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用于活体成像的小鼠肝癌移植瘤模型的建立 被引量：6
1
作者 陈惠 李坤雨 +3 位作者 陈斐 严惠明 韩泽广 邓庆 《兰州大学学报（医学版）》 CAS 2012年第1期10-15,共6页
目的建立可用于活体成像的小鼠肝癌移植瘤模型。方法利用脂质体将荧光素酶表达载体pGL3(LUC/NEO)转染至人肝癌细胞株SMMC-7721、Huh-7、Hep3B、MHCC-97H、HCC-LM6、PLC/PRF/5中,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆。根据体外生... 目的建立可用于活体成像的小鼠肝癌移植瘤模型。方法利用脂质体将荧光素酶表达载体pGL3(LUC/NEO)转染至人肝癌细胞株SMMC-7721、Huh-7、Hep3B、MHCC-97H、HCC-LM6、PLC/PRF/5中,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆。根据体外生物发光情况及细胞的生长特性,从中挑选合适克隆,进行裸鼠皮下接种,建立肝癌移植瘤模型。利用活体成像系统监测肿瘤的生长转移情况,并对肝脏组织进行HE染色分析肿瘤细胞的生长分布特点。结果建立了6株肝癌细胞株的荧光素酶基因稳定表达的亚克隆,并且体外验证了各种细胞株中的荧光素酶活性情况;裸鼠皮下成瘤实验显示了SMMC-7721^(Luc+)、Huh7^(Luc+)、PLC/PRF/5^(Luc+)、MHCC-97H^(Luc+)稳定细胞具有成瘤特性;裸鼠肝脏原位注射肝癌细胞(SMMC-7721^(Luc+)、MHCC-97H^(Luc+)、HCC-LM6^(Luc+)、PLC/PRF/5^(Luc+)),利用活体成像系统能够有效对活体肿瘤生长情况进行监测;裸鼠脾动脉注射肝癌细胞(MHCC-97H^(Luc+)、PLC/PRF/5^(Luc+)),利用活体成像系统能够监测到小鼠肝癌模型的生长状况,之后处死小鼠,对肝脏组织HE染色发现肝癌细胞局部分布于肝脏中。结论本研究成功地构建了可用于活体成像的小鼠肝癌移植瘤模型,模型稳定可靠、直观、灵敏,为肿瘤生长转移机制的研究及抗肿瘤药物的研发提供了重要工具。 展开更多
关键词 荧光素酶 肝癌 移植瘤 活体成像
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RNA干扰沉默编码跨膜蛋白35基因表达对肝癌细胞生长及细胞周期的影响 被引量：1
2
作者 李坤雨 李牛 +3 位作者 王群 张壮壮 韩泽广 邓庆 《兰州大学学报（医学版）》 CAS 2012年第3期17-22,26,共7页
目的研究跨膜蛋白35(T MEM35)基因在肝癌细胞生长、细胞周期中的作用,探讨跨膜蛋白TMEM35作为潜在肝癌治疗靶点的可行性。方法利用跨膜蛋白二级结构预测工具SPLIT对TMEM35蛋白的二级结构进行分析;利用实时定量多聚酶链反应技术检测TMEM3... 目的研究跨膜蛋白35(T MEM35)基因在肝癌细胞生长、细胞周期中的作用,探讨跨膜蛋白TMEM35作为潜在肝癌治疗靶点的可行性。方法利用跨膜蛋白二级结构预测工具SPLIT对TMEM35蛋白的二级结构进行分析;利用实时定量多聚酶链反应技术检测TMEM35基因在肝癌患者癌组织及相应癌旁组织中的表达情况;采用化学合成干扰小RNA片段(siRNA)干扰TMEM35基因在肝癌细胞MHCC-97H、MHCC-97L中的表达,通过软琼脂克隆形成实验观察肝癌细胞非贴壁依赖性克隆生长情况,流式细胞术分析细胞周期;通过蛋白功能相互作用网络数据库STRING推测TMEM35蛋白发挥相应功能的搭档基因。结果 TMEM35为具有4个跨膜结构域的四跨膜蛋白,实时定量多聚酶链反应检测发现TMEM35基因在肝癌中表达紊乱,其中与相应癌旁组织相比较,TMEM35在14例癌组织中表达显著上调,在20例癌组织中表达显著下调(P<0.05)。针对TMEM35基因设计合成siR NAs能够特异性沉默TMEM35基因在肝癌细胞株MHCC-97H、MHCC-97L中的表达,并且肝癌细胞在软琼脂培养条件下,形成的克隆显著减少。流式细胞术分析发现干扰TMEM35基因表达,能够减缓细胞周期进展,表现为细胞G_1期增多,S期减少。结论 TMEM35基因编码具有四跨膜结构域的膜蛋白,在肝癌细胞生长中发挥重要作用。 展开更多
关键词 RNA干扰 四跨膜蛋白 肝癌 细胞周期
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肝细胞性肝癌中E2F8基因受表观遗传学调控的特征
3
作者 李牛 王群 +1 位作者 韩泽广 邓庆 《兰州大学学报（医学版）》 CAS 2011年第4期10-15,19,共7页
目的研究在肝细胞性肝癌中表观遗传性调控E2F8基因表达的特征,包括E2F8基因启动子区域甲基化状态、靶向调控E2F8基因的微小RNA(microRNA)在肝细胞性肝癌中的表达谱。方法分析E2F8基因启动子区域DNA序列的CpG位点分布特征,亚硫酸氢盐修饰... 目的研究在肝细胞性肝癌中表观遗传性调控E2F8基因表达的特征,包括E2F8基因启动子区域甲基化状态、靶向调控E2F8基因的微小RNA(microRNA)在肝细胞性肝癌中的表达谱。方法分析E2F8基因启动子区域DNA序列的CpG位点分布特征,亚硫酸氢盐修饰DNA后,测序检测肝细胞性肝癌患者的癌组织与癌旁组织中E2F8基因转录起始点处DNA甲基化修饰状态的差异;利用3种不同方法预测靶向结合E2F8基因mRNA的3'-非翻译区域(3'-UTR)的microRNAs,结合肝细胞性肝癌microRNAs芯片表达数据,初步推测肝细胞性肝癌中异常表达microRNAs调控E2F8基因表达的可能性。结果在E2F8高表达的肝细胞性肝癌病例中,癌组织中E2F8基因转录起始位点附近的DNA甲基化程度显著低于癌旁组织中(P<0.05);采用3种不同的方法独立预测靶向调控E2F8的microRNAs,其中7个microRNAs在3种方法中的靶基因均为E2F8,12个microRNAs在两种方法中的靶基因为E2F8。分析肝细胞性肝癌microRNAs表达芯片数据,发现与正常肝脏相比,miR-23b、miR-340、miR-448、miR-499-3p、miR-520d-5p在肝细胞性肝癌组织中的表达量显著下调。结论肝细胞性肝癌中的异常表观遗传学事件可引起E2F8基因的表达上调。 展开更多
关键词 表观遗传学 甲基化 微小RNA E2F8 肝细胞性肝癌
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结直肠癌不同发病部位的临床及分子特征差异 被引量：8
4
作者 李聪 王志敏 +3 位作者 赵江 蔡三军 徐烨 刘方奇 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1078-1082,共5页
目的：探讨结直肠癌不同发病部位的临床病理及分子特征的差异。方法对2005—2013年就诊于上海某肿瘤医院4316例结直肠癌患者的临床病理特征和2224例结直肠癌患者分子标记的免疫组化结果进行统计分析。临床病理特征包括年龄、性别、肿瘤... 目的：探讨结直肠癌不同发病部位的临床病理及分子特征的差异。方法对2005—2013年就诊于上海某肿瘤医院4316例结直肠癌患者的临床病理特征和2224例结直肠癌患者分子标记的免疫组化结果进行统计分析。临床病理特征包括年龄、性别、肿瘤分型、组织类型、分化程度、肿瘤病理T分期，免疫组化结果包括人错配修复基因1（hMLH1）、人错配修复基因2（hMSH2）、CD44抗原（CD44）、周期素依赖激酶抑制子1（p21）、肿瘤蛋白p53（p53）、环氧化酶2（COX2）、E－钙黏蛋白（E－cadherin）、人类表皮生长因子受体2（Her2）和细胞增殖核抗原（Ki－67）。结果右半结肠癌与左半结肠癌和直肠癌相比，女性右半结肠癌患病率较高[构成比分别为46．0％（541／1176）；39．2％（424／1083）；41．2％（848／2057），χ2＝11．85，P＜0．01]，黏液腺癌和印戒细胞癌比例更大[构成比分别为12．0％（128／1064），5．8％（56／960），4．0％（75／1859），χ2＝70．93，P＜0．01]，分化更差[构成比分别为32．1％（343／1069），19．5％（201／1033），19．3％（380／1967），χ2＝72．66，P＜0．01]，肿瘤分期更晚[构成比分别为87．9％（992／1129），83．2％（869／1045），72．2％（1486／2057），χ2＝121．44，P＜0．01]。免疫组化结果显示，右半结肠癌患者hMLH1和hMSH2表达阴性率比直肠癌高[13．4％（59／439）比8．5％（88／1035），OR（95％CI）：1．67（1．18～2．37）；4．9％（22／452）比2．4％（26／1083），OR（95％CI）：2．08（1．17～3．71）]，p53表达阳性率较直肠癌高[76．2％（321／421）比68．4％（776／1134），OR（95％CI）：0．68（0．52～0．87）]；而直肠癌患者Her2表达阳性率较右半结肠癌高[19．3％（176／913）比13．2％（45／340），OR（95％CI）：1．57（1．10～2．23）]，Ki－67表达阳性细胞大于等于50％的患� 展开更多
关键词 结肠肿瘤 直肠肿瘤 病理学 分子
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干细胞与免疫调节在心肌梗死治疗中的研究进展 被引量：7
5
作者 虞修简 黄薇 +1 位作者 杨黄恬 王志敏 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第32期2552-2556,共5页
缺血性心脏病引发的心肌梗死和继而发生发展的心力衰竭,是疾病致死的重要病因。干细胞疗法、免疫调节疗法作为心肌梗死防治的新策略展现了应用前景。抗体、干细胞等可作为免疫调节剂调节心梗后的炎症反应,起到保护心脏的作用。细胞疗法... 缺血性心脏病引发的心肌梗死和继而发生发展的心力衰竭,是疾病致死的重要病因。干细胞疗法、免疫调节疗法作为心肌梗死防治的新策略展现了应用前景。抗体、干细胞等可作为免疫调节剂调节心梗后的炎症反应,起到保护心脏的作用。细胞疗法虽然可以调节心梗后免疫反应,但会激发宿主获得性免疫反应,所以细胞疗法的展开一般也需要配合免疫抑制剂使用。本文介绍了免疫调节疗法与细胞疗法的研究进展,针对梗死心肌的修复提出免疫调节与干细胞治疗结合的共同疗法,探讨缺血性心脏病防治的新思路。 展开更多
关键词 心肌梗死 免疫调节疗法 细胞疗法
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癌症相关基因选择性剪接进化数据库的构建 被引量：3
6
作者 徐敏杰 窦同海 +7 位作者 徐佳熹 江建平 刘匆 付茂宾 高原 陈诚文 张亮 周雁 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期649-659,共11页
选择性剪接是真核生物基因调控的基本调节机制之一,与各种类型的生理和病理活动相关.癌症相关基因的不正常剪接可能与多种癌症的发生发展有关.作为选择性剪接进化的主体,选择性剪接外显子展示了其在不同物种中多样的进化功能.本文系统... 选择性剪接是真核生物基因调控的基本调节机制之一,与各种类型的生理和病理活动相关.癌症相关基因的不正常剪接可能与多种癌症的发生发展有关.作为选择性剪接进化的主体,选择性剪接外显子展示了其在不同物种中多样的进化功能.本文系统整理了2 989个癌症相关基因的各项功能,通过比较基因组学的分析方法总结了癌症相关基因的选择性剪接外显子的功能和进化关系,建立了癌症相关基因选择性剪接进化数据库(ASeeDB数据库).ASeeDB包含癌症相关基因外显子区域的进化保守性、结构域预测、Ka/Ks值、以及基因、转录本、外显子区域3个层次的表达量统计等信息,结合这些信息用户可以方便的检索有研究意义的基因或者外显子.外显子区域蛋白质结构域的预测可以帮助了解其可能的功能,而外显子是否存在选择性剪接又可以推及包含该外显子的转录本是否具有相似的功能以及推测剪接是否会对蛋白质功能发生影响.数据库提供的物种间的序列比对可以帮助用户发现没有注释的外显子区域或者是保留的失去功能的外显子.相比于基因层面的Ka/Ks,数据库提供的外显子层面的Ka/Ks对于发现适应性进化事件具有更高的敏感性,可以更加方便地预示基因中未知功能的区域. 展开更多
关键词 癌症 选择性剪接 数据库 外显子
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IGFBP-2、IL-8和CEA联合检测对结直肠癌的诊断价值 被引量：2
7
作者 顾静莉 李文娜 +6 位作者 曹勤 黄融 马嘉骅 顾伟威 张庆华 范竹萍 宋凯 《胃肠病学》 2018年第7期400-404,共5页
背景:结直肠癌的发病率和死亡率居高不下,早期诊断和治疗能提高整体生存率,血清肿瘤标记物的联合检测有望提高筛查效率。目的:探讨血清胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)、白细胞介素8(IL-8)和癌胚抗原(CEA)三种肿瘤标记物联合检测对... 背景:结直肠癌的发病率和死亡率居高不下,早期诊断和治疗能提高整体生存率,血清肿瘤标记物的联合检测有望提高筛查效率。目的:探讨血清胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)、白细胞介素8(IL-8)和癌胚抗原(CEA)三种肿瘤标记物联合检测对结直肠癌的诊断价值。方法:采用固相抗体芯片检测16例结直肠癌患者和16名正常人血清中13种肿瘤标记物的表达。以液相悬浮芯片进一步验证81例结直肠癌患者和14名正常人中高表达的肿瘤标记物。采用ROC曲线评价上述指标单项检测和联合检测对结直肠癌的诊断价值。结果:与正常人相比,结直肠癌患者血清IGFBP-2、IL-8和CEA表达显著升高(P<0.05)。这三项指标联合检测对结直肠癌的诊断敏感性为87.7%,特异性为92.9%,AUC为0.933,均高于单指标检测。结论:IGFBP-2、IL-8、CEA联合检测可提高结直肠癌的诊断效率,可作为临床诊断结直肠癌的辅助方法。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 诊断 肿瘤标记 生物学 胰岛素样生长因子结合蛋白质2 白细胞介素8 癌胚抗原
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间充质干细胞在结核病治疗中的应用与问题 被引量：1
8
作者 吴蓓蓓 黄薇 王志敏 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第2期233-235,共3页
结核病由于其高死亡率和高发病率,是世界最严重的传染病之一。尽管人体具备强大的免疫系统,但结核分枝杆菌还是逃过了宿主的免疫,建立了一种持续感染的状态。由于抗结核药物研制发展缓慢,而结核分枝杆菌又在不断发生变化,结核病的防治... 结核病由于其高死亡率和高发病率,是世界最严重的传染病之一。尽管人体具备强大的免疫系统,但结核分枝杆菌还是逃过了宿主的免疫,建立了一种持续感染的状态。由于抗结核药物研制发展缓慢,而结核分枝杆菌又在不断发生变化,结核病的防治一直都是人类面临的重大难题。近些年,由于间充质干细胞的免疫调节等特性被逐渐发现和证实,人们发现间充质干细胞有望给临床上治疗结核病带来新的希望。作者就间充质干细胞参与结核病治疗中的应用与问题进行了综述。 展开更多
关键词 结核 间质干细胞 免疫调节 治疗应用
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从战争中学习战争
9
作者 赵国屏 钟扬 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1641-1641,共1页
2009年3月，一种新的甲型H1N1流感自北美爆发并很快在全球传播．目前，感染人数已超过17000名，世界卫生组织（WHO）宣布的警备级别也迅速上升到5级，标志着人类与流感持续至少一个世纪的“军备竞赛”又进入了一个新的阶段．
关键词 战争 学习 世界卫生组织 军备竞赛 流感
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