酵母双杂交技术研究进展 被引量：7

1

作者 张迪 霍克克 +2 位作者 顾科隆 赵翔 李育阳 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第3期98-101,共4页

酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法 ,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取得了许多有价值的重要发现。作为一个完整的实验系统 ,它自建立以来经过了不断的改进与完善 ,不仅进一步提高了实验结果的可靠性与精... 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法 ,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取得了许多有价值的重要发现。作为一个完整的实验系统 ,它自建立以来经过了不断的改进与完善 ,不仅进一步提高了实验结果的可靠性与精确性 ,而且在此基础上又发展了反向双杂交 ,三杂交及核外双杂交等多项技术。 展开更多

关键词 蛋白质 分子间作用 酵母双杂交技术 基因功能

下载PDF 职称材料

鼻咽癌组织中BHRF1基因的研究 被引量：3

2

作者 黄海 潘星华 +6 位作者 周水淼 李兆基 温武 余龙 孔宪涛 孙喜元 傅强 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期85-86,共2页

目的：探讨鼻咽癌组织中ＥＢ病毒基因ＢＨＲＦ１的存在和表达与癌细胞分化及其患者预后间的关系。方法：利用斑点杂交技术检测鼻咽未分化癌、低分化及高分化鳞癌中ＢＨＲＦ１的存在和表达情况，并且观察患者对放疗的效果。结果：ＢＨＲ... 目的：探讨鼻咽癌组织中ＥＢ病毒基因ＢＨＲＦ１的存在和表达与癌细胞分化及其患者预后间的关系。方法：利用斑点杂交技术检测鼻咽未分化癌、低分化及高分化鳞癌中ＢＨＲＦ１的存在和表达情况，并且观察患者对放疗的效果。结果：ＢＨＲＦ１的存在与表达与鼻咽癌的分化无关，但其表达可导致癌细胞对辐射敏感性的下降（Ｐ＜０．０１）。结论：ＢＨＲＦ１在鼻咽癌细胞中的表达可增强其抵抗辐射诱发细胞凋亡的能力，这在鼻咽癌诊断、治疗和预后判断上具有重要意义。 展开更多

关键词 EB病毒基因 鼻咽肿瘤 细胞分化

下载PDF 职称材料

BHRF1反义寡核苷酸对BHRF1-CNE2细胞生存能力的影响 被引量：2

3

作者 黄海 周江红 +2 位作者 潘星华 余龙 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期720-722,共3页

目的：探讨ＢＨＲＦ１ 反义寡核苷酸对表达ＢＨＲＦ１ 的鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 生存能力的影响。方法：检测反义阻断ＢＨＲＦ１ 表达后ＢＨＲＦ１－ＣＮＥ２细胞在喜树碱作用下增殖能力和凋亡指数的变化。结果：在喜树碱作用下，应用Ｂ... 目的：探讨ＢＨＲＦ１ 反义寡核苷酸对表达ＢＨＲＦ１ 的鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 生存能力的影响。方法：检测反义阻断ＢＨＲＦ１ 表达后ＢＨＲＦ１－ＣＮＥ２细胞在喜树碱作用下增殖能力和凋亡指数的变化。结果：在喜树碱作用下，应用ＢＨＲＦ１ 反义寡核苷酸组的癌细胞较对照组的增殖率下降，凋亡率增高。结论：反义阻断ＢＨＲＦ１的表达可降低ＣＮＥ２细胞的生存能力。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 BHRF1基因 反义寡核苷酸 CNE2细胞

下载PDF 职称材料

EB病毒BHRF 1基因表达对鼻咽癌细胞周期分布影响的研究 被引量：2

4

作者 黄海 潘星华 +3 位作者 余龙 孔宪涛 周水淼 李兆基 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期95-97,共3页

ＥＢ病毒感染与鼻咽癌的发生和发展明显相关。近来研究发现，ＥＢ病毒编码基因的表达与病毒介导的细胞转化与恶变有关。ＢＨＲＦ１为ＥＢ病毒编码的一个早期基因，其与原癌基因Ｂｃｌ－２具有部分相同的序列和共同的超微结构定位，提示... ＥＢ病毒感染与鼻咽癌的发生和发展明显相关。近来研究发现，ＥＢ病毒编码基因的表达与病毒介导的细胞转化与恶变有关。ＢＨＲＦ１为ＥＢ病毒编码的一个早期基因，其与原癌基因Ｂｃｌ－２具有部分相同的序列和共同的超微结构定位，提示其具有相似的功能和机理，即有抑制细... 展开更多

关键词 EB病毒 BHRF1基因 鼻咽肿瘤 细胞周期

下载PDF 职称材料

BHRF1基因表达对CNE2细胞生长的影响 被引量：1

5

作者 黄海 潘星华 +5 位作者 余龙 孔宪涛 周水淼 李兆基 傅强 孙喜元 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期131-133,共3页

目的：观察ＥＢ病毒基因ＢＨＲＦ１的表达对鼻咽癌细胞生存能力的影响。方法：通过构建携有ＢＨＲＦ１的高表达载体，并转染低分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞。检测转染后癌细胞周期各时相分布的改变和在缺乏营养条件下的生长情况。结果... 目的：观察ＥＢ病毒基因ＢＨＲＦ１的表达对鼻咽癌细胞生存能力的影响。方法：通过构建携有ＢＨＲＦ１的高表达载体，并转染低分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞。检测转染后癌细胞周期各时相分布的改变和在缺乏营养条件下的生长情况。结果：ＢＨＲＦ１的表达能使Ｇ１期细胞百分比升高，Ｓ期细胞百分比下降，癌细胞在缺血清条件下生存时间延长。结论：ＢＨＲＦ１的表达能促使鼻咽癌细胞周期的重新分布。 展开更多

关键词 EB病毒 鼻咽肿瘤 细胞凋亡 BHRF1基因

下载PDF 职称材料

EB病毒BHRF1基因抗辐射作用的研究 被引量：1

6

作者 黄海 潘星华 +6 位作者 孔宪涛 余龙 周水淼 李兆基 温武 傅强 孙喜元 《临床耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 1998年第3期131-133,共3页

为了解EB病毒编码基因BHRF1的表达对鼻咽癌细胞抵抗放射线损伤能力的改变，构建携有BHRF1的高表达载体，并转染鼻咽癌细胞株CNE2细胞，观察转染前后的癌细胞在放射线照射后于裸鼠体内成瘤能力改变的情况。结果发现，在放射线照射前，BH... 为了解EB病毒编码基因BHRF1的表达对鼻咽癌细胞抵抗放射线损伤能力的改变，构建携有BHRF1的高表达载体，并转染鼻咽癌细胞株CNE2细胞，观察转染前后的癌细胞在放射线照射后于裸鼠体内成瘤能力改变的情况。结果发现，在放射线照射前，BHRF1表达细胞在裸鼠体内形成肿瘤时间较晚，肿瘤重量较轻（P＜0．01）；而经放射线照射后，BHRF1表达细胞在裸鼠体内的成瘤能力强于对照组（P＜0．01），经原位末端标记检查发现其凋亡指数小于对照组（P＜0．01）。提示BHRF1的表达能通过阻止细胞的凋亡，增强鼻咽癌细胞抵抗放射线对其DNA的损伤作用。 展开更多

关键词 EB病毒 BHRF1基因 鼻咽肿瘤 放射疗法 抗辐射

原文传递

Xp11.2区域YAC OAT1中表达顺序筛选

7

作者 马洪明 曹立民 +1 位作者 魏勇 柴建华 《青岛海洋大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2001年第3期345-350,共6页

筛选 X染色体 Xp11.2区域的酵母人工染色体 ( YAC)克隆 OAT1所包含的表达序列 ,为该区域疾病相关基因的克隆探索方法。以 YAC克隆 OAT1为探针 ,与胎脑 c DNA文库的噬菌体原位裂解膜进行两轮杂交。所得的阳性克隆经过杂交鉴定剔除假阳性... 筛选 X染色体 Xp11.2区域的酵母人工染色体 ( YAC)克隆 OAT1所包含的表达序列 ,为该区域疾病相关基因的克隆探索方法。以 YAC克隆 OAT1为探针 ,与胎脑 c DNA文库的噬菌体原位裂解膜进行两轮杂交。所得的阳性克隆经过杂交鉴定剔除假阳性克隆和重复序列 ,并进行测序分析。获得了一个 YAC OAT1编码的表达顺序克隆。该克隆与鸟氨酸转氨酶 ( Ornithine Amino-transferase,OAT) 展开更多

关键词 酵母人工染色体 cDNA水库 表达序列 基因克隆 基因识别 乌氨酸转氨酶

下载PDF 职称材料

EB病毒BHRF1基因表达对鼻咽癌细胞增殖周期影响的研究

8

作者 黄海 周江红 +7 位作者 潘星华 余龙 傅强 孙喜元 孔宪涛 周水淼 李兆基 温武 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 1997年第4期193-196,共4页

目的：了解ＥＢ病毒编码ＢＨＲＦ１基因表达对鼻咽癌细胞增殖周期的影响。方法：本研究通过构建ＢＨＲＦ１高表达载体并将其转入鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞中，检测转染后稳定表达ＢＨＲＦ１癌细胞的增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａ... 目的：了解ＥＢ病毒编码ＢＨＲＦ１基因表达对鼻咽癌细胞增殖周期的影响。方法：本研究通过构建ＢＨＲＦ１高表达载体并将其转入鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞中，检测转染后稳定表达ＢＨＲＦ１癌细胞的增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）表达和喜树碱作用前后细胞周期分布的改变。结果：ＢＨＲＦ１的表达可促使癌细胞的ＰＣＮＡ表达下降，Ｇ１期细胞增多，Ｓ期细胞减少；而在喜树碱作用后，ＢＨＲＦ１－ＣＮＥ２细胞的凋亡率明显小于对照组，其Ｇ１期细胞数下降，Ｓ期细胞数升高。结论：ＢＨＲＦ１基因的表达可通过调节细胞周期分布、抑制细胞凋亡的发生以增强细胞的生存能力。 展开更多

关键词 EB病毒 BHRF1基因 基因表达 鼻咽癌 细胞增殖

全文增补中

Epstein-Barr病毒bhrfl表达对鼻咽癌细胞株CNE2拓扑异构酶Ⅰ表达的影响

9

作者 黄海 潘星华 +4 位作者 周江红 温武 周水淼 余龙 孔宪涛 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期128-131,共4页

目的　了解Epstein Barr(EB)病毒基因bhrfl表达对鼻咽癌细胞拓扑异构酶Ⅰ表达的影响。方法　通过构建bhrfl表达载体并转染鼻咽癌细胞株CNE2细胞 ,以检测癌细胞在转染后其拓扑异构酶Ⅰ表达及其抗喜树碱诱发凋亡能力的改变。结果　bhrfl... 目的　了解Epstein Barr(EB)病毒基因bhrfl表达对鼻咽癌细胞拓扑异构酶Ⅰ表达的影响。方法　通过构建bhrfl表达载体并转染鼻咽癌细胞株CNE2细胞 ,以检测癌细胞在转染后其拓扑异构酶Ⅰ表达及其抗喜树碱诱发凋亡能力的改变。结果　bhrfl表达可增强癌细胞拓扑异构酶Ⅰ的表达 ,使癌细胞对喜树碱的敏感性下降 ,生存时间延长 ,凋亡率减少 (P <0 0 1)。结论　bhrfl的表达可通过增强CNE2细胞拓扑异构酶Ⅰ的表达而增强其抗喜树碱诱发的细胞凋亡作用。 展开更多

关键词 疱疹病毒4型 病毒基因 拓扑异构酶Ⅰ 鼻咽癌

原文传递

脆壁克鲁维酵母蛋白二硫化物异构酶KfPDI的结构分析

10

作者 赵翔 包卫国 +2 位作者 霍克克 李育阳 FukuharaH 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第8期39-43,共5页

利用ＤＮＡ限制性内切酶图谱分析将一个带有脆壁克鲁维酵母 （Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｆｒａｇｉｌｉｓ） 蛋白二硫化物异构酶基因（ＫｆＰＤＩ） 的１０ ｋｂ 初始克隆缩短为４ ｋｂ 的亚克隆，并测定了该基因的ＤＮＡ全序列。经... 利用ＤＮＡ限制性内切酶图谱分析将一个带有脆壁克鲁维酵母 （Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｆｒａｇｉｌｉｓ） 蛋白二硫化物异构酶基因（ＫｆＰＤＩ） 的１０ ｋｂ 初始克隆缩短为４ ｋｂ 的亚克隆，并测定了该基因的ＤＮＡ全序列。经分析发现： （１）该基因编码产物由５２０个氨基酸残基组成。（２） 它与乳酸克鲁维酵母（Ｋ． ｌａｃｔｉｓ） 蛋白二硫化物异构酶在氨基酸序列上的同源性为７８。（３） 它与其他物种的ＰＤＩ基因在核苷酸和蛋白质水平上的同源性较弱， 展开更多

关键词 脆壁克鲁维酵母 PDI KfPDI 序列分析

下载PDF 职称材料

BHRF1表达对鼻咽癌细胞抗凋亡能力的影响 被引量：6

11

作者 黄海 潘星华 +6 位作者 余龙 孔宪涛 赵寿元 周水淼 李兆基 毛宁辉 郑其平 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期245-247,共3页

目的了解ＥＢ病毒（ＥｐｓｔｅｉｎＢａｒｖｉｒｕｓ）基因ＢＨＲＦ１（ＢａｍＨＩＨｒｉｇｈｔｗａｒｄｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅＩ）表达对鼻咽癌细胞抗凋亡能力的影响。方法构建表达ＢＨＲＦ１重组载体并转入鼻咽癌细胞株ＣＮＥ... 目的了解ＥＢ病毒（ＥｐｓｔｅｉｎＢａｒｖｉｒｕｓ）基因ＢＨＲＦ１（ＢａｍＨＩＨｒｉｇｈｔｗａｒｄｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅＩ）表达对鼻咽癌细胞抗凋亡能力的影响。方法构建表达ＢＨＲＦ１重组载体并转入鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞中，以检测癌细胞在６０Ｃｏ照射后生物学行为的改变。结果ＢＨＲＦ１表达可抑制增殖细胞核抗原的表达，促使癌细胞的细胞周期重新分布，癌细胞对辐射的敏感性下降，生存能力增强。结论ＢＨＲＦ１的表达可增强ＣＮＥ２细胞抵抗放射线诱发细胞凋亡的能力。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 BHRF1基因 基因表达 细胞凋亡 E-B病毒

原文传递