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大鼠附睾管腔液M_r22000蛋白的鉴定研究 被引量：2
1
作者 齐晓伟 常勇杰 于和鸣 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期20-25,共6页
目的:鉴定大鼠附睾管腔液中可能参与精子成熟/精子表面修饰的附睾特异蛋白。方法:通过SDS-PAGE或双向(2D)电泳比较正常大鼠附睾头段和尾段以及实验性精索静脉曲张(ELV)大鼠附睾尾段管腔液中差异蛋白成分。选择主要差异斑点进行质谱分析... 目的:鉴定大鼠附睾管腔液中可能参与精子成熟/精子表面修饰的附睾特异蛋白。方法:通过SDS-PAGE或双向(2D)电泳比较正常大鼠附睾头段和尾段以及实验性精索静脉曲张(ELV)大鼠附睾尾段管腔液中差异蛋白成分。选择主要差异斑点进行质谱分析,并采用免疫印迹对目标蛋白作进一步鉴定确认。结果:发现多个蛋白成分明显增高。对其中之一的相对分子质量(Mr)22000蛋白集中研究。经质谱分析及免疫印迹确认Mr22000蛋白为磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PBP)。结论:附睾管腔液中的PBP存在多种分子形式包括糖基化修饰。ELV导致大鼠附睾尾管腔液中PBP升高。因此,该分子与精子表面修饰的关系仍需进一步研究。 展开更多
关键词 附睾蛋白 实验性精索静脉曲张 双向电泳 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 大鼠
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内源性PS1在活体HEK293和HeLa细胞膜上的定位
2
作者 宁丽峰 王慧萍 +2 位作者 李铁 桑建利 李佳慧 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第12期1400-1405,共6页
目的检测内源性PS1在活体细胞膜上的定位及其表达。方法为防止细胞固定及通透使胞膜被破坏,在未经固定和通透的活体细胞上利用PS1抗体,通过间接免疫荧光法观察了内源性PS1在活细胞膜外表面的定位和表达;利用分子标签技术,构建GFP-PS1融... 目的检测内源性PS1在活体细胞膜上的定位及其表达。方法为防止细胞固定及通透使胞膜被破坏,在未经固定和通透的活体细胞上利用PS1抗体,通过间接免疫荧光法观察了内源性PS1在活细胞膜外表面的定位和表达;利用分子标签技术,构建GFP-PS1融合蛋白,瞬时转染细胞,检测到外源性PS1在细胞核膜的定位及在胞质中的少量分布;同时利用PS1抗体,将细胞固定及通透,用间接免疫荧光技术,检测到内源性PS1在细胞核膜中的定位及在细胞质中的少量不均匀分布。结果内源性PS1在定位于亚细胞结构的膜同时,也定位于细胞外膜。结论成功地在活体细胞外膜上检测到内源性PS1。 展开更多
关键词 早老素1基因 绿色荧光蛋白(GFP) 活体细胞 定位
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