目的探讨重度子痫前期Tim-3+CD56^+CD16^-NK细胞的表达及其对滋养细胞侵袭及血管内皮细胞成管能力的影响。方法分离重度子痫前期患者(sPE组)及正常妊娠孕产妇(Normal组)的胎盘蜕膜组织中单个核细胞,细胞流式检测蜕膜NK细胞(decidual NK ...目的探讨重度子痫前期Tim-3+CD56^+CD16^-NK细胞的表达及其对滋养细胞侵袭及血管内皮细胞成管能力的影响。方法分离重度子痫前期患者(sPE组)及正常妊娠孕产妇(Normal组)的胎盘蜕膜组织中单个核细胞,细胞流式检测蜕膜NK细胞(decidual NK cell,dNK)细胞所占比例;免疫磁珠分选CD56^+CD16^-NK细胞,细胞流式及RT-PCR实验检测Tim-3在其中的表达;将分选出的CD56^+CD16^-NK细胞分为3组:正常对照(Control)组,即来源于正常妊娠胎盘蜕膜组织中的dNK细胞;重度子痫前期(sPE)组,即来源于重度子痫前期胎盘蜕膜组织中的dNK细胞;Tim-3封闭(Tim-3-Fc)组,即加入Tim-3-Fc融合蛋白进行处理的正常妊娠胎盘蜕膜组织中的dNK细胞。采用ELISA、Transwell侵袭及小管形成实验分别检测上述3组细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-8、VEGF及IFN-γ的表达及其对HTR8侵袭能力及血管内皮细胞成管能力的影响。结果与Control组相比,sPE组中CD56^+CD16^-NK细胞占蜕膜组织单个核细胞比例显著减少(P<0.05);免疫磁珠可分选出纯度达90%以上CD56^+CD16^-NK细胞,且sPE组中Tim-3的表达丰度及Tim-3 mRNA表达水平均较Control组显著降低(P<0.05);ELISA结果显示与Control组相比,sPE组与Tim-3-Fc组dNK细胞上清液中TNF-α、IFN-γ表达均显著增加(P<0.05),而IL-6、IL-8、VEGF表达均明显降低(P<0.05);Transwell侵袭实验及成管实验结果表明,sPE组与Tim-3-Fc组HTR8细胞侵袭能力及HUVEC成管能力较Control组显著降低(P<0.05),但Tim-3-Fc组HTR8细胞侵袭能力及HUVEC成管能力较sPE组明显增强(P<0.05)。结论重度子痫前期患者Tim-3+CD56^+CD16^-NK的表达显著降低,其可能通过损害蜕膜NK细胞的分泌功能来抑制滋养细胞的侵袭及血管内皮细胞的成管能力,从而促进子痫前期的发展。展开更多
文摘目的探讨重度子痫前期Tim-3+CD56^+CD16^-NK细胞的表达及其对滋养细胞侵袭及血管内皮细胞成管能力的影响。方法分离重度子痫前期患者(sPE组)及正常妊娠孕产妇(Normal组)的胎盘蜕膜组织中单个核细胞,细胞流式检测蜕膜NK细胞(decidual NK cell,dNK)细胞所占比例;免疫磁珠分选CD56^+CD16^-NK细胞,细胞流式及RT-PCR实验检测Tim-3在其中的表达;将分选出的CD56^+CD16^-NK细胞分为3组:正常对照(Control)组,即来源于正常妊娠胎盘蜕膜组织中的dNK细胞;重度子痫前期(sPE)组,即来源于重度子痫前期胎盘蜕膜组织中的dNK细胞;Tim-3封闭(Tim-3-Fc)组,即加入Tim-3-Fc融合蛋白进行处理的正常妊娠胎盘蜕膜组织中的dNK细胞。采用ELISA、Transwell侵袭及小管形成实验分别检测上述3组细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-8、VEGF及IFN-γ的表达及其对HTR8侵袭能力及血管内皮细胞成管能力的影响。结果与Control组相比,sPE组中CD56^+CD16^-NK细胞占蜕膜组织单个核细胞比例显著减少(P<0.05);免疫磁珠可分选出纯度达90%以上CD56^+CD16^-NK细胞,且sPE组中Tim-3的表达丰度及Tim-3 mRNA表达水平均较Control组显著降低(P<0.05);ELISA结果显示与Control组相比,sPE组与Tim-3-Fc组dNK细胞上清液中TNF-α、IFN-γ表达均显著增加(P<0.05),而IL-6、IL-8、VEGF表达均明显降低(P<0.05);Transwell侵袭实验及成管实验结果表明,sPE组与Tim-3-Fc组HTR8细胞侵袭能力及HUVEC成管能力较Control组显著降低(P<0.05),但Tim-3-Fc组HTR8细胞侵袭能力及HUVEC成管能力较sPE组明显增强(P<0.05)。结论重度子痫前期患者Tim-3+CD56^+CD16^-NK的表达显著降低,其可能通过损害蜕膜NK细胞的分泌功能来抑制滋养细胞的侵袭及血管内皮细胞的成管能力,从而促进子痫前期的发展。
