年第2期1-2,共2页

目的：探讨逆转录聚合酶链反应 (RT－ PCR)在丙型肝炎诊断中的应用。方法：应用套式 RT－ PCR检测肝炎病人血清中 HCVRNA，并同时用固相放射免疫法 (RIA)检测病人血清中抗 HCVRNA抗体。结果： 193份肝炎病人血清中 11. 9％ (23/193)可检... 目的：探讨逆转录聚合酶链反应 (RT－ PCR)在丙型肝炎诊断中的应用。方法：应用套式 RT－ PCR检测肝炎病人血清中 HCVRNA，并同时用固相放射免疫法 (RIA)检测病人血清中抗 HCVRNA抗体。结果： 193份肝炎病人血清中 11. 9％ (23/193)可检出 HCVRNA， 10. 9％ (21/193)可检出抗 HCVRNA抗体，两种检测结果相符率达 98. 4％，结论：套式 RT－ PCR对诊断丙型肝炎快速、特异性高，同时该检测法可避免放射性损伤和污染，在临床上对丙型肝炎的诊断有很大的应用价值。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 逆转录聚合酶链反应 放射免疫法

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解脲脲原体感染及其在不孕症中的致病性研究进展

11

作者 申元英 《大理学院学报（医学版）》 2001年第S1期62-65,共4页

目的：概述解脲脲原体感染在不孕症发生中的作用。方法：作者查阅了近年来的有关文献12篇，结果：解脲脲原体对生殖系统的炎性作用及其所致的男性生殖系统局部免疫功能下降，或女性抗精子抗体的产生是不孕症发生的可能机制。结论：该结... 目的：概述解脲脲原体感染在不孕症发生中的作用。方法：作者查阅了近年来的有关文献12篇，结果：解脲脲原体对生殖系统的炎性作用及其所致的男性生殖系统局部免疫功能下降，或女性抗精子抗体的产生是不孕症发生的可能机制。结论：该结果有可能为解脲脲原体所致的不孕症预防和治疗提供理论依据。 展开更多

关键词 解脲脲原体 不孕 感染

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HCV重组体转染细胞系的研究

12

作者 李建蓉 《大理医学院学报》 2000年第4期1-2,87,共2页

目的：建立 HCV重组体转染 SMMC7721肝癌细胞模型。方法：采用 FUGENETM6转染法，然后用 RT-PCR法测定细胞内重组体 mRNA瞬时表达情况。结果： 67.5％的培养孔可筛选到转染细胞表达重组体 mRNA。结论：该转染法效率高，建立的细胞模型... 目的：建立 HCV重组体转染 SMMC7721肝癌细胞模型。方法：采用 FUGENETM6转染法，然后用 RT-PCR法测定细胞内重组体 mRNA瞬时表达情况。结果： 67.5％的培养孔可筛选到转染细胞表达重组体 mRNA。结论：该转染法效率高，建立的细胞模型可用于筛选抗病毒转录的药物。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 转梁 聚合酶链反应 重组体

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Nrf2/HO-1通路在氧化应激和炎性反应中的作用 被引量：5

13

作者 于馨雅 申元英 郭乐 《医学研究杂志》 2023年第7期19-22,共4页

氧化应激是指体内氧化与抗氧化作用失衡,倾向于氧化,导致中性粒细胞炎性浸润、蛋白酶分泌增加、产生高活性分子,如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)以及大量氧化中间产物,如白... 氧化应激是指体内氧化与抗氧化作用失衡,倾向于氧化,导致中性粒细胞炎性浸润、蛋白酶分泌增加、产生高活性分子,如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)以及大量氧化中间产物,如白三烯、血栓素A 2等促炎介质,从而引起细胞凋亡和炎性反应。近年来研究表明,核转录因子红系2相关因子2/血红素加氧酶-1(nuclear factor erythroid-2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)通路可以通过抗炎、抗氧化等作用抵抗氧化应激损伤。因此,有效调控Nrf2/HO-1通路可成为治疗氧化应激性疾病和炎性疾病的重要靶点。 展开更多

关键词 核转录因子红系2相关因子2/血红素加氧酶-1 氧化应激 炎性反应

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Toll样受体2(TLR2)与结核分枝杆菌感染的相关研究进展

14

作者 陈瑞枫 王瑄 +2 位作者 马枫茜 周鑫沛 吴利先 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期367-372,共6页

Toll样受体2(TLR2)是白细胞表面表达的一种模式识别受体,已发现多种配体可以激动或抑制TLR2的活化,进而调控免疫细胞的炎症和凋亡状态。结核分枝杆菌(MTB)通常寄生在巨噬细胞中,但MTB感染机体后,包括巨噬细胞在内的多种免疫细胞表面的T... Toll样受体2(TLR2)是白细胞表面表达的一种模式识别受体,已发现多种配体可以激动或抑制TLR2的活化,进而调控免疫细胞的炎症和凋亡状态。结核分枝杆菌(MTB)通常寄生在巨噬细胞中,但MTB感染机体后,包括巨噬细胞在内的多种免疫细胞表面的TLR2都可与其相互作用,释放细胞因子,影响MTB在体内的状态和增殖。在分子层面,TLR2的多态性有待更多探索,目前研究的大部分TLR2的多态性被认为与MTB的易感性无关。文中总结了TLR2与配体、感染后免疫调节活动、多态性与MTB易感性等方面的研究进展。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌(MTB) Toll样受体2(TLR2) 细胞因子 多态性 综述

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Xpert MTB/RIF在结核病诊断中的研究进展 被引量：6

15

作者 刘宇 吴利先 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期800-802,共3页

长久以来,结核病(TB)的诊断是依靠传统的结核分枝杆菌(MTB)抗酸染色涂片以及体外培养技术。但是,因为其检出率低,MTB生长缓慢等原因,传统方法并不能完全满足临床诊断的需要。利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(Xpert MTB/RIF)是一种... 长久以来,结核病(TB)的诊断是依靠传统的结核分枝杆菌(MTB)抗酸染色涂片以及体外培养技术。但是,因为其检出率低,MTB生长缓慢等原因,传统方法并不能完全满足临床诊断的需要。利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(Xpert MTB/RIF)是一种新的诊断技术,已经获得了世界卫生组织(WHO)的推荐。因其具有较高的灵敏度和特异性,并且操作简便的优势值得在世界范围内推广。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 Xpert MTB/RIF 结核病 综述

原文传递

脓毒血症的研究机制及免疫炎症因子吸附装置 被引量：5

16

作者 蹇艾利 郭乐 +1 位作者 申元英 姜石松 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第20期2550-2554,共5页

脓毒血症是机体感染后引起的一种全身性免疫应答,进展到后期可发展为脓毒血症休克、多器官衰竭甚至死亡。研究表明在脓毒血症的早期阶段,天然免疫系统被激活以便清除入侵细菌,如果控制不当,脓毒症引起细胞因子风暴特别是TNF、IL-1、IL-... 脓毒血症是机体感染后引起的一种全身性免疫应答,进展到后期可发展为脓毒血症休克、多器官衰竭甚至死亡。研究表明在脓毒血症的早期阶段,天然免疫系统被激活以便清除入侵细菌,如果控制不当,脓毒症引起细胞因子风暴特别是TNF、IL-1、IL-6等促炎因子大量释放从而加重炎症反应;到了晚期阶段由于巨噬细胞失活,抗炎因子增加则表现为免疫抑制状态。目前临床对于脓毒血症的治疗除了基础的对症用药外,还用血液净化装置以辅助缓解症状。本文通过文献检索,分析比较国内外常用免疫吸附装置的作用原理及优缺点,以期阐明免疫吸附装置在脓毒血症治疗中的前景及改进设想。 展开更多

关键词 免疫吸附 脓毒血症 炎症反应 治疗现状

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外泌体来源microRNA在微生物感染中的作用研究进展

17

作者 杜文雅 马枫茜 +3 位作者 代禹美 陈瑞枫 王国富 吴利先 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第6期729-732,共4页

外泌体包含母细胞来源的蛋白质、脂质和核酸等多种成分,其中核酸中的miRNA起到越来越重要的作用,miRNA通过靶向mRNA 3′端非翻译区结合导致mRNA降解或翻译抑制。许多疾病的发生都伴随着miRNA表达失调,这对宿主基因调控和某些分子机制产... 外泌体包含母细胞来源的蛋白质、脂质和核酸等多种成分,其中核酸中的miRNA起到越来越重要的作用,miRNA通过靶向mRNA 3′端非翻译区结合导致mRNA降解或翻译抑制。许多疾病的发生都伴随着miRNA表达失调,这对宿主基因调控和某些分子机制产生影响。越来越多研究证明miRNA可以作为疾病的潜在生物标志物、治疗靶点,参与炎症反应的过程等。本文就外泌体中的miRNA在病毒,细菌等微生物导致的感染性疾病,如流感病毒、肝炎病毒、HIV、结核分枝杆菌、梅毒螺旋体和支原体中的作用进行综述。 展开更多

关键词 外泌体 MIRNA 微生物 感染性疾病 综述

原文传递

结核分枝杆菌PE22/PPE36融合蛋白对耻垢分枝杆菌表型及巨噬细胞功能影响的研究

18

作者 杨雨婷 李玉洁 +1 位作者 余海燕 杨国平 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期523-532,共10页

目的将结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)PE/PPE家族重组融合蛋白PE22/PPE36异源表达于耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)后,探讨其对Ms表型及巨噬细胞功能的影响,分析其在Mtb感染过程中发挥的作用。方法原核表达... 目的将结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)PE/PPE家族重组融合蛋白PE22/PPE36异源表达于耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)后,探讨其对Ms表型及巨噬细胞功能的影响,分析其在Mtb感染过程中发挥的作用。方法原核表达获取融合蛋白PE22/PPE36,纯化后免疫6~8周龄小鼠制备多克隆抗体;电击法构建重组菌Ms_PE22/PPE36及Ms_vec,并用所制备的多克隆抗体验证重组融合蛋白在Ms中的表达。将重组菌接种于2×YT培养基中观察其菌落形态及生长曲线;点板法及菌落计数法检测重组菌在H_(2)O_(2)、SDS、溶菌酶、NaNO_(2)、低pH、饥饿等压力条件下的存活情况,以分析PE22/PPE36融合蛋白对Ms表型的影响;重组菌侵染巨噬细胞ANA-1及RAW 264.7后,流式细胞术检测ANA-1细胞凋亡率,ELISA法检测ANA-1细胞TNF-α及IL-6分泌量,Griess法检测ANA-1及RAW 264.7细胞NO分泌量并用通道抑制剂检测所涉及的通路,菌落计数法检测重组菌在ANA-1及RAW 264.7细胞内的存活情况。结果与Ms_vec组相比,Ms_PE22/PPE36的菌落形态、生物膜形成及在溶菌酶、NaNO_(2)、低pH等压力条件下的存活率差异无统计学意义(溶菌酶:t 3 h=0.082,t 6 h=0.174,t 9 h=0.355;NaNO_(2):t 3 h=0.950,t 6 h=1.274;低pH:t 3 h=1.869,t 6 h=1.119,t 9 h=0.091;均P>0.05);在H_(2)O_(2)、SDS压力条件下存活率明显降低(H_(2)O_(2):t 6 h=4.35,t 8 h=4.80;SDS:t 4 h=10.43,t 6 h=2.793;均P<0.05);而稳定期生长速率及在饥饿压力条件下的存活率明显增高(生长速率:t 30 h=5.39,t 36 h=2.55,t 42 h=3.48;饥饿:t=3.323;均P<0.05);与Ms_vec感染组相比,Ms_PE22/PPE36组ANA-1细胞的早期凋亡率及TNF-α分泌量明显增加(早期凋亡:F=4.765;TNF-α:t 24 h=26.642,t_(48)h=7.634;均P<0.05),IL-6分泌量明显减少(t 24 h=5.888,t_(48)h=3.001;均P<0.05),ANA-1及RAW264.7细胞NO分泌量明显增加(ANA-1:F_(12)h=163.267,F_(24)h=111.530,F 48 h=500.328;RAW 264.7:F_(12)h=133.202,F_(24)h=718.436,F 48 h=1434.9;均P<0.05),且可被通道抑制 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 耻垢分枝杆菌 PE22/PPE36融合蛋白 巨噬细胞

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结核分枝杆菌Rv3529c蛋白的生信分析及原核表达

19

作者 陈瑞枫 王瑄 +3 位作者 马枫茜 李祥芳 丁寿鹏 吴利先 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期621-628,共8页

目的 通过生物信息学软件预测结核分枝杆菌Rv3529c基因编码蛋白的结构和功能,并对其进行原核表达。方法 利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、AlphaFold系统、SWISS-MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、ProtScale、DeepTMHMM服务和... 目的 通过生物信息学软件预测结核分枝杆菌Rv3529c基因编码蛋白的结构和功能,并对其进行原核表达。方法 利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、AlphaFold系统、SWISS-MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、ProtScale、DeepTMHMM服务和SignalP-5.0服务、ProtCompB方法、IEDB数据库和STRING数据库等生物信息学预测软件对Rv3529c编码蛋白的二级和三级结构、理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区、亚细胞定位及免疫表位进行分析预测。利用分子克隆技术构建表达质粒载体pET-32a-Rv3529c并进行原核表达,运用UniprotKB数据库的Blast工具对氨基酸序列进行比对,采用MEGA 11软件构建进化树,进行系统进化分析,运用STRING数据库分析蛋白间相互作用。结果 Rv3529c基因全长1 155 bp,共编码384个氨基酸。Rv3529c基因编码蛋白分子量为43.35 kDa,等电点为6.04,二级结构以α-螺旋为主,该蛋白为稳定的亲水性蛋白,无跨膜区、无信号肽,预测该蛋白亚细胞定位在细胞质中或细胞膜上,存在多个抗原抗体表位,与多个蛋白质有相互作用。经克隆、表达、鉴定、纯化后获得浓度和纯度较高的Rv3529c蛋白。结论 成功克隆、表达、纯化结核分枝杆菌Rv3529c蛋白,并初步预测其结构及功能。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 Rv3529c蛋白 原核表达 生物信息学 表位

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miR-146a在黏膜免疫中的调控作用 被引量：3

20

作者 李艳丽 申元英 郭乐 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期297-304,共8页

黏膜免疫是机体整个免疫网络的重要组成部分,又是具有独特结构和功能的独特免疫体系,其在抵抗感染方面起着极其重要的作用,是机体抵抗感染的第一道免疫屏障。近年来,越来越多的研究显示,微小RNA(miRNAs)具有强大的免疫调控功能,其中miR-... 黏膜免疫是机体整个免疫网络的重要组成部分,又是具有独特结构和功能的独特免疫体系,其在抵抗感染方面起着极其重要的作用,是机体抵抗感染的第一道免疫屏障。近年来,越来越多的研究显示,微小RNA(miRNAs)具有强大的免疫调控功能,其中miR-146a作为协调免疫反应和炎症信号最重要的miRNAs之一,在包括免疫反应在内的多种生物过程和途径中发挥关键作用。本文综述了miR-146a与黏膜免疫的相关研究进展。 展开更多

关键词 MICRORNAS MIR-146A 黏膜免疫 炎症

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