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利用环介导等温扩增技术快速检测沙眼衣原体方法的建立 被引量:5
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作者 李若琳 曹月 +7 位作者 梁宇晨 李梦雪 朱婷 鞠丹 张彪 谢轶 许文明 孙群 《中国测试》 CAS 北大核心 2020年第4期65-69,共5页
建立一种利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测沙眼衣原体的方法。针对沙眼衣原体gyrA基因设计LAMP特异引物,并加入一条环引物LB提高反应效率,对反应的特异性、灵敏度和重复性进行评价,同时用... 建立一种利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测沙眼衣原体的方法。针对沙眼衣原体gyrA基因设计LAMP特异引物,并加入一条环引物LB提高反应效率,对反应的特异性、灵敏度和重复性进行评价,同时用沙眼衣原体阳性的临床样本进行LAMP检测验证。实时荧光LAMP结果表明,建立的LAMP方法特异性好,不与10种常见的病原微生物以及生殖道感染相关细菌发生非特异反应,灵敏度可以达到4.13×101 copies/μL;20次重复试验的Cq值变异系数为7.23%,反应稳定性良好;用LAMP方法对6份临床阳性样本进行检测,阳性符合率为100%。因此,该研究建立的沙眼衣原体LAMP检测方法快速、灵敏、稳定性好,能为感染筛查和早期诊断提供参考。 展开更多
关键词 环介导等温扩增技术 沙眼衣原体 GYRA基因 快速检测
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唾液酸酶对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响
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作者 熊英 张建国 +3 位作者 苏冬梅 莫家明 李思 马芳 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期458-462,467,共6页
目的探讨唾液酸酶与子宫内膜癌细胞Ishikawa浸润、增殖和凋亡的关系。方法培养子宫内膜癌Ishikawa细胞,并分成对照组和处理组,处理组给予唾液酸酶活性抑制剂(DANA)处理,比对两组细胞上清液的唾液酸酶活性后通过免疫荧光检测、流式细胞学... 目的探讨唾液酸酶与子宫内膜癌细胞Ishikawa浸润、增殖和凋亡的关系。方法培养子宫内膜癌Ishikawa细胞,并分成对照组和处理组,处理组给予唾液酸酶活性抑制剂(DANA)处理,比对两组细胞上清液的唾液酸酶活性后通过免疫荧光检测、流式细胞学或MTT实验检测对照组和处理组细胞基质金属蛋白酶(MMPs)表达水平、细胞增殖核抗原(PCNA)水平、凋亡和增殖情况。结果处理组上清液唾液酸酶活性减弱且细胞MMPs的表达降低,处理组的细胞凋亡率明显降低,各组细胞的增殖能力无差异。结论唾液酸酶可影响Ishikawa细胞的侵袭性和凋亡率,但对细胞的增殖能力无明显影响。 展开更多
关键词 唾液酸酶 肿瘤 增殖 凋亡
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miRNA成熟关键基因DROSHA和DICER的多态性与无精症的相关性 被引量:3
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作者 符梅 徐克惠 +1 位作者 叶峻杰 许文明 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期365-368,共4页
目的探讨miRNA成熟关键基因DICER和DROSHA多态性与男性无精症的相关性。方法应用PCR-限制性片段长度多态性技术,检测330例原发性无精症和282名正常生育男性DICER基因rs3742330和DROSHA基因rs10719多态位点的基因型和等位基因频率。结... 目的探讨miRNA成熟关键基因DICER和DROSHA多态性与男性无精症的相关性。方法应用PCR-限制性片段长度多态性技术,检测330例原发性无精症和282名正常生育男性DICER基因rs3742330和DROSHA基因rs10719多态位点的基因型和等位基因频率。结果病例组中DICER基因rs3742330位点A等位基因频率显著高于对照组(72.0%vs.64.4%),差异有统计学意义(P=0.004),病例组DICER基因rs3742330位点AA基因型频率高于对照组(53.0%vs.41.8%,95%CI:1.071-3.124),差异有统计学意义(P=0.027),而DROSHA基因rs10719位点等位基因频率及基因型频率在两组间的差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论DICER基因rs3742330位点多态性与无精症有关联,rs3742330AA基因型可能与无精症的发生存在关联。 展开更多
关键词 DICER基因 DROSHA基因 单核苷酸多态性 无精症
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Dicer调节生殖功能的研究进展 被引量:2
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作者 符梅 徐克惠 许文明 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期612-622,共11页
Dicer是微小非编码RNA生成的关键内切酶,介导微小RNA(micro RNA,mi RNA)和小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)的产生,通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)途径实现转录或转录后水平基因调控,在调节细胞增殖、分化、凋亡等方面起... Dicer是微小非编码RNA生成的关键内切酶,介导微小RNA(micro RNA,mi RNA)和小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)的产生,通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)途径实现转录或转录后水平基因调控,在调节细胞增殖、分化、凋亡等方面起重要作用。近年来Dicer基因在生殖领域的研究越来越受关注,最近的研究表明Dicer与男性生精细胞发育、精子形成及成熟、精子活力和形态生成、卵泡发育、排卵及黄体形成、性激素合成、输卵管功能、子宫内膜容受性等方面都有密切关系。繁衍后代需要精子和卵子的共同参与,Dicer可能通过影响精子和卵子的数量或者质量进而导致胚胎发育异常,因此理解Dicer在雄性与雌性生殖的重要调节作用对于理解生殖调节异常相关的疾病如无精子症、复发性流产等的发病机制具有重要的作用。本文对Dicer在雄性生殖道与雌性生殖中的关键作用进行了综述,旨在进一步从分子层面深入理解Dicer与生殖相关疾病的关系。 展开更多
关键词 MIRNA DICER 精子生成 卵母细胞 胚胎发育 基因多态性
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过表达miR-15b对斑马鱼血管发育的影响 被引量:1
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作者 栗晓亮 杨明 +3 位作者 黄丽 孙华钦 许文明 伍春莲 《中国测试》 CAS 北大核心 2018年第1期60-64,共5页
该研究利用斑马鱼全胚胎原位杂交技术和转基因(VEGFR2:GFP)斑马鱼模式生物,评估miR-15b对斑马鱼早期胚胎发育和后期血管生成的影响。实验结果表明:miR-15b可能是母源性分子,在斑马鱼早期胚胎中高表达,而过表达miR-15b导致斑马鱼血管发... 该研究利用斑马鱼全胚胎原位杂交技术和转基因(VEGFR2:GFP)斑马鱼模式生物,评估miR-15b对斑马鱼早期胚胎发育和后期血管生成的影响。实验结果表明:miR-15b可能是母源性分子,在斑马鱼早期胚胎中高表达,而过表达miR-15b导致斑马鱼血管发育畸形。蛋白免疫印迹和双荧光素酶报告基因检测实验结果显示,miR-15b通过结合VEGFR2 m RNA 3’UTR区降低VEGFR2基因的表达水平,从而调控斑马鱼的血管生成。综上所述,miR-15b在斑马鱼胚胎发育过程中具有重要的作用,特别是对血管系统发育产生影响。该结果可为进一步研究miR-15b在斑马鱼胚胎发育过程的功能提供参考。 展开更多
关键词 胚胎发育 斑马鱼 miR-15b 血管发生 VEGFR2
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先天性氯离子腹泻致病基因Slc26a3在雄性啮齿类动物生殖道中的表达定位 被引量:1
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作者 陈良榉 许文明 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期654-658,共5页
目的通过检测小鼠和大鼠附睾、睾丸、精子中Slc26a3基因的表达模式,探索SLC26A3的表达模式是否与先天性氯离子腹泻(congenital chloride diarrhea,CLD)男性的生育力低下有关。方法应用免疫组织化学技术和Western印迹用于研究S1c26a... 目的通过检测小鼠和大鼠附睾、睾丸、精子中Slc26a3基因的表达模式,探索SLC26A3的表达模式是否与先天性氯离子腹泻(congenital chloride diarrhea,CLD)男性的生育力低下有关。方法应用免疫组织化学技术和Western印迹用于研究S1c26a3在大鼠、小鼠附睾上皮中的表达定位。应用Western印迹检测Slc26a3在大鼠睾丸发育过程中的表达模式,免疫荧光和Western印迹用于研究Sic26a3在小鼠精子上的定位。同时应用Western印迹在CFTR敲除小鼠以及CFTR定点突变小鼠的睾丸和附睾中检测Slc26a3的表达是否有改变。结果Slc26a3的表达强度在小鼠和大鼠附睾的头部、体部、尾部呈逐渐降低的趋势;在大鼠睾丸中随发育过程也呈渐弱的动态模式;Slc26a3在小鼠精子尾部的主段有表达;在CFTR基因敲除小鼠以及CFTR定点突变小鼠的睾丸和附睾中Slc26a3的表达没有显著变化。结论Slc26a3在啮齿类动物雄性生殖系统的表达模式与其功能密切相关,CLD男性患者生育力低下可能与SLC26A3在附睾的酸碱平衡调控中的重要作用有关。 展开更多
关键词 Slc26a3基因 附睾 睾丸 精子 啮齿类动物
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