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题名重组人脑髓鞘碱性蛋白及其抗体的研究
被引量：1
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作者
刘戟
陈建业
王若菡
陈俊杰
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机构
四川大学华西基础医学与法医学院重组dna研究室
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出处
《生物医学工程学杂志》
EI
CAS
CSCD
2003年第1期64-67,共4页
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文摘
将 Eco R1和 Sal I酶切的人脑髓鞘碱性蛋白 ( MBP)基因 c DNA克隆片段与表达载体 p GEX- 5 T重组后转化大肠杆菌 ,经筛选 ,增殖和 IPTG诱导 ,阳性克隆 SDS- PAGE结果证实表达一条特异 42 KDa区带 ,Western印记杂交证实该区带具 MBP抗原特异性 ,免疫斑点杂交和 EL ISA检测表达产量占菌体可溶性蛋白含量 6% ,达414.6m g/ L 菌液。将含可溶性 MBP蛋白的菌液行 SDS- PAGE分离纯化得重组 MBP抗原 ,对新西兰兔进行背部皮下多点注射 ,5次免疫后以琼脂板免疫双扩法检测抗体效价达 1∶ 16,并通过免疫斑点杂交和 Western印迹杂交证实该抗体具抗
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关键词
重组人脑髓鞘碱性蛋白
抗体
MBP
表达载体
大肠杆菌
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Keywords
Myelin basic protein Expression vector E.coli
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分类号
R392
[医药卫生—免疫学]
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题名核酶切割per基因所致的缓解吗啡成瘾作用研究
被引量：2
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作者
何畅
屈艺
尹华虎
王若菡
王正荣
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机构
四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室
四川大学华西基础医与法医学院重组dna研究室
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出处
《华西医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期493-496,共4页
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基金
国家自然科学基金 (批准号 3 0 0 70 2 78)
CMB基金资助
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文摘
目的 探讨 per基因与阿片类成瘾的相关性 ,进而寻找治疗阿片成瘾的基因戒毒疗法。方法 设计并合成特异性 per锤头状核酶基因和 per核酶靶 m RNA组分基因 ,并分别重组入体外转录质粒 ,而后将经体外转录反应得到 per核酶 RNA和地高辛标记的 per核酶靶 m RNA组分。将转录产物混合 ,在不同条件下进行体外切割反应后 ,采用地高辛化学发光法检测 per核酶的体外切割效率。小鼠脑室注射直接导入脂质体包裹的重组质粒 pc DNA3.1- per RZ DNA,按剂量递增法建立吗啡依赖动物模型 ,用纳洛酮催瘾 ,观察戒断反应的变化。结果per核酶对 per核酶靶 m RNA组分的体外切割效率达到 6 0 %。重组质粒组小鼠的刻板跳跃、“湿狗”样抖动和打洞次数与空质粒组、生理盐水组相比明显减少 ,但并不抑制小鼠的体重下降。结论 per核酶具有体外定点切割 per基因 m RNA组分的活性。经小鼠吗啡成瘾模型检测 ,该重组质粒能成功转染活体小鼠脑细胞并在脑组织内稳定表达 per核酶 ,发挥阻断 per基因表达的作用 ,有效地减轻吗啡成瘾的戒断症状。
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关键词
阿片成瘾
核酶体外切割
period基因
吗啡
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Keywords
Opiate dependence Ribozyme cleavage in vitro Morphine period gene
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分类号
R749.61
[医药卫生—神经病学与精神病学]
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