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浙江地区散发新型布尼亚病毒感染患者的临床特点及其基因序列 被引量：25
1
作者 李世波 薛川 +7 位作者 丁贤君 刘瑞定 薛宏怡 仝振东 柴能明 王晔恺 林志益 程训佳 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期268-272,共5页
目的分析发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒（SFTSV）感染患者的临床特征、流行病学以及SFTSV基因序列。方法收集2011年5月至7月在温州医学院附属舟山医院感染性疾病科收治的5例重症发热伴血小板减少综合征（sFTS）患者，均经PCR检测SF... 目的分析发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒（SFTSV）感染患者的临床特征、流行病学以及SFTSV基因序列。方法收集2011年5月至7月在温州医学院附属舟山医院感染性疾病科收治的5例重症发热伴血小板减少综合征（sFTS）患者，均经PCR检测SFTsV核酸确诊。采用流式细胞仪（FCM）检测CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T淋巴细胞，分离的病毒株测序并与GenBank比对。结果SFTS患者典型临床表现为持续高热、全身肌肉酸痛、浅表淋巴结肿大、腹痛、腹泻，可伴消化道出血，在急性期WBC、PLT、CD3＋CD4＋T淋巴细胞呈进行性下降，最低分别为（0．97～2．00）×10^9／L，（12-42）×10^9／L和7．52％420．39％。2例患者血清中分离出病毒，其基因序列与GenBank中的SFTSV进行比对，依赖RNA的RNA聚合酶基因与BX-2010、L-WWG、LN3、JS4、SD4、HN6和AH12的同源性为96％，糖蛋白基因的同源性为94％，而N蛋白基因与JS4、SD4和LN4的同源性为95%；分离的2株病毒的上述三种基因序列的同源性为99％。结论SFTSV在浙江省有散发流行，以本土疫源性可能大，起病急，病情重，伴多脏器功能损害。 展开更多
关键词 布尼亚病毒科感染 发热 血小板减少 白细胞减少 流行病学研究 基因 病毒 序列分析
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细菌对喹诺酮类抗菌药的分子耐药机制 被引量：13
2
作者 王重振 钱利生 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第12期26-30,共5页
喹诺酮类是目前临床上应用较多的抗菌药。然而 ,喹诺酮类耐药菌时有出现。就细菌对喹诺酮类抗菌药主要耐药机制从分子水平作一综述。 ( 1 )一般认为 ,喹诺酮类抗菌药通过结合细菌Ⅱ类拓扑异构酶 ,干扰细菌复制 ,而发挥抑菌作用。Ⅱ类拓... 喹诺酮类是目前临床上应用较多的抗菌药。然而 ,喹诺酮类耐药菌时有出现。就细菌对喹诺酮类抗菌药主要耐药机制从分子水平作一综述。 ( 1 )一般认为 ,喹诺酮类抗菌药通过结合细菌Ⅱ类拓扑异构酶 ,干扰细菌复制 ,而发挥抑菌作用。Ⅱ类拓扑异构酶变异时 ,细菌可逃脱喹诺酮类的抑菌作用。高水平的耐药由DNA回旋酶和拓扑异构酶Ⅳ同时发生变异造成。 ( 2 )细菌细胞壁是抗菌药进入的屏障。细胞壁组分脂多糖和孔蛋白的改变 ,可减少喹诺酮类的通透。 ( 3)有些细菌可利用“外排泵”主动将喹诺酮类排出 ,降低喹诺酮类在菌体内的积累浓度。 ( 4 )细菌的其他一些代谢因素也可影响喹诺酮类的抑菌作用。 展开更多
关键词 喹诺酮类 耐药机制 细菌 拓扑异构酶
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上海市大学生螨性皮炎的调查及危险因素分析 被引量：12
3
作者 周淑君 张敏 +3 位作者 方颖 黄建浩 沈晟 蔡小狄 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2004年第2期85-86,共2页
目的　探讨居住环境和卫生习惯等因素对在校大学生螨性皮炎的影响。　方法　对在校大学生的宿舍类型、卫生习惯、床席使用以及皮炎的症状等作问卷调查 ;同时收集床席的屑灰 ,于解剖镜下找活虫 ,经蒲利氏液胶封片后在显微镜下作形态鉴定... 目的　探讨居住环境和卫生习惯等因素对在校大学生螨性皮炎的影响。　方法　对在校大学生的宿舍类型、卫生习惯、床席使用以及皮炎的症状等作问卷调查 ;同时收集床席的屑灰 ,于解剖镜下找活虫 ,经蒲利氏液胶封片后在显微镜下作形态鉴定。　结果　大学生螨性皮炎患病率为 2 3 .2 % ,女生 (3 5 .5 % ,3 8/ 10 7)高于男生 (9.4% ,9/ 96)。丘疹平均直径为 6.4mm ,以手臂部位最多见 (74.5 % ) ,其次为大腿 (4 0 .4% )和腰部 (2 7.7% )。床席中检出 4种螨 :尘螨(3 5 .5 % )、粉螨 (2 7.1% )、革螨 (8.9% )、肉食螨 (2 1.7% )。在皮炎患者的床席中 ,致痒螨检出率高 ,革螨为 2 5 .5 % (12 /47)、肉食螨 5 5 .3 % (2 6/ 47)、粉螨 40 .4% (19/ 47)。经单因素分析 ,宿舍陈旧和室内有蟑螂为皮炎发生的危险因素 ,并具有明显的居室聚集性 ,用热水擦席与螨性皮炎有一定相关性。　结论　上海市大学生螨性皮炎患病率较高 ,主要由床席内的致痒螨 (革螨、肉食螨、粉螨 )所致 ;旧居室及蟑螂多的环境是其发生的危险因素 ;螨性皮炎有明显的居室聚集性。 展开更多
关键词 螨性皮炎 危险因素 聚集性
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银杏酸5种同系物单体的制备及其杀灭钉螺的作用 被引量：8
4
作者 毛佐华 俞培忠 +3 位作者 孙锴 潘小海 姜庆五 潘家祜 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期274-278,共5页
目的探索分离纯化的银杏酸同系物单体对钉螺的影响。方法用石油醚从银杏外种皮提取银杏酸,经半制备高效液相色谱(HPLC)分离,通过液相-质谱联机系统鉴定。按WHO"杀螺剂实验室终筛方法"检测银杏酸分离纯化的5个同系物单体杀灭... 目的探索分离纯化的银杏酸同系物单体对钉螺的影响。方法用石油醚从银杏外种皮提取银杏酸,经半制备高效液相色谱(HPLC)分离,通过液相-质谱联机系统鉴定。按WHO"杀螺剂实验室终筛方法"检测银杏酸分离纯化的5个同系物单体杀灭湖北钉螺的作用。结果纯化的银杏酸5个同系物单体为GA13:0、GA15:1、GA15:0、GA17:1和GA17:2,其母核苯环上分别有1个13、15及17烷基或烯基的侧链。各单体占总银杏酸的比例分别为17.6%、52.3%、3.2%、23.3%和3.6%。杀螺活性顺序为:GA13:0>GA15:1>GA15:0>GA17:1>GA17:2。24h对钉螺的半数致死浓度(LC50)依次为20.79、22.28、33.76、51.89和59.10mg/L。GA13:0和GA15:1对钉螺上爬的抑制作用明显。结论银杏酸单体杀灭钉螺的作用受其侧链碳原子数量以及所含双键数目的影响,单体GA13:0及GA15:1杀钉螺作用明显,并能显著抑制钉螺上爬。单体GA15:0也有一定的杀螺活性。 展开更多
关键词 银杏酸 灭螺剂 钉螺 单体
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福氏志贺菌感染豚鼠和HeLa细胞的毒力 被引量：3
5
作者 钱雪琴 李雪萍 +1 位作者 王重振 钱利生 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期132-134,F004,共4页
目的　研究福氏志贺菌感染豚鼠和HeLa细胞后细菌致病能力的差异 ,探讨痢疾的防治。方法　选用 2 8株福氏志贺菌感染豚鼠眼角膜 ,观察角膜结膜病变反应 ,并进行细胞学、细菌学、病理组织切片检查。然后再选出12株福氏志贺菌强毒株和两株... 目的　研究福氏志贺菌感染豚鼠和HeLa细胞后细菌致病能力的差异 ,探讨痢疾的防治。方法　选用 2 8株福氏志贺菌感染豚鼠眼角膜 ,观察角膜结膜病变反应 ,并进行细胞学、细菌学、病理组织切片检查。然后再选出12株福氏志贺菌强毒株和两株弱毒株 ,通过噬斑形成实验 ,观察对HeLa细胞的侵袭能力。结果　 2 8株福氏志贺菌均在 3d之内引起豚鼠发病 ,但症状表现有差异 ,除 2株福氏志贺菌感染豚鼠后发病时间延长、症状轻微外 ,其余菌株则引起较为严重的角膜结膜炎 ,尤其在感染第 3天 ,出现最为典型的临床表现。噬斑形成试验结果与豚鼠感染试验基本相符。结论　检测福氏志贺菌的毒力可用HeLa细胞噬斑形成试验替代Sereny试验。利用Sereny试验和HeLa细胞噬斑形成试验鉴定出 2 6株福氏志贺菌的强毒株和 2株弱毒株 。 展开更多
关键词 福氏志贺菌感染 豚鼠 HELA细胞 毒力 角膜结膜炎
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常见食源性吸虫病及其诊治进展 被引量：5
6
作者 刘君 程训佳 潘孝彰 《传染病信息》 2015年第3期141-144,共4页
食源性吸虫病是一类被忽视的热带病,据吸虫寄生的部位分为肝脏吸虫病、肺吸虫病及肠吸虫病。随着当前食物供应的全球化,食源性吸虫病呈现出感染人群数量增加和疾病分布区域面积增大的趋势。本文就常见食源性吸虫病及其诊治进展进行概述。
关键词 食源性吸虫病 肝脏吸虫病 肺吸虫病 肠吸虫病
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肠道病毒71型的功能基因组学研究进展 被引量：5
7
作者 高爽 龙健儿 《生命科学》 CSCD 2012年第1期43-49,共7页
肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)感染通常引起婴幼儿手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD),但少数可引起无菌性脑膜炎(asepic meningitis)、脑炎(encephalitis)和类脊髓灰质炎的麻痹性疾病(poliomyelitis-like paralysis... 肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)感染通常引起婴幼儿手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD),但少数可引起无菌性脑膜炎(asepic meningitis)、脑炎(encephalitis)和类脊髓灰质炎的麻痹性疾病(poliomyelitis-like paralysis)等严重的神经系统疾病。功能基因组学研究对于探讨EV71的感染及复制过程、药物及疫苗的研制具有重大意义。该文就EV71的基因组结构及其功能的研究进展作简要的概述。 展开更多
关键词 EV71 病毒复制 基因组功能
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福氏志贺菌临床分离株毒力基因的研究 被引量：2
8
作者 张俊琪 钱雪琴 +1 位作者 李雪萍 钱利生 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1243-1246,共4页
目的研究在一种快速、特异的mPCR方法在检出福氏志贺菌的同时对其毒力进行监测。方法选取福氏志贺菌三种毒力基因ipaH,ial,set1B作为扩增目标,在同一mPCR体系中对86株福氏志贺菌临床分离株进行了检测,并选取12株进行了噬斑形成试验,观... 目的研究在一种快速、特异的mPCR方法在检出福氏志贺菌的同时对其毒力进行监测。方法选取福氏志贺菌三种毒力基因ipaH,ial,set1B作为扩增目标,在同一mPCR体系中对86株福氏志贺菌临床分离株进行了检测,并选取12株进行了噬斑形成试验,观察了扩增产物不同的福氏志贺菌对Hela细胞的毒力作用。结果86株福氏志贺菌临床分离株均检测到ipaH基因,阳性率为100%;45株检测到ial基因,阳性率为52%;69株检测到set1B基因,阳性率为80%。噬斑形成试验证明,mPCR结果不同的菌株对Hela细胞的感染能力存在明显差异。结论应用上述mPCR体系在检出福氏志贺菌的同时能够对菌株的毒力进行初步判别,对于临床诊断及治疗具有重要意义。 展开更多
关键词 福氏志贺菌 mPCR 噬斑形成试验
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《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》创刊40年发展历程
9
作者 盛慧锋 周晓农 +19 位作者 余森海 汤林华 冯正 李石柱 薛纯良 吴观陵 余新炳 温廷桓 程训佳 潘卫庆 胡薇 苏川 汪天平 吴忠道 陈勤 张争艳 戴菁 李菂 刘雨舟 曹建平 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CSCD 北大核心 2023年第1期1-9,共9页
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》创刊于1983年。40年来,该刊见证了我国重要寄生虫病防治取得的巨大成就,尤其是有效控制了血吸虫病(2015)、消除了淋巴丝虫病(2007年)和疟疾(2021),为寄生虫病防治研究提供了重要的学术交流平台,促进了国... 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》创刊于1983年。40年来,该刊见证了我国重要寄生虫病防治取得的巨大成就,尤其是有效控制了血吸虫病(2015)、消除了淋巴丝虫病(2007年)和疟疾(2021),为寄生虫病防治研究提供了重要的学术交流平台,促进了国内外学术交流。在历届编委会的悉心指导下,该刊严守学术标准,坚守精品办刊理念,国内国际影响力不断提升。创刊不久,先后被国内外重要数据库收录,国际被Medline、Scopus收录,国内被“中国科技引文数据库(CSCD,C库)”等收录,分别入选“中国科技核心期刊”“中文核心期刊”“科技期刊世界影响力指数(WJCI)报告”“预防医学与卫生学高质量科技期刊分级目录”。曾被评选为“百种中国杰出学术期刊”“卫生部首届医药卫生优秀期刊一等奖”“国家卫生计生委首届优秀期刊奖”“中华预防医学系列杂志优秀期刊一等奖/优秀奖”和“华东地区优秀期刊奖”等。2021年的核心影响因子为1.743,再创历史新高,继续在31本基础医学类核心期刊中位列首位。2006年启动网络信息化建设,2016年建立了“微信”平台,使期刊的传播、服务能力和影响力显著提升。本文总结了《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》创刊40年来的办刊历程,并对未来发展提出愿景。 展开更多
关键词 中国寄生虫学与寄生虫病杂志 发展历程 愿景
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多学科交叉新型检测技术在寄生虫感染诊断中的应用和展望 被引量：4
10
作者 荆雯雯 程训佳 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CSCD 北大核心 2022年第1期20-27,35,共9页
近年来我国人群寄生虫感染率呈逐年下降的趋势,然而在世界范围内,寄生虫病仍然是人类生命健康的重要威胁,这也给我国输入性寄生虫病防治带来了严峻的挑战。对寄生虫感染及时、准确的检测是寄生虫病防控的关键,对患者的临床救治也具有重... 近年来我国人群寄生虫感染率呈逐年下降的趋势,然而在世界范围内,寄生虫病仍然是人类生命健康的重要威胁,这也给我国输入性寄生虫病防治带来了严峻的挑战。对寄生虫感染及时、准确的检测是寄生虫病防控的关键,对患者的临床救治也具有重要的意义。提升寄生虫感染检测能力的关键是检测技术的不断创新与应用。本文从多学科交叉的角度概述了寄生虫感染检测中的常用及新型检测技术,并展望未来可能应用到寄生虫感染检测中的新技术,以期为增加可提升我国寄生虫感染的检测能力的方式提供参考。 展开更多
关键词 寄生虫感染 病原学检测 免疫学检测 分子检测 寄生虫检测技术
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HIV感染伴发溶组织内阿米巴感染概况 被引量：5
11
作者 管悦 冯萌 程训佳 《传染病信息》 2015年第3期183-186,共4页
溶组织内阿米巴是侵袭性阿米巴病的病原体,据估计每年全世界约有5000万人感染。同时据已报道的为数不多的流行病学调查数据显示,溶组织内阿米巴感染在HIV感染者这一特殊人群中正呈上升趋势。尽管溶组织内阿米巴并未归入机会致病寄生虫,... 溶组织内阿米巴是侵袭性阿米巴病的病原体,据估计每年全世界约有5000万人感染。同时据已报道的为数不多的流行病学调查数据显示,溶组织内阿米巴感染在HIV感染者这一特殊人群中正呈上升趋势。尽管溶组织内阿米巴并未归入机会致病寄生虫,但其和HIV感染的相关性越来越受到关注。本文就溶组织内阿米巴在HIV感染者中流行情况、感染的危险因素、临床表现、诊断及治疗方面进行综述。 展开更多
关键词 溶组织内阿米巴 内阿米巴病 HIV 流行病学
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微小隐孢子虫致病相关蛋白的研究进展 被引量：4
12
作者 陶艳琳 程训佳 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期253-255,共3页
关键词 腹泻 相关蛋白 微小隐孢子虫 致病 免疫功能 宿主 正常 隐孢子虫病 预防方法 病原体
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我国若干蜱媒疾病概况 被引量：3
13
作者 满素琴 付永锋 潘孝彰 《传染病信息》 2015年第3期137-140,144,共5页
蜱是传播病原体种类最多的节肢动物。近年来,随着发病率的升高,蜱媒疾病越来越引起世界的关注。本文对我国常见的几种蜱媒疾病如发热伴血小板减少综合征、莱姆病、巴贝虫病及蜱传脑炎的流行特点、临床表现、诊断方法和病原治疗进行综述。
关键词 疾病媒介 节肢动物 蜱 传染病 病原
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HIV／AIDS合并溶组织内阿米巴感染患者5例临床分析 被引量：4
14
作者 齐唐凯 付永锋 +3 位作者 张云智 杨彬 程训佳 卢洪洲 《中华临床感染病杂志》 CAS 2009年第2期112-113,共2页
溶组织内阿米巴是HIV／AIDS患者常见的机会感染病原体之一，是HIV感染者腹泻的主要原因，可引起肝脓肿、脑脓肿及浆膜腔脓肿等危及患者生命的并发症。
关键词 内阿米巴 溶组织 获得性免疫缺陷综合征 感染
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天然人源IgG Fab噬菌体抗体库的构建及多样性分析 被引量：4
15
作者 邵红霞 章黎 +4 位作者 杨彬 冯萌 付永峰 Hiroshi Tachibana 程训佳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1007-1010,1015,共5页
目的:构建天然人源IgGFab噬菌体抗体库并分析来源于健康人外周血B淋巴细胞的抗体基因可变区的多样性及优势选择。方法:以DNA重组技术从300名健康志愿者的外周血淋巴细胞中扩增出全套人抗体轻链及重链Fd基因,分别插入噬菌体载体pFabICN... 目的:构建天然人源IgGFab噬菌体抗体库并分析来源于健康人外周血B淋巴细胞的抗体基因可变区的多样性及优势选择。方法:以DNA重组技术从300名健康志愿者的外周血淋巴细胞中扩增出全套人抗体轻链及重链Fd基因,分别插入噬菌体载体pFabICN相应位置,构建天然人源免疫球蛋白G基因文库;进一步从抗体库中随机挑选克隆,获得重轻链基因进行核苷酸序列测定并利用IgBLAST数据库分析抗体基因可变区的同源家族。结果:从4×108库容的天然人源IgGFab噬菌体抗体库中随机挑选克隆,对其中32个轻链及重链Fd基因插入正确的克隆进行核苷酸序列测定和氨基酸序列的推算,获得29条彼此完全不同的Fd重链基因及轻链基因。以IgBLAST数据库比对分析显示29条重链基因的V区分别属于VH3(72.4%),VH1(10.3%),VH4(6.9%),VH5(6.9%)和VH7(3.4%)基因家族。29条轻链基因分别属于Vκ1(44.8%),Vκ2(15.4%),Vκ3(11.5%),Vκ4(23.1%)基因家族和Vλ1(11.5%)基因家族。结论:以300份健康人外周血淋巴细胞的抗体基因构建的天然人源IgGFab噬菌体抗体库基因多样性良好,重链VH3基因家族存在优势表达。 展开更多
关键词 噬菌体展示库 免疫球蛋白Fab片段 免疫球蛋白重链基因 抗体多样性
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志贺菌对HeLa细胞侵袭力的研究 被引量：2
16
作者 李雪萍 钱雪琴 钱利生 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期71-75,共5页
通过使用噬斑形成试验、透射电镜及检测志贺菌蛋白表达等方法,研究志贺菌对Hela细胞的侵袭能力。研究发现:37℃培养条件下,胞质内出现成堆的志贺菌;30℃培养条件下,细菌主要分布在细胞外。SDS-PAGE显示,与30℃培养条件相比,在37℃培养下... 通过使用噬斑形成试验、透射电镜及检测志贺菌蛋白表达等方法,研究志贺菌对Hela细胞的侵袭能力。研究发现:37℃培养条件下,胞质内出现成堆的志贺菌;30℃培养条件下,细菌主要分布在细胞外。SDS-PAGE显示,与30℃培养条件相比,在37℃培养下,志贺菌表达蛋白质的种类和数量明显增加。噬斑形成发现,12株福氏志贺菌强毒株,有9株噬斑数>1000个/ml,而2 株弱毒株噬斑数则在50个/ml以下。透射电镜证实了志贺菌对细胞的黏附、侵入和释放过程。结果表明:志贺菌对细胞的侵袭能力受温度的影响;不同志贺菌流行株对细胞的侵袭力存在着差异:实验也显示,应用HeLa细胞研究志贺菌侵袭力是一种简便易行且价廉的方法。 展开更多
关键词 志贺菌 HELA细胞 侵袭能力 温度 流行株 细菌性痢疾 蛋白表达
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HDM性哮喘疫苗研究进展 被引量：2
17
作者 范怡敏 程训佳 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期437-438,F003,共3页
HDM能引起多种变应性疾病 ,已发现的HDM变应原有 19类 ,其中第 1类和第 2类最为重要。变应原来源的多肽或者编码HDM变应原多肽的DNA可以用于制备HDM性哮喘疫苗。应用一些可生物降解的微球包装质粒DNA ,或者同时运用CpG以及编码Th1细胞... HDM能引起多种变应性疾病 ,已发现的HDM变应原有 19类 ,其中第 1类和第 2类最为重要。变应原来源的多肽或者编码HDM变应原多肽的DNA可以用于制备HDM性哮喘疫苗。应用一些可生物降解的微球包装质粒DNA ,或者同时运用CpG以及编码Th1细胞因子的DNA等能加强预防接种疫苗引起的免疫反应 ,起到佐剂的作用 ;以BCG等与HDM变应原进行联合免疫亦能增强其效应。随着研究的深入 。 展开更多
关键词 HDM 哮喘 疫苗
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肺炎衣原体单克隆抗体的研制和应用 被引量：3
18
作者 陈园园 王卫群 +2 位作者 陈学勤 李雪萍 钱利生 《生物技术通讯》 CAS 2006年第3期362-366,共5页
目的:以杂交瘤技术制备抗肺炎衣原体(Cpn)单克隆抗体,用于衣原体感染的诊断及相关疾病的研究。方法:以进口Cpn抗原免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾脏细胞与SP2/0细胞融合,用间接ELISA法筛选抗体阳性杂交瘤细胞。收集接种过杂交瘤细胞的... 目的:以杂交瘤技术制备抗肺炎衣原体(Cpn)单克隆抗体,用于衣原体感染的诊断及相关疾病的研究。方法:以进口Cpn抗原免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾脏细胞与SP2/0细胞融合,用间接ELISA法筛选抗体阳性杂交瘤细胞。收集接种过杂交瘤细胞的小鼠腹水,分别用ELISA法检测抗体效价、用免疫琼脂扩散试验鉴定单抗的类别、用微量荧光免疫试验(MIF)检测单抗的种属特异性。用克隆表达的主要外膜蛋白(MOMP)通过Dot-ELISA法分析单抗的特异性。通过建立直接免疫荧光法(DIF)检测病人和正常人外周血单核细胞(PBMC)标本,并进行统计处理。结果:小鼠脾脏细胞与SP2/0细胞的融合率为61.46%(236/384),最终获得4株稳定分泌Cpn单抗的细胞株。用ELISA法检测小鼠腹水,效价高者可达1∶100000。免疫琼脂扩散试验鉴定为IgG类单抗,扩散效价达1∶128。自制单抗能与重组MOMP发生结合反应,表明其为抗CpnMOMP抗体。自制单抗与进口单抗类似,即与鹦鹉热衣原体(Cps)出现一定程度的交叉反应,而与沙眼衣原体(Ct)则无交叉反应。对240份PBMC标本用自制单抗和进口单抗同时检测Cpn抗原,2种单抗检测均阳性的共86份,经SPSS软件分析两者具有较好的一致性。DIF检测显示,心血管疾病和呼吸道疾病Cpn抗原阳性检出率分别为69.34%(95/137)和72.06%(49/68),与正常人标本Cpn抗原阳性率相比,均具有显著性差异。结论:获得IgG类抗CpnMOMP单抗,自制Cpn单抗的特异性和敏感性均与进口单抗具有较好的一致性。PBMCCpn抗原检测的统计分析证实,对于动脉粥样硬化等某些疾病的发生和发展,Cpn感染可能是重要的原因之一,但其中的因果关系还有待深入研究。 展开更多
关键词 肺炎衣原体单抗 免疫荧光试验 肺炎衣原体主要外膜蛋白 外周血单核细胞
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自制肺炎衣原体单克隆抗体检测其特异性抗原对动脉粥样硬化诊断的临床意义 被引量：2
19
作者 史益军 钱利生 +4 位作者 王卫群 李雪苹 李刚 徐坚 余竹元 《中国全科医学》 CAS CSCD 2007年第1期29-31,共3页
目的探讨采用自制肺炎衣原体单克隆抗体(Cpn-McAb)检测人外周血单核细胞(PBMC)和冠状动脉瘤标本中肺炎衣原体特异性抗原(Cpn-Ag)的临床意义。方法采用自制Cpn-McAb的直接免疫荧光(DI)法检测颈动脉粥样硬化和健康体检者PBMC中Cpn-Ag及冠... 目的探讨采用自制肺炎衣原体单克隆抗体(Cpn-McAb)检测人外周血单核细胞(PBMC)和冠状动脉瘤标本中肺炎衣原体特异性抗原(Cpn-Ag)的临床意义。方法采用自制Cpn-McAb的直接免疫荧光(DI)法检测颈动脉粥样硬化和健康体检者PBMC中Cpn-Ag及冠状动脉瘤和正常冠状动脉标本中Cpn-Ag的表达。结果颈动脉粥样硬化患者和健康体检者PBMC中Cpn-Ag检测结果间差异有显著性意义(P<0.01);粥样硬化冠状动脉瘤标本和正常冠状动脉标本外膜下和/或斑块内Cpn-Ag检测结果间差异有显著性意义(P<0.01)。冠状动脉瘤标本中有大量Cpn-Ag沉积,分别位于外膜下及粥样硬化斑块内,而正常血管壁中仅有少量沉积(P<0.05)。结论PBMC中的Cpn-Ag的检测可为诊治与该病原体相关的疾病提供依据;Cpn可能是动脉粥样硬化形成的原因之一。 展开更多
关键词 动脉硬化 衣原体 肺炎 抗原 单克隆 抗体 外周血单核细胞
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志贺菌GyrA基因突变与耐药相关性研究 被引量：2
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作者 王重振 李雪萍 +1 位作者 钱雪琴 钱利生 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第6期86-89,共4页
收集 1 1 4株志贺菌流行株 ,分别作血清分型和检查对喹诺酮类药物的敏感性 ;PCR扩增耐药相关的GyrA基因片段 ,作单链构象多态性 (single strandconformationpolymorphism ,SSCP)分析和序列测定 ;最终研究突变与喹诺酮类耐药的相关性。... 收集 1 1 4株志贺菌流行株 ,分别作血清分型和检查对喹诺酮类药物的敏感性 ;PCR扩增耐药相关的GyrA基因片段 ,作单链构象多态性 (single strandconformationpolymorphism ,SSCP)分析和序列测定 ;最终研究突变与喹诺酮类耐药的相关性。结果发现我国志贺菌流行株仍以福氏志贺菌为主 ,约占 98 2 % ;大多数福氏志贺菌株对环丙沙星、诺氟沙星高度敏感 ,敏感率分别为81 2 5 %和 74 1 % ;流行株GyrA基因耐药相关片段与野生菌株相比 ,部分菌株出现C( 2 4 8) T单位点突变或C( 2 4 8) T和A( 2 60 ) G双位点突变 ;卡方检验显示 ,C( 2 4 8) T单位点突变基础上增加A( 2 60 ) G点突变与环丙沙星、诺氟沙星耐药相关 ,故A( 2 60 ) G可作为耐药监测位点 ;另外 ,可用SSCP分析PCR扩增的GyrA基因耐药相关片断 。 展开更多
关键词 志贺菌 喹诺酮类药 Cyra基因 SSCP 突变 耐药性
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