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miR-124-3p靶向Beclin 1介导的自噬增强胃肠道间质瘤细胞对伊马替尼的敏感性
1
作者 胡珊珊 赵海明 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第4期337-345,共9页
目的旨在探讨微小RNA miR-124-3p与胃肠道间质瘤(GIST)细胞对伊马替尼(IM)敏感性的关系,并初步探讨可能的潜在机制。方法根据相应处理方式对GIST细胞进行分组:IM+GIST-T1组、IM+GIST-882组、miR-NC组、miR-124-3p mimic组、miR-124-3p i... 目的旨在探讨微小RNA miR-124-3p与胃肠道间质瘤(GIST)细胞对伊马替尼(IM)敏感性的关系,并初步探讨可能的潜在机制。方法根据相应处理方式对GIST细胞进行分组:IM+GIST-T1组、IM+GIST-882组、miR-NC组、miR-124-3p mimic组、miR-124-3p inhibitor组、NC组、IM+miR-NC组、IM+miR-124-3p mimic组、IM+miR-124-3p inhibitor组、IM+miR-124-3p mimic+RAPA组、oe-NC组、oe-BECN1组、oe-BECN1+miR-124-3p mimic组。采用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-124-3p和Beclin-1(BECN1)mRNA的表达。采用细胞计数试剂盒-8测定法和EdU荧光染色法检测细胞活力和增殖。采用流式细胞术检测细胞凋亡。采用蛋白免疫印迹检测蛋白表达。采用免疫荧光染色检测自噬体形成。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-124-3p和BECN1的关系。采用皮下接种法构建GIST-T1细胞移植瘤裸鼠动物模型。结果qRT-PCR显示,与miR-NC组(0.023±0.002)相比,miR-124-3p mimic组(0.351±0.014)细胞中miR-124-3p表达显著升高(P<0.01),而miR-124-3p inhibitor(0.011±0.002)中miR-124-3p表达显著降低(P<0.01)。流式细胞术显示,转染miR-124-3p mimic可显著促进经IM处理的GIST-T1细胞的凋亡(P<0.01),而转染miR-124-3 inhibitor则会抑制细胞的凋亡(P=0.004)。CCK-8结果显示,RAPA处理能够在一定程度上逆转miR-124-3p对IM敏感性的增强作用。蛋白免疫印迹分析显示,与NC组相比,IM+miR-NC组细胞中BECN1蛋白表达和LC3II/LC3I比值显著增加,而p62蛋白表达显著降低(P<0.01)。与IM+miR-NC组相比,IM+miR-124-3p mimic组细胞中BECN1蛋白表达和LC3II/LC3I比值明显降低,而p62蛋白表达明显增加(P<0.01)。与IM+miR-124-3p mimic组相比,IM+miR-124-3p mimic+RAPA组BECN1蛋白表达和LC3II/LC3I比值显著增加,而p62蛋白表达显著降低(P<0.01)。流式细胞术结果显示,与NC组相比,IM+miR-NC组细胞凋亡率明显增加(P<0.01);与IM+miR-NC组相比,IM+miR-124-3p mimic组(细胞凋亡明显增加(P<0.01);与IM+ 展开更多
关键词 胃肠道间质瘤 伊马替尼 微小RNA 自噬
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LncRNA GNAS-AS1通过调节miR-449a/Notch1轴参与胃癌细胞的增殖和迁移
2
作者 徐俐 胡珊珊 赵海明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期483-489,共7页
目的探究长链非编码RNA(LncRNA)GNAS反义RNA1(GNAS-AS1)通过调节miR-449a/缺刻基因1(Notch1)轴对胃癌(GC)细胞增殖和迁移的影响。方法收集四川省人民医院2013年9月至2017年9月30例确诊为GC的患者肿瘤组织与癌旁组织标本;将GC细胞AGS随... 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)GNAS反义RNA1(GNAS-AS1)通过调节miR-449a/缺刻基因1(Notch1)轴对胃癌(GC)细胞增殖和迁移的影响。方法收集四川省人民医院2013年9月至2017年9月30例确诊为GC的患者肿瘤组织与癌旁组织标本;将GC细胞AGS随机分为对照组(Control组)、si-NC组、si-GNAS-AS1组、si-GNAS-AS1+inhibitor NC组、si-GNAS-AS1+miR-449a inhibitor组。实时荧光定量PCR检测GNAS-AS1、miR-449a和Notch1 mRNA的表达;MTT实验、平板克隆形成实验检测增殖;wound healing实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭。Western Blot检测Notch1、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-449a和GNAS-AS1、Notch1的关系。结果与癌旁组织相比,肿瘤组织中GNAS-AS1、Notch1 mRNA表达升高,miR-449a表达降低(P<0.05)。与Control组、si-NC组相比,si-GNAS-AS1组AGS细胞GNAS-AS1表达、OD_(490)值、克隆形成数、划痕愈合率、细胞侵袭数目、Notch1、Vimentin、N-cadherin蛋白表达表达降低,miR-449a表达、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。与si-GNASAS1组、si-GNAS-AS1+inhibitor NC组相比,si-GNAS-AS1+miR-449a inhibitor组OD_(490)值、划痕愈合率、细胞侵袭数目、Notch1、Vimentin、N-cadherin表达升高(P<0.05),miR-449a表达、E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。GNAS-AS1靶向负调控miR-449a表达,miR-449a靶向负调控Notch1表达。结论沉默GNAS-AS1可能通过上调miR-449a来抑制Notch1蛋白的表达,从而抑制GC细胞增殖、迁移、侵袭过程。 展开更多
关键词 长链非编码RNA GNAS反义RNA1 miR-449a 缺刻基因1 胃癌 迁移 增殖
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250例蓝色橡皮泡痣综合征临床特征分析 被引量：2
3
作者 潘燕 李良平 李汉华 《四川医学》 CAS 2019年第11期1134-1137,共4页
目的总结现有蓝色橡皮疱痣综合征病例的临床资料,提高临床医生对本病的认识。方法检索pubmed上所有蓝色橡皮疱痣综合征病例(1961年至2018年7月),进行回顾分析。结果共得到221篇文献,含250例患者。皮肤病变见于94.8%的患者,消化道血管瘤... 目的总结现有蓝色橡皮疱痣综合征病例的临床资料,提高临床医生对本病的认识。方法检索pubmed上所有蓝色橡皮疱痣综合征病例(1961年至2018年7月),进行回顾分析。结果共得到221篇文献,含250例患者。皮肤病变见于94.8%的患者,消化道血管瘤见于77.2%的患者。69.2%的患者有消化道出血,11.4%的患者发生肠梗阻或肠套叠。45.1%的患者行皮肤病变的治疗,术后复发率为85.2%。29.7%的患者因消化道血管瘤行外科手术,并发症发生率及术后复发率分别为10.8%和28.4%。另有26.5%的患者行内镜治疗,其并发症发生率和术后复发率分别为7.6%和21.2%。抗血管生成药物除西罗莫司外,绝大多数不能有效的控制症状。5例(2.0%)患者因疾病并发症死亡,部分患者生活质量收到严重影响。结论蓝色橡皮疱痣综合征目前的治疗效果不尽如人意,值得关注和研究。 展开更多
关键词 血管瘤 蓝色橡皮疱痣综合征 消化道出血 血管畸形
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蓝色橡皮泡痣综合征一例报道并文献复习 被引量：1
4
作者 潘燕 李良平 李汉华 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2019年第33期4147-4149,共3页
蓝色橡皮泡痣综合征是一种以皮肤及消化道等内脏器官多发血管畸形或血管瘤为特征的罕见疾病,迄今为止文献报道仅200余篇.由于其发病率低,临床医生认识不足,极易误诊或漏诊.为此,本文报道了四川省人民医院收治的一例男性蓝色橡皮泡痣综... 蓝色橡皮泡痣综合征是一种以皮肤及消化道等内脏器官多发血管畸形或血管瘤为特征的罕见疾病,迄今为止文献报道仅200余篇.由于其发病率低,临床医生认识不足,极易误诊或漏诊.为此,本文报道了四川省人民医院收治的一例男性蓝色橡皮泡痣综合征患者,以反复腹痛伴消化道出血为主要表现,经相关辅助检查后最终确诊为蓝色橡皮疱痣综合征,旨在提高临床医生对此病的认识. 展开更多
关键词 血管瘤 蓝色橡皮疱痣综合征 胃肠道 出血 血管畸形
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