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长链非编码RNA HOTAIR mRNA在卵巢癌中的表达 被引量:18
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作者 崔玲 谢晓砚 +3 位作者 王和 陈新莲 刘珊玲 胡丽娜 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期57-59,共3页
目的探讨长链非编码RNA HOX转录反义RNA(HOTAIR)在卵巢癌组织与正常卵巢组织中的表达差异。方法对44例卵巢癌组织及14例正常卵巢组织样本采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测长链非编码RNA HOTAIR mRNA的表达。结果卵巢癌组织中HOTAIR ... 目的探讨长链非编码RNA HOX转录反义RNA(HOTAIR)在卵巢癌组织与正常卵巢组织中的表达差异。方法对44例卵巢癌组织及14例正常卵巢组织样本采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测长链非编码RNA HOTAIR mRNA的表达。结果卵巢癌组织中HOTAIR mRNA表达高于正常卵巢组织〔(1.26±0.27)vs.(0.14±0.09)〕,差异有统计学意义(P<0.05),病理类型为低度分化及未分化的卵巢癌组织中HOTAIR mRNA表达高于中-低、中-高及高度分化组织〔(1.65±0.41)vs.(0.39±0.14)〕,差异有统计学意义(P<0.05)。结论卵巢癌组织中HOTAIR的表达增高,且癌组织分化越低,HOTAIR表达越高。提示HOTAIR有可能作为发现卵巢癌,并判断其恶性程度的一个分子标志。 展开更多
关键词 长链非编码RNA HOTAIR 卵巢癌 实时荧光定量PCR
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人宫颈癌顺铂耐药细胞系SiHa/cDDP的建立 被引量:6
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作者 陈新莲 王和 +2 位作者 张雪梅 刘洪倩 刘珊玲 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期151-155,共5页
目的建立人宫颈癌SiHa细胞对顺铂(cDDP)的耐药细胞系并分析其生物学特性。方法用化疗药物cDDP与人宫颈癌细胞系SiHa共培养,逐步增加培养液中cDDP浓度以诱导细胞产生耐药性,建立SiHa细胞对cDDP的耐药细胞系。利用MTT法绘制细胞生长曲线,... 目的建立人宫颈癌SiHa细胞对顺铂(cDDP)的耐药细胞系并分析其生物学特性。方法用化疗药物cDDP与人宫颈癌细胞系SiHa共培养,逐步增加培养液中cDDP浓度以诱导细胞产生耐药性,建立SiHa细胞对cDDP的耐药细胞系。利用MTT法绘制细胞生长曲线,计算细胞倍增时间并检测肿瘤细胞耐药指数(RI)。免疫细胞化学法检测细胞P-糖蛋白(P-gp)、胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)蛋白的表达。结果成功建立耐药细胞系SiHa/cDDP(耐cDDP 2μg/mL),倍增时间(45.82±3.69)h,对cDDP的RI为16.131,对多种化疗药物有不同程度交叉耐药。耐药细胞P-gp、GST-π表达较亲代细胞增多(P<0.01),TopoⅡ表达与亲代细胞间差异无统计学意义。结论本研究建立了人宫颈癌顺铂耐药细胞系SiHa/cDDP,为肿瘤细胞体外研究提供了理想的实验模型。 展开更多
关键词 宫颈癌 顺铂 耐药 细胞系
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基于基因芯片技术的人乳头瘤病毒分型检测方法及应用评价 被引量:3
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作者 和晓利 刘洪倩 +3 位作者 何斌 杨沛 王和 刘珊玲 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期641-645,共5页
目的评价基因芯片法人乳头瘤病毒分型检测试剂盒(HPG)的临床应用价值。方法采集慢性宫颈炎或不规则阴道流血女性的宫颈上皮脱落细胞151例,应用HPG检测方法、第二代杂交捕获技术(HC2)检测方法以及DNA直接测序法进行检测,通过对HPG与HC2、... 目的评价基因芯片法人乳头瘤病毒分型检测试剂盒(HPG)的临床应用价值。方法采集慢性宫颈炎或不规则阴道流血女性的宫颈上皮脱落细胞151例,应用HPG检测方法、第二代杂交捕获技术(HC2)检测方法以及DNA直接测序法进行检测,通过对HPG与HC2、DNA直接测序结果的平行对照,对HPG检测方法进行评价。结果 HPG检测方法和HC2检测方法的总一致率为87.42%(kappa=0.75,P<0.05),以DNA直接测序结果为金标准,HPG检测方法对高危险HPV的灵敏度和特异度分别是100%、96.49%,HPG方法和DNA直接测序方法的一致率为98.70%(kappa=0.97,P<0.05)。通过HPG检测结果发现,多重HPV感染率为23.84%,HPV阳性感染率较高的HPV亚型依次为HPV 16(13.25%)、58(11.92%)、52(11.92%)、31(6.62%)、39(5.96%)、33(5.96%)。结论 HPG检测法和HC2检测法以及DNA直接测序法有着良好的一致率,HPG检测法可以实现HPV准确分型检测,适用于临床检测工作的需要。 展开更多
关键词 人乳头状瘤病毒 人乳头瘤病毒分型 第二代杂交捕获技术 DNA直接测序
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小鼠乳腺癌动物模型中调节性T细胞的动态检测及其实验意义 被引量:2
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作者 朱红梅 胡婷 +4 位作者 杨媚 王和 陈新莲 谢晓砚 刘珊玲 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期877-881,共5页
目的分析小鼠乳腺癌实验动物模型中调节性T细胞(Tregs)的变化,并探讨其在肿瘤发生中的意义。方法建立小鼠乳腺癌动物模型。在肿瘤接种后1周、3周和6周3个不同时间点,流式细胞术(FACS)检测CD4+CD25+和CD4+FOXP3+调节性T细胞在脾脏、引流... 目的分析小鼠乳腺癌实验动物模型中调节性T细胞(Tregs)的变化,并探讨其在肿瘤发生中的意义。方法建立小鼠乳腺癌动物模型。在肿瘤接种后1周、3周和6周3个不同时间点,流式细胞术(FACS)检测CD4+CD25+和CD4+FOXP3+调节性T细胞在脾脏、引流淋巴结和肿瘤组织中所占的CD4+T细胞细胞的比例,CD4+T细胞中CD25+FOXP3+双阳的表达情况,肿瘤组织中CD4+T细胞占肿瘤浸润T淋巴细胞(CD3+T)的比例。结果与正常对照组比较,在小鼠乳腺癌动物模型中,脾脏和淋巴结中CD4+T细胞占淋巴细胞的比例在荷瘤1周、3周和6周逐渐下降(P<0.05);脾脏和淋巴结中CD4+CD25+和CD4+FOXP3+在CD4+T细胞中的比例,随荷瘤时间延长而增高(P<0.05);脾脏和淋巴结中CD25+FOXP3+在CD4+T细胞中的表达随荷瘤时间延长也增多(P<0.05)。在肿瘤浸润T淋巴细胞(CD3+T)中,CD4+T细胞和CD4+CD25+调节性T细胞的表达在荷瘤3周均较荷瘤1周时增多(P<0.05);肿瘤组织中CD4+CD25+和CD4+FOXP3+在CD4+T细胞中的比例,在荷瘤1周和荷瘤3周差异无统计学意义(P>0.05)。结论调节性T细胞在恶性肿瘤模型中表达增加,在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。 展开更多
关键词 调节性T细胞 小鼠乳腺癌实验动物模型 淋巴细胞
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纤维连接蛋白对卵巢癌多细胞团簇形成的影响 被引量:2
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作者 谢晓砚 刘珊玲 +4 位作者 王和 林琳 朱红梅 张建军 郑莹 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期240-244,共5页
目的初步探索纤维连接蛋白对卵巢癌多细胞团簇形成的影响及可能参与的整合素受体亚型。方法以卵巢癌细胞系SKOV3为对象,在体外建立多细胞团簇模型,研究纤维连接蛋白对团簇形成的影响,在此基础上再用荧光定量PCR和免疫蛋白印迹从mRNA和... 目的初步探索纤维连接蛋白对卵巢癌多细胞团簇形成的影响及可能参与的整合素受体亚型。方法以卵巢癌细胞系SKOV3为对象,在体外建立多细胞团簇模型,研究纤维连接蛋白对团簇形成的影响,在此基础上再用荧光定量PCR和免疫蛋白印迹从mRNA和蛋白水平上检测因纤维连接蛋白刺激而表达改变的整合素受体亚型。结果纤维连接蛋白能够促进大于250μm的多细胞团簇的形成;纤维连接蛋白刺激形成的多细胞团簇中整合素受体亚型ITGA5的表达受到了抑制。结论本研究证实了纤维连接蛋白能促进卵巢癌多细胞团簇的形成,并初步提示整合素受体亚型ITGA5很可能参与了这一影响过程。 展开更多
关键词 卵巢癌 多细胞团簇 纤维连接蛋白 整合素受体
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原代人绒毛滋养层细胞分离培养及其对巨细胞病毒的易感性研究 被引量:2
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作者 周淑 董丽群 +1 位作者 关林波 于萍 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期344-347,377,共5页
目的通过分离培养原代人绒毛滋养层细胞(HTCs)并检测其对人巨细胞病毒(HCMV)的易感性,探讨胎儿宫内感染HCMV的可能途径。方法将30例健康孕妇经负压真空吸引手术所得的流产早孕绒毛组织充分剪碎,用0.25%胰蛋白酶和0.2%DNA酶混合消化法制... 目的通过分离培养原代人绒毛滋养层细胞(HTCs)并检测其对人巨细胞病毒(HCMV)的易感性,探讨胎儿宫内感染HCMV的可能途径。方法将30例健康孕妇经负压真空吸引手术所得的流产早孕绒毛组织充分剪碎,用0.25%胰蛋白酶和0.2%DNA酶混合消化法制备细胞悬液,细胞悬液经200目不锈钢筛网过滤后用Percoll液密度梯度离心对HTCs进行初步纯化,细胞传代中应用反复胰酶消化法对HTC进行3~5次纯化,通过细胞学形态观察和免疫荧光染色方法对HTCs进行鉴定;用HCMV病毒株体外感染HTCs,应用PCR、Westernblot和免疫荧光方法对HCMV基因及蛋白进行检测,从而确定HTCs对HCMV的易感性。结果 Percoll分离联合胰酶、DNA酶消化法对原代HTCs有较好的分离效果,免疫荧光染色结果表明90%以上细胞表达CK-7相关抗原,HTCs体外感染HCMV 72h后形态学发生明显改变,病毒基因及蛋白均呈阳性表达。结论原代HTCs对HCMV易感,通过HTCs感染胎儿可能是HCMV宫内感染的重要传播途径之一。 展开更多
关键词 人绒毛滋养层细胞 人巨细胞病毒
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