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题名金黄金葡萄球菌EAP研究进展
被引量：2
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作者
卢杰
卢珍
李昶
苏莉芬
吕茂利
王维双
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机构
黑龙江省大庆医学高等专科学校基础医学部
北京解放军
大庆医学高等专科学校招生就业办公室
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出处
《医学研究杂志》
2009年第10期119-120,共2页
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文摘
金黄色葡萄球菌是一种引起人类和动物疾病的常见的革兰阳性菌，它具有很高的致病率和病死率。轻微的伤口感染可发展为恶性的脓毒症、骨髓炎、脓毒性关节炎或是心内膜炎，是医院感染中最常见的病原菌之一。甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（methicillin—resistant S．aureus，MRSA）菌株，可抵抗大多数临床上应用的抗生素。令人忧虑的是，MRSA菌株对治疗葡萄球菌感染最为有效的抗生素——万古霉素的敏感性日益降低，因此必须寻找到一种有效的治疗方法。
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关键词
金黄色葡萄球菌
EAP
MRSA菌株
甲氧西林耐药
AUREUS
葡萄球菌感染
治疗方法
革兰阳性菌
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分类号
R378.11
[医药卫生—病原生物学]
R735.205
[医药卫生—基础医学]
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题名肺炎链球菌重组PrtA蛋白克隆与表达的相关研究
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作者
卢杰
王忠伟
计红
马越
李昶
姜世君
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机构
大庆医学高等专科学校基础医学部
黑龙江八一农垦大学动物科技学院
大庆医学高等专科学校招生就业办公室
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出处
《国际检验医学杂志》
CAS
2012年第1期13-15,共3页
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文摘
目的构建携带PrtA基因的原核表达载体,诱导表达具有活性的重组PrtA融合蛋白。方法根据GenBank中肺炎链球菌表面蛋白细胞壁相关丝氨酸蛋白酶A(PrtA)蛋白基因序列,设计合成了一对特异性引物,扩增目的片段,建立了RT-PCR检测方法。应用RT-RCR方法扩增得到PrtA蛋白基因,并克隆到pMD18-T载体上,筛选、鉴定阳性重组子pMD18-T-PrtA,然后克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,经双酶切、PCR鉴定,获得重组表达质粒pET-30a-PrtA。将含有pET-30a-PrtA的重组菌,经终浓度为0.6mmol/L的IPTG诱导后,重组PrtA蛋白获得高效表达。通过Westernblot检测结果,检测表达的重组PrtA蛋白的反应原性。结果所获PrtA基因与GenBank的基因序列同源性为99%;重组质粒经IPTG诱导,不同浓度的IPTG均能诱导重组蛋白表达,且IPTG终浓度为0.6mmol/L时,目的蛋白的表达量最高,约占菌体总蛋白的18%。通过抗-His标签单克隆抗体在IPTG诱导6h的重组菌蛋白中检测到一条大小约为40×103的特异性清晰条带,与预期结果相符,表明表达的蛋白为肺炎链球菌重组PrtA蛋白。结论成功地克隆和表达了肺炎链球菌表面蛋白细胞壁PrtA,为进一步研究以PrtA蛋白作为免疫原预防和治疗由肺炎链球菌引起的疾病奠定基础。
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关键词
链球菌
肺炎
克隆
分子
基因表达
链球菌表面蛋白细胞壁相关丝氨酸蛋白酶
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Keywords
streptococcus pneumoniae
cloning
molecular
gene expression
pneumococcal surface proteins cell wall associated serine proteinase A
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分类号
R346
[医药卫生—基础医学]
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