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成年大鼠心肌细胞的分离和培养 被引量:12
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作者 李勇刚 石应康 +3 位作者 陈焕文 刘小菁 丁怡 王树人 《华西医学》 CAS 2005年第2期308-309,共2页
目的:建立获得较高比例的活性成年大鼠心肌细胞的分离和培养方法。方法:Langendorff灌流,胶原酶消化分离钙耐受成年大鼠心肌细胞,加血清培养。光镜观察,结合形态学和台盼蓝染色评价心肌细胞。结果:分离的活性心肌细胞比率约70%~80%,杆... 目的:建立获得较高比例的活性成年大鼠心肌细胞的分离和培养方法。方法:Langendorff灌流,胶原酶消化分离钙耐受成年大鼠心肌细胞,加血清培养。光镜观察,结合形态学和台盼蓝染色评价心肌细胞。结果:分离的活性心肌细胞比率约70%~80%,杆状、横纹清晰。加血清贴壁培养的细胞逐渐发生形态学改变。结论:通过本方法可以对成年大鼠心肌细胞进行良好的分离培养。 展开更多
关键词 大鼠 心肌细胞 细胞分离 细胞培养 心肌结构
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如何建立成年大鼠心肌细胞钙超载模型 被引量:2
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作者 陈焕文 石应康 +2 位作者 李勇刚 刘小菁 王树人 《华西医学》 CAS 2006年第2期308-309,共2页
目的:探讨建立成年大鼠心肌细胞钙超载模型的方法。方法:Langendorff灌流,分离钙耐受成年大鼠心肌细胞,采用不同浓度钙离子导入剂-伊屋诺霉素(ionomycin)作用心肌细胞1小时,用荧光分光光度计测定心肌细胞内的游离钙浓度。结果:... 目的:探讨建立成年大鼠心肌细胞钙超载模型的方法。方法:Langendorff灌流,分离钙耐受成年大鼠心肌细胞,采用不同浓度钙离子导入剂-伊屋诺霉素(ionomycin)作用心肌细胞1小时,用荧光分光光度计测定心肌细胞内的游离钙浓度。结果:1.分离的活性心肌细胞比率约70~80%,杆状、横纹清晰。2.实验组1(ionomycin0.5μmol/L)心肌细胞[Ca^2+]1明显高于对照组(282.07±25.19 vs 115±21.21nmol/L,P〈0.05);实验组2(ionomycin 1.0μmol/L)心肌细胞[Ca^2+]1(376.35±29.44)显著高于正常对照组(P〈0.05)。结论:通过本方法可以建立成年大鼠心肌细胞钙超载模型。 展开更多
关键词 大鼠 心肌细胞 钙超载模型
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胰岛素样生长因子2和H19基因印迹的机制及其印迹异常与疾病的关系 被引量:2
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作者 徐海燕 王树人 李丽娟 《遵义医学院学报》 2015年第5期549-554,共6页
胰岛素样生长因子2(IGF2)和H19是连锁交互印迹的基因,二者对细胞的增殖发挥重要的调控作用。IGF2和H19的印迹控制区包括IGF2基因内的差异甲基化区(DMR)和H19上游的DMR,这些DMR甲基化状态改变所导致的IGF2和H19印迹表达紊乱是肿瘤等增殖... 胰岛素样生长因子2(IGF2)和H19是连锁交互印迹的基因,二者对细胞的增殖发挥重要的调控作用。IGF2和H19的印迹控制区包括IGF2基因内的差异甲基化区(DMR)和H19上游的DMR,这些DMR甲基化状态改变所导致的IGF2和H19印迹表达紊乱是肿瘤等增殖性疾病的重要发病机制;另外,绝缘蛋白CCCTC结合分子(CTCF)及类CTCF(BORIS)也参与了IGF2和H19的印迹调控,二者的表达紊乱同样也可造成IGF2和H19的印迹改变及表达紊乱。无论IGF2的印迹丢失还是H19的印迹丢失都参与了肿瘤等增殖性疾病的发生,该机制对这些疾病的影响越来越受到关注。本文总结了近年来的资料,阐述了IGF2和H19印迹的机制,分析了IGF2和H19的印迹状态改变与疾病的关系。 展开更多
关键词 印迹基因 差异甲基化区 印迹丢失 胰岛素样生长因子2 H19
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人乳头状瘤病毒16 E7 DNA在结直肠腺癌组织中的表达 被引量:3
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作者 张建成 丁怡 +2 位作者 周总光 李红光 周斌 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期1024-1026,1044,共4页
结直肠癌与人类乳头状瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)感染有一定的关系,但由于检测方法、标本选择及样本数量不同,各研究结果之间差异很大。为进一步明确结直肠癌变与HPV16感染的关系,采用多聚酶链反应(Polymerase chain reaction,P... 结直肠癌与人类乳头状瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)感染有一定的关系,但由于检测方法、标本选择及样本数量不同,各研究结果之间差异很大。为进一步明确结直肠癌变与HPV16感染的关系,采用多聚酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)对82例原发性结直肠腺癌患者手术切除的新鲜癌及癌旁正常粘膜组织进行了前瞻性对照研究,检测了组织中HPV16E7DNA的表达并进行测序鉴定。结果显示,结直肠腺癌组织HPV16E7的表达阳性率(42/82)明显高于癌旁正常粘膜组织(4/82);直肠癌组织中HPV16E7的表达(64.10%)明显高于升结肠癌(18.18%),即癌灶部位距肛门越近,感染率越高;HPV16阳性率与Dukes分期相关,Dukes分期越晚感染率越高;与癌组织分化程度无相关性。结果提示结直肠癌的发生、发展可能与HPV16感染有关。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 人乳头状瘤病毒 E7癌基因 人乳头状瘤病毒16 腺癌组织 结直肠癌 DNA E7 HPV16感染 DUKES分期 人类乳头状瘤病毒 多聚酶链反应
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