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星形胶质细胞来源外泌体对氧糖剥夺再复氧后PC12细胞线粒体功能损伤的保护作用
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作者 高霄 王正薇 +5 位作者 蔡娜 唐智 吴昌学 齐晓岚 官志忠 肖雁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期827-837,共11页
外泌体可以改善由缺氧缺血引起的神经细胞损伤,但星形胶质细胞来源的外泌体(astrocyte-derived exosomes,As-exo)与线粒体功能、线粒体相关内质网膜(mitochondrial associated ER membrane,MAM)的功能及线粒体自噬是否相关目前尚未明确... 外泌体可以改善由缺氧缺血引起的神经细胞损伤,但星形胶质细胞来源的外泌体(astrocyte-derived exosomes,As-exo)与线粒体功能、线粒体相关内质网膜(mitochondrial associated ER membrane,MAM)的功能及线粒体自噬是否相关目前尚未明确。本研究旨在探究星形胶质细胞来源外泌体对氧糖剥夺再复氧(oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)后PC12细胞线粒体功能、MAM以及线粒体自噬的调控作用。超速离心法提取星形胶质细胞培养基上清中的外泌体并对其进行鉴定。利用活细胞工作站观察到荧光标记后的外泌体在24 h时即在PC12细胞内出现明显的富集现象,同时在激光共聚焦扫描显微镜下观察到外泌体与线粒体出现共定位现象;采用Seahorse细胞能量代谢分仪检测线粒体压力变化:与Control组相比,OGD/R组的基础呼吸、质子漏、最大呼吸和ATP相关呼吸都有明显降低(P<0.05或P<0.01),OGD/R+exo组与OGD/R组相比4项指标都升高且差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);线粒体和内质网共定位结果表明,MAM受到氧糖剥夺再复氧伤害时,结构出现距离减小的聚合现象,而As-exo处理后MAM聚合现象减弱;流式结果表明,As-exo,一定程度恢复由氧糖剥夺损伤带来的线粒体膜电位降低和ROS升高;Western印迹结果显示,As-exo能显著抑制由OGD/R引起的线粒体自噬相关蛋白张力蛋白同源物诱导的假定激酶1(PTEN induced kinase 1,PINK1)和Parkin蛋白(parkin RBR E3 ubiquitin protein ligase,Parkin)升高,加入As-exo可降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达量,升高P62蛋白的表达水平,降低OGD/R引起的线粒体自噬水平。由此可见,OGD/R处理能引起PC12细胞的线粒体功能紊乱、MAM结构改变及线粒体自噬增加,As-exo处理后能改善细胞的线粒体功能、减弱MAM的形成和降低线粒体自噬,从而具有预防缺血性脑卒中再灌注损伤的治疗潜力。 展开更多
关键词 外泌体 星形胶质细胞 氧糖剥夺再灌注 线粒体自噬 线粒体相关内质网膜
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解纤维梭菌脱水四环素诱导的ClosTron基因打靶系统构建 被引量:2
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作者 崔古贞 花登雄 +5 位作者 管玉祝 鲍江舰 张馨月 谷俊莹 陈峥宏 洪伟 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2982-2990,共9页
【背景】解纤维梭菌是发酵木质纤维素生产乙醇的中温模式菌株,构建可控诱导的基因打靶技术是研究解纤维梭菌遗传调控的重要手段。【目的】在解纤维梭菌中构建脱水四环素诱导的ClosTron基因打靶系统。【方法】首先,分析解纤维梭菌对脱水... 【背景】解纤维梭菌是发酵木质纤维素生产乙醇的中温模式菌株,构建可控诱导的基因打靶技术是研究解纤维梭菌遗传调控的重要手段。【目的】在解纤维梭菌中构建脱水四环素诱导的ClosTron基因打靶系统。【方法】首先,分析解纤维梭菌对脱水四环素的敏感性,筛选合适的诱导剂浓度,并以β-葡萄糖苷酶为报告基因,检测其在解纤维梭菌中的诱导效果。然后,将脱水四环素诱导型操纵子与II型内含子元件组合,构建脱水四环素诱导的ClosTron质粒。最后,以解纤维梭菌mspI、ldh和ack为例,检测其在解纤维梭菌中的打靶效率。【结果】脱水四环素诱导系统在解纤维梭菌中能够诱导ClosTron元件表达,在mspI、ldh和ack这3个基因位点的打靶效率分别为29.48%±15.51%、23.61%±7.08%和28.09%±6.97%。【结论】在解纤维梭菌中成功构建脱水四环素诱导的ClosTron基因打靶系统,为梭菌基因工程改造奠定了基础。 展开更多
关键词 解纤维梭菌 脱水四环素诱导系统 ClosTron Ⅱ型内含子
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血清胱抑素C联合视黄醇结合蛋白在早期糖尿病肾病诊断中的价值 被引量:20
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作者 李若淳 刘建红 +3 位作者 王小星 曾明燕 苏艳丽 吴昌学 《贵州医科大学学报》 CAS 2017年第12期1469-1472,共4页
目的:探究血清胱抑素C(Cys C)联合视黄醇结合蛋白(RBP)在早期糖尿病肾病诊断中的价值。方法:以90例不同病程的糖尿病患者为观察组,再根据患者病程又分为初诊组、<1年组、1~<6年组及6~12年组;选取同期体检的90例健康人员为对照组,... 目的:探究血清胱抑素C(Cys C)联合视黄醇结合蛋白(RBP)在早期糖尿病肾病诊断中的价值。方法:以90例不同病程的糖尿病患者为观察组,再根据患者病程又分为初诊组、<1年组、1~<6年组及6~12年组;选取同期体检的90例健康人员为对照组,采集2组受检者空腹8 h后的外周血清和晨尿,采用免疫比浊法测定血清Cys C和尿RBP含量;比较两组不同性别受检者、不同病程糖尿病患者血清Cys C、尿RBP的含量及阳性率。结果:观察组患者血清Cys C和尿RBP含量均显著高于对照组(P<0.05),对照组被检者未出现血清Cys C和尿RBP的阳性结果;观察组患者血清Cys C和尿RBP的阳性率分别为42.22%和71.11%,尿RBP的阳性率显著高于血清Cys C的阳性率(P<0.05);血清Cys C、尿RBP的含量和阳性率随着糖尿病病程的延长而逐渐增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:糖尿病早期即可出现肾损伤,Cys C联合尿RBP检测可为肾脏损伤评估提供参考依据。 展开更多
关键词 血清胱抑素C 视黄醇结合蛋白 糖尿病 肾损伤 诊断
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阿托伐他汀钙联合曲美他嗪对心力衰竭患者CRP、IL-6、RDW及BNP水平的影响 被引量:15
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作者 李若淳 钟璟 +2 位作者 林明春 苏艳丽 吴昌学 《贵州医科大学学报》 CAS 2017年第10期1172-1175,共4页
目的:探讨阿托伐他汀钙联合曲美他嗪对心力衰竭患者C反应蛋白(CRP)、白介素6(IL-6)、红细胞分布宽度(RDW)及脑尿钠肽(BNP)水平的影响。方法:75例心力衰竭患者作为观察组(按照NYHA心功能分级分为I级~IV级),45例健康体检者为对照组,观察... 目的:探讨阿托伐他汀钙联合曲美他嗪对心力衰竭患者C反应蛋白(CRP)、白介素6(IL-6)、红细胞分布宽度(RDW)及脑尿钠肽(BNP)水平的影响。方法:75例心力衰竭患者作为观察组(按照NYHA心功能分级分为I级~IV级),45例健康体检者为对照组,观察组患者给予阿托伐他汀钙联合曲美他嗪治疗4周;对照组于体检时、观察组患者于治疗前和治疗结束时,采集空腹静脉血,分别测定抗凝全血的RDW、血浆的CRP、IL-6及BNP含量;比较对照组和不同NYHA心功能分级(I级-IV级)的观察组患者治疗前后的CRP、IL-6、RDW及BNP水平。结果:观察组患者治疗前的RDW、BNP、CRP及IL-6水平高于对照组(P<0.05),随着心力衰竭患者心功能从I级到IV级,患者RDW、BNP、CRP及IL-6含量逐渐升高,不同等级心功能的测定结果比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,心力衰竭患者各项指标均较治疗前降低,其中RDW、BNP降低程度更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:阿托伐他汀钙联合曲美他嗪治疗心力衰竭患者后,患者心脏功能有所改善,主要影响RDW、BNP。 展开更多
关键词 心力衰竭 C反应蛋白 白介素6 红细胞分布宽度 脑尿钠肽
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康复新液治疗儿童急性淋巴细胞白血病化疗性口腔溃疡的临床疗效 被引量:14
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作者 齐兴菊 吴昌学 《贵州医科大学学报》 CAS 2017年第10期1176-1178,1195,共4页
目的:观察康复新液对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)化疗性口腔溃疡的临床疗效。方法:儿童ALL化疗性口腔溃疡患儿60例,随机均分为康复新液组和龙掌口含液组,分别给予康复新液或龙掌口含液口服(3~5 m L含服3~5 min,4次/d)治疗;于治疗第6天... 目的:观察康复新液对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)化疗性口腔溃疡的临床疗效。方法:儿童ALL化疗性口腔溃疡患儿60例,随机均分为康复新液组和龙掌口含液组,分别给予康复新液或龙掌口含液口服(3~5 m L含服3~5 min,4次/d)治疗;于治疗第6天时,观察两组患儿口腔溃疡的治疗效果,比较治疗前后2组患儿口腔溃疡级别、口腔溃疡的消退时间及不良反应。结果:用药第6天时,康复新液组有效率高于龙掌口含液组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前,两组患儿口腔溃疡以3、4级为主,用药第6天时两组患儿的口腔溃疡均有好转,口腔溃疡以0级为主,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后康复新液组患儿0级口腔溃疡比例高于龙掌口含液组(P<0.05),溃疡消退时间短于龙掌口含液组(P<0.05),两组患儿用药期间均无明显不良反应。结论:康复新液治疗儿童ALL化疗性口腔溃疡的效果优于龙掌口含液。 展开更多
关键词 康复新液 龙掌口含液 白血病 口腔溃疡
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仙茅苷对阿尔茨海默病大鼠行为学及海马神经元凋亡的影响 被引量:10
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作者 李若淳 曾明燕 +1 位作者 苏艳丽 吴昌学 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期654-656,670,共4页
目的探讨仙茅苷对阿尔茨海默病大鼠行为学及海马神经元凋亡的影响。方法将60只老年健康雄性SD大鼠腹腔注射D-半乳糖60 mg·kg^(-1),qd(连续6周)联合海马注射β-样淀粉蛋白25-35(Aβ25-35) 4 mmol·L^(-1),qd(第7周),构建阿尔茨... 目的探讨仙茅苷对阿尔茨海默病大鼠行为学及海马神经元凋亡的影响。方法将60只老年健康雄性SD大鼠腹腔注射D-半乳糖60 mg·kg^(-1),qd(连续6周)联合海马注射β-样淀粉蛋白25-35(Aβ25-35) 4 mmol·L^(-1),qd(第7周),构建阿尔茨海默病大鼠模型,并随机分为4组:低、中、高剂量实验组(建模期间予以灌胃仙茅苷24,48,72 mg·kg-1,qd),模型组(建模期间予以灌胃等量0. 9%Na Cl);另选15只老年健康雄性SD大鼠灌胃等量0. 9%Na Cl作为对照组。用Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆功能,用苏木精-伊红(HE)染色及细胞凋亡原位检测(TUNEL)法分别观察海马区神经元凋亡情况。结果对照组、模型组及低、中、高剂量实验组大鼠穿台次数分别为(15. 12±1. 78),(5. 03±1. 17),(7. 45±1. 36),(9. 79±1. 21)和(12. 33±1. 09)次,模型组分别与低、中、高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05);海马神经元凋亡比例分别(8. 42±2. 13)%,(69. 78±9. 97)%,(38. 14±8. 62)%,(24. 77±5. 43)%和(10. 02±1. 46)%,模型组分别与低、中、高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 01)。结论仙茅苷可缓解海马神经元损伤,抑制海马神经元凋亡。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 仙茅苷 海马 神经元 凋亡
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综合治理后贵州省燃煤型地氟病区人群健康状况评价 被引量:9
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作者 官志忠 吴昌学 齐晓岚 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第10期1124-1128,共5页
地方性氟中毒(endemic fluorosis)简称地氟病,是严重危害人体健康的全身性疾病。地氟病主要存在3种类型,即饮水型氟中毒、燃煤污染型氟中毒和饮茶型氟中毒。我国和印度是国际上地氟病流行范围最广、损害程度最重的国家,燃煤型地... 地方性氟中毒(endemic fluorosis)简称地氟病,是严重危害人体健康的全身性疾病。地氟病主要存在3种类型,即饮水型氟中毒、燃煤污染型氟中毒和饮茶型氟中毒。我国和印度是国际上地氟病流行范围最广、损害程度最重的国家,燃煤型地氟病主要发生在我国中西部13个省、市、区,受威胁人口3430万人。 展开更多
关键词 燃煤污染 氟中毒 氧化性应激 综合治理 健康教育 效果评价
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幽门螺杆菌毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白表达的影响 被引量:8
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作者 鲍丽雅 黄婷婷 +5 位作者 赵艳 李超 陈定宇 王琴容 周建奖 谢渊 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第12期1394-1397,1402,共5页
目的检测幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,Hp)主要毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白par-kin、p62、LC3表达的影响,为Hp致胃癌的研究提供理论基础。方法用cagA基因失活突变Hp菌株(1004HpAcagA)和野生型Hp/cagA+菌株(1004Hp)感... 目的检测幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,Hp)主要毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白par-kin、p62、LC3表达的影响,为Hp致胃癌的研究提供理论基础。方法用cagA基因失活突变Hp菌株(1004HpAcagA)和野生型Hp/cagA+菌株(1004Hp)感染原代胃癌细胞,感染6 h收集细胞蛋白,用高表达cagA的真核表达载体pcDNA3.1/cagA脂质体转染胃癌细胞AGS,24 h收集细胞蛋白,用Western blot检测各组细胞线粒体自噬相关蛋白parkin.p62.LC3表达变化。结果parkin、p62、LC3蛋白表达检测灰度值在1004 HpAcagA感染组分别为0.97±0.23 J.71±0.23,1.03+0.14,1004 Hp感染组分别为1.61±0,32,2.26±0,08,1.32±0,04,1004 Hp感染组较1004 HpAcagA感染组升高了1.66倍、1.32倍、1.27倍,差异有统计学意义(F值分别为7.96,15.35,11.09,P<0.05);par-kin、p62、LC3蛋白表达检测灰度值在pcDNA3.1空载体转染组分别为1.15+0.14,0.75+0.23,0.74±0,19,pcDNA 3.1/cagA转染组分别为1.49±0,02,1.01+0.02、l.29±0.07,pcDNA3.1/cagA转染组较pcDNA3.1空载体转染组升高1.29倍、1.35倍、1.74倍,差异有统计学意义(F值分别为17.48,14.02,21.06,P<0.05)。Hp/cagA+感染和pcDNA 3.1/cagA转染取得一致结果,提示Hp cagA注入胃上皮细胞后影响细胞线粒体自噬相关蛋白的表达。结论HpCagA对线粒体自噬有一定的调控作用,其可能是Hp诱导胃癌发生发展的分子机制。 展开更多
关键词 胃癌细胞 线粒体自噬 幽门螺杆菌 CAGA
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硫酸软骨素对实验性慢性氟中毒脑损害大鼠的保护作用及机制研究 被引量:7
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作者 王胜远 邱志伟 +1 位作者 官志忠 刘艳洁 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期271-277,共7页
目的 观察细胞外调节蛋白激酶(Erk)1/2、磷酸化(phospho)-Erk1/2、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9在实验性慢性氟中毒大鼠脑组织中的改变及硫酸软骨素的治疗作用与机制。方法 采用成组设计及细胞培养方法,将人神经母细胞瘤SH-S... 目的 观察细胞外调节蛋白激酶(Erk)1/2、磷酸化(phospho)-Erk1/2、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9在实验性慢性氟中毒大鼠脑组织中的改变及硫酸软骨素的治疗作用与机制。方法 采用成组设计及细胞培养方法,将人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞分为对照组(正常培养液)、染氟组(氟离子:4.0 mmol/L)和硫酸软骨素处理组(氟离子:4.0 mmol/L、硫酸软骨素:0.4 g/L)。染氟24 h,电子显微镜观察SH-SY5Y细胞超微结构变化;染氟72 h,锥虫蓝染色观察细胞存活数量并计算细胞存活率。15只清洁级SD大鼠,按体质量(100 - 120 g)采用随机数字表法分为对照组(饮用自来水,含氟量 〈 0.5 mg/L)、染氟组(氟离子:10.0 mg/L)和硫酸软骨素处理组(氟离子:10.0 mg/L,染氟90 d后0.66 mg/kg硫酸软骨素连续腹腔注射5 d),每组5只,实验周期为95 d。采用Morris水迷宫方法检测大鼠行为学变化,蛋白质免疫印迹法检测脑组织中Erk1/2、phospho-Erk1/2、MMP-2和MMP-9的蛋白表达水平,免疫组织化学法检测大鼠脑组织海马CA2区phospho-Erk1/2、MMP-2、MMP-9的表达及分布。结果 细胞体外培养结果显示,电镜下硫酸软骨素处理组细胞内吞饮小泡较多,有线粒体及内质网肿胀但相对染氟组较少。硫酸软骨素处理组SH-SY5Y细胞存活率[(92 ± 23)%]和细胞数[(7.83 ± 1.38) × 10^6个/ml]明显高于染氟组[(55 ± 2)%、(2.19 ± 1.26) × 10^6个/ml,P均 〈 0.05]。动物实验结果显示,对照组与硫酸软骨素处理组大鼠趋向式搜索次数(2.20 ± 1.09、3.40 ± 1.34)高于染氟组(0.40 ± 0.54,P均 〈 0.05)。染氟组phospho-Erk1/2的蛋白表达(3.26 ± 0.88)较对照组和硫酸软骨素处理组升高(1.53 ± 0.28、2.36 ± 0.87,P均 〈 0.05)。免疫组织化学结果显示,硫酸软骨素处理组phospho-Erk1/2平均灰度值(220.20 展开更多
关键词 硫酸软骨素 细胞外调节蛋白激酶1/2 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9
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硫辛酸对6-羟多巴胺诱导的帕金森模型大鼠的保护作用 被引量:5
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作者 李成朋 韩飞 +6 位作者 杨梅 魏操 周波 张春林 焦玲 官志忠 禹文峰 《贵州医科大学学报》 CAS 2017年第3期249-252,共4页
目的:探讨硫辛酸(LA)对6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠的神经保护功能。方法:健康雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、PD模型组和PD干预组,采用立体定位技术向PD模型组和PD干预组大鼠右侧大脑纹状体注射6-OHDA诱导建立PD... 目的:探讨硫辛酸(LA)对6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠的神经保护功能。方法:健康雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、PD模型组和PD干预组,采用立体定位技术向PD模型组和PD干预组大鼠右侧大脑纹状体注射6-OHDA诱导建立PD大鼠模型,假手术组注射抗坏血酸的生理盐水;术后第4周开始,PD干预组腹腔连续注射LA 14 d,PD模型组和假手术组注射生理盐水;建模后第4周和第7周进行阿扑吗啡(APO)诱导的旋转行为学检测,建模后第4、5、6和7周通过圆筒实验测试大鼠左前肢的使用率;行为学检测结束后,免疫组化染色观察各组大鼠酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞表达。结果:注射APO后,PD模型组和PD干预组均出现向健侧旋转的行为,在第4周时旋转速度均≥3 r/min,表明PD大鼠复制成功;LA干预后(造模后第7周),PD干预组比PD模型组大鼠的旋转速度明显减慢,亦比本组干预前(第4周)减慢,差异具有统计学意义(P<0.05);与假手术组大鼠比较,造模后第5周开始,PD模型和PD干预大鼠的左前肢使用率减少(P<0.05),PD干预组大鼠左前肢的使用率比PD模型组增加(P<0.05);免疫组化示,PD干预组TH染色阳性细胞数较PD模型组多。结论:LA对6-OHDA诱导的PD模型大鼠的黑质多巴胺能神经元具有神经保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 硫辛酸 6-羟多巴胺 氧化应激 多巴胺 酪氨酸羟化酶
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改良6-OHDA注射法建立早期帕金森病大鼠模型 被引量:5
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作者 韩飞 李成朋 +6 位作者 魏操 杨梅 周波 张春林 焦玲 官志忠 禹文峰 《贵州医科大学学报》 CAS 2017年第3期258-262,共5页
目的:改良6-羟基多巴胺(6-OHDA)立体定位注射法建立早期帕金森病(PD)大鼠模型。方法:40只雄性SD大鼠随机分为control组10只,model组30只;于手术前30 min,腹腔注射地昔帕明(25 mg/kg)及帕吉林(5 mg/kg),control组采用立体定位右侧纹状体... 目的:改良6-羟基多巴胺(6-OHDA)立体定位注射法建立早期帕金森病(PD)大鼠模型。方法:40只雄性SD大鼠随机分为control组10只,model组30只;于手术前30 min,腹腔注射地昔帕明(25 mg/kg)及帕吉林(5 mg/kg),control组采用立体定位右侧纹状体注射生理盐水,model组注射6-OHDA;术后第3、4周采用圆筒测试及旋转测试测定大鼠的左前肢使用率和旋转速度,免疫组化方法检测黑质内酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数量。结果:圆筒测试显示madel组大鼠左前肢使用率低于control组(P<0.01),旋转测试显示model组平均向左侧旋转速度(3.48圈/min),明显快于对照组(P<0.01),PD模型成功率为89.66%;免疫组化显示,model组右侧中脑黑质致密部(SNc)部位TH阳性神经元数目较control组右侧减少(44.81±2.89)%,差异有统计学意义(P<0.01),符合临床早期PD诊断标准。结论:改良的6-OHDA注射法建立早期PD大鼠模型简单易行,成功率高。 展开更多
关键词 6-羟基多巴胺 帕金森病 大鼠 多巴胺神经元 酪氨酸羟化酶
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2019年贵州省六枝特区梭戛乡儿童燃煤污染型地方性氟中毒现况调查分析 被引量:5
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作者 喻艳琴 田薇 +8 位作者 李福成 洪伟 樊思伟 张茜 所才海 吴昌学 张婷 王婵娟 何燕 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期801-804,共4页
目的了解贵州省六枝特区梭戛苗族彝族回族乡(简称梭戛乡)燃煤污染型地方性氟中毒(简称燃煤型氟中毒)病区儿童氟中毒现状,为制定下一步防治策略和措施提供科学依据。方法2019年,采用整群抽样方法抽取贵州省六枝特区梭戛乡6所小学8~12岁... 目的了解贵州省六枝特区梭戛苗族彝族回族乡(简称梭戛乡)燃煤污染型地方性氟中毒(简称燃煤型氟中毒)病区儿童氟中毒现状,为制定下一步防治策略和措施提供科学依据。方法2019年,采用整群抽样方法抽取贵州省六枝特区梭戛乡6所小学8~12岁儿童进行问卷调查收集基本信息,按照《氟斑牙诊断》标准进行氟斑牙检查和分度;分别于4月和10月采集儿童即时尿样,并采用离子选择电极法测定尿氟含量。结果共调查8~12岁儿童1381例,年龄为(9.84±1.38)岁,包括男童679例、女童702例。共检出氟斑牙患儿625例,检出率为45.26%;氟斑牙指数为1.00,流行强度为中等流行;氟斑牙分度以极轻度为主,占37.00%(511/1381)。8~12岁儿童氟斑牙检出率分别为35.10%(106/302)、35.83%(115/321).47.96%(129/269)、55.23%(153/277)、57.55%(122/212),不同年龄间比较差异有统计学意义(χ^2=48.949,P<0.01),且儿童氟斑牙检出率随年龄的增加呈上升趋势(χ^2趋势=45.254,P<0.01);男、女童氟斑牙检出率分别为43.59%(296/679)、46.87%(329/702),不同性别间比较差异无统计学意义(χ^2=1.492,P>0.05)。在4月和10月分别检测8~12岁儿童尿样123、107份,尿氟几何均数分别为1.55、0.47 mg/L,其中4月尿氟水平高于正常范围(<1.40 mg/L)。结论贵州省六枝特区梭戛乡目前仍为氟中毒病区,存在不同月份尿氟水平差异较大的现象,提示该地区居民可能是间断高氟摄入,应进一步加强地方性氟中毒的防控工作。 展开更多
关键词 氟中毒 尿 燃煤污染型 儿童
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幽门螺杆菌感染对胃上皮细胞铁死亡相关脂代谢蛋白表达及脂质过氧化水平的影响
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作者 黄婷婷 陈定宇 +4 位作者 桂书琴 赵艳 王琴容 周建奖 谢渊 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第11期1277-1282,共6页
目的探究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染对胃上皮细胞和C57BL/6小鼠胃组织中铁死亡相关脂代谢蛋白ACSL4、LPCAT3表达及对脂质过氧化物降解产物丙二醛(MDA)和4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平的影响。方法用HpGZ7和Hp26695菌株感染正常... 目的探究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染对胃上皮细胞和C57BL/6小鼠胃组织中铁死亡相关脂代谢蛋白ACSL4、LPCAT3表达及对脂质过氧化物降解产物丙二醛(MDA)和4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平的影响。方法用HpGZ7和Hp26695菌株感染正常胃上皮GES-1细胞和胃癌AGS细胞,感染复数为50∶1,6 h、24 h、48 h后分别收集细胞总蛋白和细胞裂解液,Western blot检测ACSL4和LPCAT3的蛋白表达,试剂盒检测细胞裂解液MDA、4-HNE水平。用Hp灌胃感染C57BL/6小鼠1、3、6月,取胃黏膜组织并制备切片,免疫组织化学染色检测ACSL4、LPCAT3蛋白的表达。结果与未感染组比较,Hp感染GES-1(F值分别为18.82、13.07,4.28、13.03)和AGS(F值分别为14.51、25.88,17.90、16.62)细胞ACSL4、LPCAT3蛋白表达水平均增加,并随着感染时间的延长表达呈上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。与未感染对照组比较,Hp感染C57BL/6小鼠胃组织中ACSL4、LPCAT3的表达水平均显著升高,其中LPCAT3表达水平增加更显著(F值分别为27.11,103.62,P<0.05)。MDA含量均高于未感染组(Hp感染AGS细胞6 h、24 h、48 h后分别为0.27±0.06、1.13±0.14、0.83±0.12,0.56±0.13、0.86±0.11、0.72±0.16。Hp感染GES-1细胞6h、24 h、48 h后分别为0.22±0.08、0.29±0.09、0.80±0.08,0.17±0.06、0.40±0.08、0.63±0.09),差异有统计学意义(F值分别为27.29、10.56,30.85、18.42,P<0.05)。4-HNE含量均高于未感染组(Hp感染AGS细胞6 h、24 h、48 h后分别为0.12±0.03、0.20±0.06、0.25±0.04,0.06±0.02、0.21±0.03、0.30±0.04。Hp感染GES-1细胞6 h、24 h、48 h后分别为0.23±0.06、0.36±0.06、0.63±0.09,0.19±0.04、0.19±0.05、0.41±0.07),差异有统计学意义(F值分别为7.48、32.31,16.83、12.55,P<0.05)。结论Hp感染可引起胃上皮细胞和C57BL/6小鼠胃组织中铁死亡相关脂代谢蛋白ACSL4、LPCAT3表达增加,细胞内脂质过氧化物降解产物MDA与4-HNE积累,提示Hp可能通过影响其感染细胞内的脂代谢水平, 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 铁死亡 脂代谢 ACSL4 LPCAT3
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CDH1受幽门螺杆菌感染调控及其在胃癌组织中表达分析 被引量:4
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作者 陈定宇 何小凤 +6 位作者 程薇 全欣莹 张瑜 赵艳 王琴容 周建奖 谢渊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第3期412-417,共6页
目的探究幽门螺杆菌(Hp)对E-钙黏蛋白(CDH1)表达的影响及CDH1在胃癌(GC)组织中的表达情况,为进一步探索CDH1在Hp引起胃癌中的作用提供理论基础。方法用Hp灌胃蒙古沙鼠,3、12、24个月后分别取其胃组织,进行免疫组化染色检测CDH1的表达;H... 目的探究幽门螺杆菌(Hp)对E-钙黏蛋白(CDH1)表达的影响及CDH1在胃癌(GC)组织中的表达情况,为进一步探索CDH1在Hp引起胃癌中的作用提供理论基础。方法用Hp灌胃蒙古沙鼠,3、12、24个月后分别取其胃组织,进行免疫组化染色检测CDH1的表达;Hp感染胃上皮细胞AGS,24 h后收集样本,Western blot检测各组CDH1的表达。通过TCGA和Kaplan-Meier Plotter数据库比较胃癌组织和癌旁组织中CDH1的表达差异及CDH1与胃癌的预后分析;通过R语言对CDH1基因进行KEGG富集分析;另收集胃癌组织和癌旁组织标本各10例,免疫组化染色检测CDH1的表达。结果Hp灌胃蒙古沙鼠胃组织免疫组化染色结果显示,Hp感染3、12、24个月胃组织CDH1阳性率分别为13.70%、13.20%、22.90%,对照组阳性率分别为0.04%、4.50%、4.77%,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,Hp感染AGS细胞组CDH1蛋白表达增高,差异有统计学意义(P<0.05);TCGA胃癌数据库中共收集449例具有临床病理参数的病例及其对应的CDH1 mRNA表达量,癌旁组织中CDH1 mRNA表达水平(76.36±0.48)显著低于胃癌组织中CDH1 mRNA的表达水平(147.59±0.11),差异有统计学意义(P<0.05);Kaplan-Meier Plotter数据库分析表明胃癌CDH1高表达时,生存率降低(P<0.05);KEGG富集显示CDH1表达与胃癌、甲状腺癌、膀胱癌、子宫内膜癌、黑色素瘤等肿瘤相关,功能显著富集到细菌侵袭上皮细胞和黏附连接,通路显著富集到Apelin信号通路、Hippo信号通路和Rap1信号通路等;CDH1阳性率在人胃癌组织为76.27%,高于癌旁组织45.68%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Hp感染引起CDH1表达水平升高,可能是Hp引起胃癌的原因之一。 展开更多
关键词 E-钙黏蛋白 幽门螺杆菌 TCGA Kaplan-Meier Plotter KEGG 胃癌
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氟中毒对神经细胞损伤及自噬的影响
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作者 王正薇 高霄 +5 位作者 蔡娜 何雯雯 唐智 齐晓岚 官志忠 肖雁 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第5期625-635,共11页
目的探讨氟中毒对小鼠小胶质细胞株BV2和小鼠来源神经母细胞瘤细胞株N2a及小鼠大脑皮质神经细胞损伤及自噬的影响。方法8周龄清洁级雄性C57BL/6J野生型小鼠,随机分为对照组(饮水含氟量<0.5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量10.0 mg/L)和高氟... 目的探讨氟中毒对小鼠小胶质细胞株BV2和小鼠来源神经母细胞瘤细胞株N2a及小鼠大脑皮质神经细胞损伤及自噬的影响。方法8周龄清洁级雄性C57BL/6J野生型小鼠,随机分为对照组(饮水含氟量<0.5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量10.0 mg/L)和高氟组(饮水含氟量50.0 mg/L),每组10只喂养12周;BV2及N2a正常培养后分对照组、低氟组(培养基含氟量1.0 mmol/L)和高氟组(培养基含氟量1.5 mmol/L);采用CCK8检测不同浓度氟处理下BV2和N2a细胞增殖活力变化,氟离子选择电极法检测造模小鼠尿、血、骨氟含量变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测BV2、小鼠大脑皮质中小胶质细胞活化标志物离子钙结合衔接分子1(Iba-1)的表达变化及N2a细胞、BV2细胞和小鼠大脑皮质中自噬相关微管相关蛋白1轻链3(LC3)及自噬受体蛋白P62蛋白(SQSTM1/P62)的表达水平;线粒体动力学及自噬融合分裂相关蛋白线粒体融合蛋白1(Mfn1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、动力相关蛋白1(Drp1)、张力蛋白同源物诱导的假定激酶1(Pink1)及E3泛素连接酶(Parkin)的表达水平。结果CCK8结果显示,1.5 mmol/LNaF处理的BV2、N2a细胞增殖活力明显下降(P<0.001,);低氟组小鼠氟斑牙发生率为60%,高氟组小鼠氟斑牙发生率为80%;与对照组比较,染氟组小鼠尿、血、骨氟含量明显上升(P<0.001);蛋白免疫印迹结果显示,与对照组比较,高氟组的小鼠大脑皮质和BV2的小胶质细胞活化标志物Iba-1表达水平显著升高(P<0.001,P<0.01),高氟组的小鼠大脑皮质和BV2及N2a细胞自噬相关蛋白LC3、Parkin、Pink1表达量显著增加(P<0.05)、P62水平显著下降(P<0.01);线粒体融合蛋白Mfn1、Mfn2水平显著增加(P<0.001),分裂蛋白Drp1无明显变化。结论氟中毒可导致线粒体损伤、破坏线粒体融合分裂平衡并引起细胞自噬,为阐明氟中毒神经系统损伤与细胞自噬之间相互关系提供新思路。 展开更多
关键词 氟中毒 细胞自噬 线粒体分裂融合 线粒体自噬 小胶质细胞 小鼠
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慢性氟中毒大鼠脑组织GFAP、β-tubulin Ⅲ和synaptophsin表达水平及硫酸软骨素干预作用 被引量:4
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作者 王纯 梁璐璐 +6 位作者 叶凌 何琪 钟毅 王胜远 何冬玲 官志忠 刘艳洁 《中华地方病学杂志》 CAS 北大核心 2021年第10期781-789,共9页
目的观察慢性氟中毒大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)和突触素(synaptophsin)表达水平,探索三复合体突触在慢性氟中毒大鼠中枢神经系统(CNS)损伤机制中的作用,以及硫酸软骨素(CS)的神经保护作用。方法选... 目的观察慢性氟中毒大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)和突触素(synaptophsin)表达水平,探索三复合体突触在慢性氟中毒大鼠中枢神经系统(CNS)损伤机制中的作用,以及硫酸软骨素(CS)的神经保护作用。方法选择1月龄清洁级SD大鼠雌雄各48只,按体重(90~120 g)采用随机数字表法分为8组,每组12只,雌雄各半。采用含有不同浓度氟化钠(NaF)的自来水[<0.5 mg/L(对照,CN),10.0 mg/L(低剂量染氟,LF),50.0 mg/L(高剂量染氟,HF)]喂养,其中部分大鼠直接喂养185 d(CN、LF、HF组),其余大鼠于喂养180 d后连续5 d腹腔注射生理盐水(NS)或染氟大鼠腹腔注射0.66 mg/kg CS,分别为CN+NS、LF+NS、HF+NS组和LF+CS、HF+CS组。实验结束后采用苏木素-伊红染色于光镜下观察各组大鼠脑组织海马CA4区病理改变,免疫组织化学法检测海马CA4区GFAP、β-tubulinⅢ和synaptophsin的表达及分布,蛋白免疫印迹法检测海马GFAP、β-tubulinⅢ和synaptophsin蛋白表达水平。结果光镜下LF、HF、LF+NS、HF+NS组雌、雄性大鼠海马CA4区均可见神经元嗜酸性变、丢失和排列层次不整齐,LF+CS、HF+CS组较CN组形态学未见明显改变,而较LF、HF、LF+NS、HF+NS组有明显改善。免疫组织化学法检测结果显示,LF、HF组雌、雄性大鼠GFAP、β-tubulinⅢ、synaptophsin阳性面积率均低于CN组(P均<0.05);而LF+CS、HF+CS组分别高于LF、HF组(P均<0.05)。蛋白免疫印迹法检测结果显示,LF、HF组雌、雄性大鼠GFAP、β-tubulinⅢ、synaptophsin蛋白表达水平(LF组:0.90±0.09、0.82±0.08,1.43±0.14、0.92±0.02,1.21±0.15、0.87±0.02,HF组:0.58±0.14、0.73±0.03,0.63±0.06、0.67±0.03,0.87±0.04、0.70±0.05)均低于CN组(1.24±0.08、1.09±0.10,2.64±0.30、1.54±0.09,1.72±0.10、1.13±0.06,P均<0.05)。结论慢性氟中毒引起的CNS损伤可能与三复合体突触以及细胞外基质有关,CS可能在一定程度上降低损伤。 展开更多
关键词 氟化物中毒 三复合体突触 细胞外基质 硫酸软骨素 性别差异
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活性氧ROS在幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞NLRP3炎症小体激活中的作用 被引量:4
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作者 谢渊 刘正美 +3 位作者 周建奖 赵艳 鲍利雅 王琴容 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第4期379-383,共5页
目的探讨细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)诱导胃上皮细胞NLRP3炎症小体激活中的作用。方法培养Hp国际标准株NCTC11639和胃黏膜上皮细胞株GES-1。用Hp感染细胞GES-1 6 h,采用活性氧检测... 目的探讨细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)诱导胃上皮细胞NLRP3炎症小体激活中的作用。方法培养Hp国际标准株NCTC11639和胃黏膜上皮细胞株GES-1。用Hp感染细胞GES-1 6 h,采用活性氧检测试剂盒检测细胞内ROS;用25 mmol/L的活性氧ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine, NAC)预处理GES-1细胞30 min,再按照MOI为100∶1、200∶1加入Hp与细胞共孵育6 h和12 h,通过Western blot检测细胞内NLRP3、caspase-1 p10、ASC蛋白水平,采用ELISA检测上清液中IL-1β含量;实验设未感染对照组。结果与未感染组比较,Hp感染组细胞内ROS生成增多;无论是感染6 h还是感染12 h, NLRP3、caspase-1及ASC蛋白的表达及细胞培养上清液中IL-1β的浓度均随着感染复数的增加而增加(均P<0.05);NAC预处理后再用Hp感染,细胞NLRP3、caspase-1、ASC蛋白表达降低,IL-1β的浓度也降低(均P<0.05);Hp感染6 h和12 h结果一致。结论 ROS途径可能参与Hp对GES-1细胞NLRP3炎症小体的激活。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 NLRP3炎症小体 活性氧
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ITGAM基因在急性髓细胞白血病中的表达及临床意义 被引量:4
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作者 张太海 金皎 +9 位作者 黄璟 李鹏 吴西军 吴昌学 马健娟 庹媛媛 李燕 杨红兰 潘海新 杨小燕 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第7期786-791,838,共7页
目的:探讨整合素αM(ITGAM)基因在急性髓细胞白血病(AML)中的表达及临床意义。方法:利用CELL数据库获取临床常见血液肿瘤性疾病数据,并分析ITGAM在不同血液肿瘤中的表达情况;利用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)数据库获得AML组173例和... 目的:探讨整合素αM(ITGAM)基因在急性髓细胞白血病(AML)中的表达及临床意义。方法:利用CELL数据库获取临床常见血液肿瘤性疾病数据,并分析ITGAM在不同血液肿瘤中的表达情况;利用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)数据库获得AML组173例和健康对照组70例的资料,比较2组对象间ITGAM mRNA表达的差异,同时将AML组分为高表达组(高于均值)53例和低表达组(低于均值)53例、分析AML患者ITGAM表达量与其总体生存率(OS)的相关性;利用UALCAN数据库获得AML患者样本171例,分析ITGAM在M0~M7中的表达情况;利用Bloodspot数据库获得AML患者样本172例,分析ITGAM在不同基因突变或染色体异常患者中的表达,同时将AML患者分为ITGAM mRNA高表达组(高于中位数)86例和低表达组(低于中位数)86例进行生存分析。结果:与健康对照组相比,ITGAM在AML患者中表达增高(P<0.05);ITGAM在不同亚型AML中表达水平存在差异,M5中表达最高、M3中表达最低;其中,M4、M5分别与M0比较,M3、M4、M5分别与M1比较,M4、M5分别与M2比较,M4、M5、M7分别与M3比较,ITGAM基因表达差异有统计学意义(P<0.05),ITGAM在AML t(11q23)/MLL中表达最高、在AML t(15;17)中表达最低,2组比较差异有统计学意义(P<0.01);ITGAM在伴有Cepba+_NPM1-_FLT3+突变的AML患者中表达较低,在Cepba-_NPM1-_FLT3-和Cepba-_NPM1+_FLT3-AML患者中表达最高;Kaplan-Meier分析结果表明,ITGAM基因表达与AML患者生存有相关性,高表达ITGAM的AML患者预后差(P=0.024,P=0.008)。结论:ITGAM基因在AML患者样本中呈高表达,且ITGAM高表达的AML患者OS差,该基因对预测AML患者预后有一定的临床应用价值。 展开更多
关键词 白血病 髓样 急性 基因表达 ITGAM基因 总体生存率 临床意义
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贵州壮族人群25个Y-STR基因座遗传多态性 被引量:4
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作者 国学红 何燕 +3 位作者 张秀秀 张婷 王婵娟 官志忠 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期120-127,共8页
调查贵州黔东南苗族侗族自治州从江县壮族无关男性个体的25个Y-STR基因座的遗传多态性,并探讨与其他12民族群体的遗传关系。采用Y27plex荧光检测试剂盒复合扩增67例样本,采用3130XL遗传分析仪进行毛细管电泳检测,使用Arlequin 3.5、Mega... 调查贵州黔东南苗族侗族自治州从江县壮族无关男性个体的25个Y-STR基因座的遗传多态性,并探讨与其他12民族群体的遗传关系。采用Y27plex荧光检测试剂盒复合扩增67例样本,采用3130XL遗传分析仪进行毛细管电泳检测,使用Arlequin 3.5、Mega 7.0、SPSS19.0等一系列遗传学软件对基因分型结果进行统计。除2个双拷贝基因座DYS385ab、DYS387S1分别检出8、10个等位基因外,其余23个单拷贝基因座共检出86种等位基因,等位基因个数为2~7不等,等位基因频率为(0.014 9~0.970 1),基因多样性GD值为0.058 8(DYS456)~0.823 6(DYS387S1),25个Y-STR基因座组成的单倍型共检出36种,其中66.7%为唯一单倍型,单倍型多样性HD值为0.957 9。Rst遗传距离矩阵显示:贵州壮族人群父系遗传结构与文献中的福建畲族、内蒙古的蒙古族、山西汉族人群较为相似,与广西壮族、云南哈尼族、新疆维吾尔族、辽宁满族、吉林朝鲜族、萨尔茨堡人群差异明显。而与新疆哈萨克族、安多藏族、西非人群差异显著。25个Y-STR基因座在贵州壮族人群中具有良好的遗传多态性,可应用于父系亲权关系鉴定。 展开更多
关键词 Y染色体短串联重复序列 单倍型 遗传多态性 壮族
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过表达CagA对胃癌细胞中GLUT1表达的影响 被引量:4
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作者 程薇 杨丽萍 +5 位作者 周建奖 谢渊 全欣莹 陈定宇 王琴容 赵艳 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第4期381-386,共6页
目的探究幽门螺杆菌(H.pylori)的细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)过表达对胃癌细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达的影响。方法用过表达cagA腺病毒感染人胃癌细胞株AGS和人原代胃癌细胞,免疫荧光检测GLUT1的表达;用过表达glut1慢病毒及其空载... 目的探究幽门螺杆菌(H.pylori)的细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)过表达对胃癌细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达的影响。方法用过表达cagA腺病毒感染人胃癌细胞株AGS和人原代胃癌细胞,免疫荧光检测GLUT1的表达;用过表达glut1慢病毒及其空载体慢病毒感染胃癌细胞株AGS和BGC-823、0.002 mg/L嘌呤霉素筛选,用Western blot、免疫荧光验证稳转细胞株;最后用过表达cagA腺病毒感染过表达GLUT1的稳转细胞株,免疫荧光检测GLUT1与CagA的细胞定位。结果成功建立过表达glut1的稳转细胞株AGS/glut1和BGC-823/glut1,免疫荧光结果显示CagA和GLUT1蛋白主要在细胞膜上表达,且过表达CagA能引起细胞膜上GLUT1蛋白达降低并出现碎片化,且CagA与Glut1在细胞膜上共定位。结论CagA与GLUT1共定位于细胞膜上,破坏细胞膜,抑制GLUT1蛋白的表达。 展开更多
关键词 胃肿瘤 螺杆菌 幽门 细胞毒素相关基因A蛋白 葡萄糖转运蛋白1
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