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心肌肌钙蛋白I-C复合物酶联免疫检测方法的建立
被引量：
4
1
作者
李瑞
朱乃硕
《复旦学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期517-523,共7页
为了制备抗人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体、建立检测人cTnI链酶亲和素-生物素双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,用基因工程表达的人cTnI免疫雌性BALB/c小鼠,以杂交瘤技术制备得到三株特异性抗人cTnI的单克隆抗体记为6G3,6A6,3...
为了制备抗人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体、建立检测人cTnI链酶亲和素-生物素双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,用基因工程表达的人cTnI免疫雌性BALB/c小鼠,以杂交瘤技术制备得到三株特异性抗人cTnI的单克隆抗体记为6G3,6A6,3G9.三株杂交瘤细胞中6G3和6A6为IgG1,3G9为IgG2b,腹水效价分别为4 × 10-5,4×10-5和10-5.亲和常数为5.0×109,6.4×109和3.8×109 mol-1.Western blotting结果表明6G3和6A6能够识别cTnI-C复合物.把6G3抗体生物素化并制备抗cTnI,cTnC和cTnI-C的大鼠多克隆抗体.以多抗作为固相捕捉抗体,生物素化6G3抗体作为检测抗体,建立检测cTnI的双抗体夹心ELISA方法并初步应用于临床病人标本检测.以cTnI-C复合物多抗捕捉检测方法具有良好的灵敏度、特异性和准确性,灵敏度为0.9 ng/mL,较包被其他抗体捕捉方法提高1～2倍.批内变异系数为5.03%,回收率为94.56%.测定17例AMI病人和18例血清样本临床诊断结果符合率为100%.
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关键词
心肌肌钙蛋白I
心肌肌钙蛋白C
单克隆抗体
酶联免疫吸附测定
生物素
原文传递
人Rab26基因的克隆和表达
被引量：
1
2
作者
许炎
李瑞
朱乃硕
《复旦学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期566-570,共5页
以完整EST为参考序列设计引物,以人的胎脑cDNA为模板,用PCR方法筛选获得Rab26基因全长序列,并亚克隆到载体pGEM-T,真核表达载体pEGFP-N1和原核表达载体pET-32a(+)中.RT-PCR显示该基因在不同组织的肿瘤细胞株中表达量有明显的差异.把Rab2...
以完整EST为参考序列设计引物,以人的胎脑cDNA为模板,用PCR方法筛选获得Rab26基因全长序列,并亚克隆到载体pGEM-T,真核表达载体pEGFP-N1和原核表达载体pET-32a(+)中.RT-PCR显示该基因在不同组织的肿瘤细胞株中表达量有明显的差异.把Rab26基因转染入HeLa细胞中,通过与绿色荧光蛋白(GFP)基因融合表达,显示Rab26定位于胞内膜性细胞器上.在大肠杆菌表达系统获得Rab26基因的高表达.这些结果为进一步研究Rab26基因在细胞内吞和运输功能等方面打下了基础.
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关键词
Rab26
亚克隆
表达
GFP
内吞
原文传递
题名
心肌肌钙蛋白I-C复合物酶联免疫检测方法的建立
被引量：
4
1
作者
李瑞
朱乃硕
机构
复旦大学
生命科学
学院
微生物学
及
微生物
工程系
复旦
金鹰
生物医药
研发
中心
出处
《复旦学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期517-523,共7页
文摘
为了制备抗人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体、建立检测人cTnI链酶亲和素-生物素双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,用基因工程表达的人cTnI免疫雌性BALB/c小鼠,以杂交瘤技术制备得到三株特异性抗人cTnI的单克隆抗体记为6G3,6A6,3G9.三株杂交瘤细胞中6G3和6A6为IgG1,3G9为IgG2b,腹水效价分别为4 × 10-5,4×10-5和10-5.亲和常数为5.0×109,6.4×109和3.8×109 mol-1.Western blotting结果表明6G3和6A6能够识别cTnI-C复合物.把6G3抗体生物素化并制备抗cTnI,cTnC和cTnI-C的大鼠多克隆抗体.以多抗作为固相捕捉抗体,生物素化6G3抗体作为检测抗体,建立检测cTnI的双抗体夹心ELISA方法并初步应用于临床病人标本检测.以cTnI-C复合物多抗捕捉检测方法具有良好的灵敏度、特异性和准确性,灵敏度为0.9 ng/mL,较包被其他抗体捕捉方法提高1～2倍.批内变异系数为5.03%,回收率为94.56%.测定17例AMI病人和18例血清样本临床诊断结果符合率为100%.
关键词
心肌肌钙蛋白I
心肌肌钙蛋白C
单克隆抗体
酶联免疫吸附测定
生物素
Keywords
cardiac troponin I
cardiac troponin C
monoclonal antibody
ELISA
biotin
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
人Rab26基因的克隆和表达
被引量：
1
2
作者
许炎
李瑞
朱乃硕
机构
复旦大学
生命科学
学院
微生物学
及
微生物
工程系
复旦
金鹰
生物医药
研发
中心
出处
《复旦学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期566-570,共5页
文摘
以完整EST为参考序列设计引物,以人的胎脑cDNA为模板,用PCR方法筛选获得Rab26基因全长序列,并亚克隆到载体pGEM-T,真核表达载体pEGFP-N1和原核表达载体pET-32a(+)中.RT-PCR显示该基因在不同组织的肿瘤细胞株中表达量有明显的差异.把Rab26基因转染入HeLa细胞中,通过与绿色荧光蛋白(GFP)基因融合表达,显示Rab26定位于胞内膜性细胞器上.在大肠杆菌表达系统获得Rab26基因的高表达.这些结果为进一步研究Rab26基因在细胞内吞和运输功能等方面打下了基础.
关键词
Rab26
亚克隆
表达
GFP
内吞
Keywords
Rab26
subclone
expression
GFP
endocytosis
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
心肌肌钙蛋白I-C复合物酶联免疫检测方法的建立
李瑞
朱乃硕
《复旦学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
4
原文传递
2
人Rab26基因的克隆和表达
许炎
李瑞
朱乃硕
《复旦学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
1
原文传递
已选择
0
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