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高糖对血管内皮细胞蛋白激酶Cα和δ表达及功能的影响 被引量:5
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作者 万沁 童南伟 +1 位作者 刘小菁 吴惠 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期505-506,共2页
以高糖培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)研究显示,高糖可诱导血管内皮细胞(EC)功能紊乱,凋亡增加,NO浓度降低,可溶性细胞间黏附分子1水平增加;高糖可诱导HUVECs的蛋白激酶C(PKC)α及PKCδ表达位置转移,PKCδ表达增强,但对PKCα表达影响... 以高糖培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)研究显示,高糖可诱导血管内皮细胞(EC)功能紊乱,凋亡增加,NO浓度降低,可溶性细胞间黏附分子1水平增加;高糖可诱导HUVECs的蛋白激酶C(PKC)α及PKCδ表达位置转移,PKCδ表达增强,但对PKCα表达影响不明显。高糖所致EC功能异常,可能部分是通过PKCα及PKCδ途径来实现的。 展开更多
关键词 高血糖 内皮 血管 蛋白激酶CΑ 蛋白激酶Cδ
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吡格列酮对内皮细胞功能影响及其机制的体外研究 被引量:1
2
作者 童南伟 万沁 +1 位作者 刘小菁 吴惠 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期525-528,共4页
目的了解吡格列酮(PIO)对内皮细胞(EC)功能指标的影响及其可能的作用机理。方法体外原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分别加入5.5mmol/L葡萄糖(对照组)、30mmol/L葡萄糖(高糖组)以及30mmol/L葡萄糖+PIO(10-9mol/L、10-7mol/L、10-5mol... 目的了解吡格列酮(PIO)对内皮细胞(EC)功能指标的影响及其可能的作用机理。方法体外原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分别加入5.5mmol/L葡萄糖(对照组)、30mmol/L葡萄糖(高糖组)以及30mmol/L葡萄糖+PIO(10-9mol/L、10-7mol/L、10-5mol/L)(PIO+高糖组),检测各组内皮细胞一氧化氮(NO)和可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)及细胞凋亡率,用激光共聚焦显微镜及Westernblotting杂交分别观察PKCα、PKCδ的位置变化及蛋白表达。结果高糖可诱导EC凋亡增加,NO浓度降低,sICAM-1水平增加;PIO可抑制高糖诱导的上述变化;PIO可抑制高糖诱导的HUVECs的PKCα由胞浆向胞核转移,并抑制PKCδ在高糖作用下由胞核向胞浆及胞膜转移;PIO可抑制高糖诱导的HUVECsPKCδ表达增强的作用,而高糖作用对HUVECs的PKCα表达影响不明显。结论PIO可纠正高糖诱导的EC功能异常,其保护作用可能部分是通过抑制PKCα及PKCδ的激活来实现。 展开更多
关键词 吡格列酮 内皮细胞功能 蛋白激酶C(PKC) PKCΑ PKCΔ
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肾上腺髓质素与内皮细胞功能
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作者 万沁 童南伟 +1 位作者 刘小菁 吴惠 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期463-466,共4页
目的了解肾上腺髓质素(AM)对内皮细胞(EC)功能指标的影响及其可能的作用机制。方法以培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为靶细胞,对AM进行了以下方面的研究:(1)对高糖诱导的血管EC功能紊乱的影响;(2)用激光共聚焦显微镜及Western印迹分... 目的了解肾上腺髓质素(AM)对内皮细胞(EC)功能指标的影响及其可能的作用机制。方法以培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为靶细胞,对AM进行了以下方面的研究:(1)对高糖诱导的血管EC功能紊乱的影响;(2)用激光共聚焦显微镜及Western印迹分别观察高糖诱导的蛋白激酶C(PKC)α、PKCδ的位置变化及蛋白表达量的影响;实验分组:(1)对照组;(2)高糖组(30mmol/L葡萄糖);(3)AM(10-9、10-8、10-7mol/L)+高糖组;各组均培养48h。结果(1)高糖可诱导EC功能紊乱:EC凋亡增加,一氧化氮(NO)浓度降低,可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)水平增加,AM可抑制高糖诱导的上述变化;(2)AM可抑制高糖诱导的HUVECs的PKCα及PKCδ位置转移;(3)AM可抑制高糖诱导的HUVECs PKCδ表达增强的作用,高糖对HUVEC的PKCα表达影响不明显。结论AM可纠正高糖诱导的EC功能异常,其保护作用可能部分是通过抑制PKCα及PKCδ的激活来实现的。 展开更多
关键词 肾上腺髓质素 内皮细胞 细胞功能 蛋白激酶C 激光共聚焦显微镜
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含十字形结构域蛋白-3对肺癌细胞增殖与迁徙的影响研究 被引量:5
4
作者 田翠杰 邓宏宇 +3 位作者 汤小菊 胡贺芳 刘小菁 罗凤鸣 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期514-518,共5页
为了解含十字形结构域蛋白-3(JMJD3)对肺癌细胞A549增殖与迁徙的影响,通过JMJD3表达质粒转染A549培养48h后,EDU染色及流式细胞术检测细胞增殖与凋亡,划痕实验检测细胞迁徙,RT-PCR检测p21mR-NA表达。结果显示,JMJD3转染后EDU阳性比例明... 为了解含十字形结构域蛋白-3(JMJD3)对肺癌细胞A549增殖与迁徙的影响,通过JMJD3表达质粒转染A549培养48h后,EDU染色及流式细胞术检测细胞增殖与凋亡,划痕实验检测细胞迁徙,RT-PCR检测p21mR-NA表达。结果显示,JMJD3转染后EDU阳性比例明显高于对照(JMJD3:40.75%±2.07%,对照:20.97%±1.5%,P<0.001);G1期细胞比例降低(JMJD3:47.80%±1.85%,对照:54.60%±0.95%,P=0.005)。转染JM-JD3后p21mRNA表达量为35.89%±3.71%,而对照为91.78%±3.74%,两组p21表达变化明显(P<0.001)。转染JMJD3质粒24h和48h后细胞迁徙距离分别为(0.47±0.27)cm和(0.96±0.40)cm,对照为(0.57±0.22)cm和(1.08±0.33)cm,两组无显著性差异(P>0.05)。JMJD3可促进A549细胞增殖,降低G1期细胞比例并下调p21mRNA表达,但对A549迁徙无明显影响。 展开更多
关键词 含十字形结构域蛋白-3 肺癌 细胞增殖 细胞迁徙
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骨髓间充质干细胞在去卵巢大鼠骨质疏松发病机理中潜在的作用 被引量:23
5
作者 李良 李冬菊 +3 位作者 吴江 吴文超 陈槐卿 毛咏秋 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期129-135,共7页
为探讨去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(Bone m arrow m esenchym a l stem ce lls,M SC s)成纤维细胞集落生成单位(CFU-F s)、细胞周期、成骨分化能力和成脂分化能力的变化,选用3月龄和6月龄健康雌性SD大鼠行双侧卵巢切除术,建立... 为探讨去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(Bone m arrow m esenchym a l stem ce lls,M SC s)成纤维细胞集落生成单位(CFU-F s)、细胞周期、成骨分化能力和成脂分化能力的变化,选用3月龄和6月龄健康雌性SD大鼠行双侧卵巢切除术,建立骨质疏松动物模型,动物实验分为4组:(1)3月龄正常组(con tro l-3);(2)3月龄卵巢切除组(OVX-3);(3)6月龄正常组(con tro l-6);(4)6月龄卵巢切除组(OVX-6)。采用密度梯度离心方法分别获取各组M SC s,体外培养,选用第3~4代M SC s用于实验。倒置相差显微镜观察CFU-F s;流式细胞技术检测细胞周期、细胞增殖指数(pro liferation index,P I)和细胞凋亡指数(apoptotic index,A I))。加入成骨诱导剂,采用碱性磷酸酶活性蛋白检测法(IFCC推荐法)检测M SC s碱性磷酸酶(a lka line phosphatase,ALP)分泌量;采用同位素标记方法检测骨钙素(O steoca lc in,OCN)分泌量;茜素红染色观察钙结节形成。加入成脂诱导剂,油红O染色观察M SC s内脂滴形成;RT-PCR方法检测M SC s脂蛋白脂酶(lipoprote in lipase,LPL)mRNA的表达。结果表明:与相应对照组比较,OVX-3组和OVX-6组CFU-F s、P I值明显降低(P<0.05),A I值明显增加(P<0.05);OVX-6组CFU-F s、P I值的降低和A I值的增加都明显大于OVX-3组(P<0.05)。成骨诱导表明:与相应对照组比较,OVX-3组和OVX-6组ALP、BGP分泌量以及钙结节形成的数量均明显降低(P<0.05),OVX-6组的降低最为明显。成脂诱导表明:与相应对照组比较,OVX-3组和OVX-6组,LPL mRNA的表达量明显增加(P<0.05),OVX-6组LPL mRNA的表达量的增加明显高于其他各组(P<0.05)。结论:去卵巢骨质疏松大鼠M SC s增殖能力明显下降,向成骨细胞分化能力下降,向脂肪细胞分化能力增强,其中6OVX组M SC s的变化最明显。提示:去卵巢骨质疏松大鼠M SC s向成骨细胞分化能力的降低和向脂肪细胞分化能力的增强,可能与绝经后骨质疏松症的发生相关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 去卵巢骨质疏松 碱性磷酸酶 骨钙素 脂蛋白脂酶
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流体剪应力对大鼠破骨细胞骨吸收活性的影响 被引量:13
6
作者 刘应芬 李良 +3 位作者 吴江 廖运茂 刘小菁 吴文超 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期544-548,共5页
探讨流体剪应力对大鼠破骨细胞骨吸收活性的影响。我们采用低温离心法获取6月龄健康雌性SD大鼠椎骨骨髓细胞,以1.6×106细胞密度种植于血盖片上,采用1,25-(OH)2维生素D3体外诱导获取破骨细胞。于破骨细胞诱导的第7d取出细胞爬片,置... 探讨流体剪应力对大鼠破骨细胞骨吸收活性的影响。我们采用低温离心法获取6月龄健康雌性SD大鼠椎骨骨髓细胞,以1.6×106细胞密度种植于血盖片上,采用1,25-(OH)2维生素D3体外诱导获取破骨细胞。于破骨细胞诱导的第7d取出细胞爬片,置于流体剪应力装置中,分别加载5.97、11.36、16.08、20.54dyne/cm2大小的流体剪应力,持续30min,以未加载流体剪应力的破骨细胞为对照组。实验结束时,以2.5%戊二醛固定细胞爬片,置于0.25mol/L氢氧化铵液超声处理10min,清除细胞爬片上的破骨细胞,经1%硪酸固定,梯度酒精脱水,醋酸异戊酯置换酒精,CO2临界点干燥,喷金后扫描电镜观察骨吸收陷窝并计数,图像分析法测定骨吸收陷窝的面积;同时分别收集每次灌流液10ml,冻干,用1ml复溶后,紫外分光光度仪检测抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)活性的变化。结果显示:在本实验中所选用的流体剪应力可增强破骨细胞TRAP活性,而骨吸收陷窝的数量和面积也增加,尤其是剪应力在16.08dyne/cm2时,破骨细胞TRAP活性增强以及骨吸收陷窝的数量和面积增高最为明显。结果表明,一定范围内的流体剪应力可以增强破骨细胞的骨吸收活性。 展开更多
关键词 SD大鼠 破骨细胞 流体剪应力 抗酒石酸酸性磷酸酶
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CTGF基因沉默对肺成纤维细胞增殖及表型转化的影响 被引量:13
7
作者 刘小菁 吴文超 陈槐卿 《生物医学工程学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期407-412,共6页
近期研究表明,结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)参与了肺成纤维细胞表型转化,与肺纤维化的形成关系密切。因此,本研究应用siRNA表达载体介导的RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,将CTGF-siRNA表达质粒稳定转... 近期研究表明,结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)参与了肺成纤维细胞表型转化,与肺纤维化的形成关系密切。因此,本研究应用siRNA表达载体介导的RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,将CTGF-siRNA表达质粒稳定转染人肺成纤维细胞MRC-5,并通过定量PCR、Western-blot、细胞生长曲线及群体倍增时间、免疫细胞化学测定等方法检测基因表达、细胞增殖及表型转化等变化。结果显示,与非特异对照Scrambled-siRNA质粒稳定转染的MRC-5细胞或未转染MRC-5细胞相比,CTGF-siRNA表达质粒稳定转染的MRC-5细胞的CTGF表达明显降低;细胞增殖能力明显降低,群体倍增时间延长,由24.63或25.05 h延长至31.14 h(P<0.05);TGFβ1刺激24 h后,细胞内α-平滑肌肌动蛋白-αsmooth muscle actin,-αSMA)、I型胶原及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达均明显下降。本研究提示,通过RNA干扰使CTGF基因沉默后,在体外可明显抑制MRC-5肺成纤维细胞的增殖、表型转化及细胞外基质的合成,可为基因治疗肺纤维化提供实验依据。 展开更多
关键词 结缔组织生长因子 RNA干扰 肺成纤维细胞 表型转化
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成年大鼠心肌细胞的分离和培养 被引量:12
8
作者 李勇刚 石应康 +3 位作者 陈焕文 刘小菁 丁怡 王树人 《华西医学》 CAS 2005年第2期308-309,共2页
目的:建立获得较高比例的活性成年大鼠心肌细胞的分离和培养方法。方法:Langendorff灌流,胶原酶消化分离钙耐受成年大鼠心肌细胞,加血清培养。光镜观察,结合形态学和台盼蓝染色评价心肌细胞。结果:分离的活性心肌细胞比率约70%~80%,杆... 目的:建立获得较高比例的活性成年大鼠心肌细胞的分离和培养方法。方法:Langendorff灌流,胶原酶消化分离钙耐受成年大鼠心肌细胞,加血清培养。光镜观察,结合形态学和台盼蓝染色评价心肌细胞。结果:分离的活性心肌细胞比率约70%~80%,杆状、横纹清晰。加血清贴壁培养的细胞逐渐发生形态学改变。结论:通过本方法可以对成年大鼠心肌细胞进行良好的分离培养。 展开更多
关键词 大鼠 心肌细胞 细胞分离 细胞培养 心肌结构
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力学应变对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化能力的影响 被引量:10
9
作者 井燕 李良 +4 位作者 李毅 陈孟诗 吴文超 陈槐卿 刘小菁 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期542-545,共4页
探讨周期性双轴力学应变对大鼠骨髓间充质干细胞(M esenchym a l stem ce lls,M SC s)增殖和成骨分化能力的影响。选用9月龄健康SD雌性大鼠,分离股骨、胫骨提取骨髓,采用密度梯度离心法分离M SC s。体外培养M SC s传至第3代,以1×10... 探讨周期性双轴力学应变对大鼠骨髓间充质干细胞(M esenchym a l stem ce lls,M SC s)增殖和成骨分化能力的影响。选用9月龄健康SD雌性大鼠,分离股骨、胫骨提取骨髓,采用密度梯度离心法分离M SC s。体外培养M SC s传至第3代,以1×105细胞浓度接种于双轴力学应变系统,选取4 000μstra in,频率为1hz的力学应变对M SC s加载。每天加载3次,每次2 h,间隔2 h。观察力学应变作用后1 d、3 d,M SC s增殖和成骨分化能力的变化,并与相应未加力学应变对照组比较。结果表明:(1)力学应变可增高M SC s的碱性磷酸酶(ALP)和骨桥蛋白(OPN)表达量;力学应变作用3 d后M SC s的ALP和OPN表达量明显高于力学应变作用1 d。I型胶原(COL I)仅在力学应变作用3 d增高;骨钙素(OCN)在各组无明显变化。(2)力学应变可促进M SC s增殖,但力学应变作用1 d和3 d对M SC s增殖的作用无明显差异。上述结果提示:力学应变可以促进M SC s的增殖和成骨分化能力。 展开更多
关键词 力学应变 骨髓间充质干细胞 成骨分化
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冠心病患者血浆内脂素水平的初步研究 被引量:11
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作者 付华 祝烨 +1 位作者 游桂英 刘小菁 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期322-324,共3页
目的比较冠心病患者和正常人血浆中内脂素(visfatin)水平,并评价血浆visfatin水平与冠脉病变程度的相关关系。方法对48例冠心病患者(均接受冠脉造影确诊)及41例健康志愿者抽血测定血浆内脂素水平,并进行比较。同时记录冠心病患者冠脉病... 目的比较冠心病患者和正常人血浆中内脂素(visfatin)水平,并评价血浆visfatin水平与冠脉病变程度的相关关系。方法对48例冠心病患者(均接受冠脉造影确诊)及41例健康志愿者抽血测定血浆内脂素水平,并进行比较。同时记录冠心病患者冠脉病变支数及Gensini冠脉病变积分,与血浆内脂素水平进行相关性分析。结果冠心病组血浆内脂素水平为(28.58±14.53)ng/mL,对照组血浆内脂素水平为(16.01±6.09)ng/mL,冠心病组明显高于对照组,两组比较有统计学差异(P<0.01)。血浆内脂素水平与冠脉病变支数呈正相关(r=0.762,P<0.01);与Gensini冠脉病变积分呈显著正相关(r=0.906,P<0.01)。结论检测血浆内脂素水平有助于冠心病的早期诊断;血浆内脂素水平越高,冠脉病变程度越严重。 展开更多
关键词 冠心病 内脂素 GENSINI评分
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运动疗法在经皮冠状动脉介入治疗后康复的研究进展 被引量:12
11
作者 王谦 刘小菁 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第1期175-178,共4页
经皮冠状动脉介入治疗(PCI)已广泛应用于冠心病的治疗,但PCI术后再狭窄和心肌再缺血的发生是影响其远期疗效的重要原因。有效的康复运动训练可提高PCI术后患者的生活质量,改善缺血心肌的血供,有助于延缓或阻止冠状动脉粥样硬化的发生和... 经皮冠状动脉介入治疗(PCI)已广泛应用于冠心病的治疗,但PCI术后再狭窄和心肌再缺血的发生是影响其远期疗效的重要原因。有效的康复运动训练可提高PCI术后患者的生活质量,改善缺血心肌的血供,有助于延缓或阻止冠状动脉粥样硬化的发生和发展。本文就运动疗法在PCI术后的康复机制、康复评定、康复运动处方及方案进行综述。 展开更多
关键词 运动疗法 经皮冠状动脉介入治疗 心脏康复
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IL-8在兔动脉粥样硬化模型中斑块处的蛋白和基因表达 被引量:7
12
作者 聂永梅 陈槐卿 +2 位作者 成敏 刘小菁 邓伊伶 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期258-264,共7页
白细胞介素- 8(Interleukin- 8,IL- 8)是趋化因子CXC亚家族的一员,对中性粒细胞有趋化作用,可以诱导平滑肌细胞的增殖和迁移,是一个促血管生成因子,在动脉粥样硬化慢性炎症过程中起着重要作用。本文通过建立兔高脂血症动脉粥样硬化斑块... 白细胞介素- 8(Interleukin- 8,IL- 8)是趋化因子CXC亚家族的一员,对中性粒细胞有趋化作用,可以诱导平滑肌细胞的增殖和迁移,是一个促血管生成因子,在动脉粥样硬化慢性炎症过程中起着重要作用。本文通过建立兔高脂血症动脉粥样硬化斑块模型,动态监测了在动脉粥样硬化发展过程中IL- 8的蛋白和基因表达,以了解IL- 8在动脉粥样硬化中的作用。采用免疫组化的方法定位IL- 8在高脂血症兔动脉粥样硬化斑块模型主动脉升弓部血管壁的蛋白表达,8、12周模型组内膜显著增厚并有明显阳性染色,半定量分析AS模型组阳性染色的面积分别是对照组的4 .4 8、8.76倍,平均积分光密度(IOD)值分别是对照组的4 .16、4 .36倍。采用双抗夹心EL ISA法测定兔血管组织匀浆液中的IL- 8蛋白表达量,8、12周AS模型组IL- 8蛋白含量与总蛋白比值和对照组比较均有显著性差异,分别是对照组的1.84、2 .0 6倍。用原位杂交的方法定位IL- 8m RNA的表达,8周模型组血管内膜有强的阳性染色,IL- 8m RNA的表达增加。本研究通过建立动脉粥样硬化模型,动态监测了整个动脉粥样硬化过程中IL-8的蛋白和基因表达。IL- 展开更多
关键词 白细胞介素-8 动脉粥样硬化 免疫组化 ELISA 原位杂交 动脉粥样硬化模型 IL-8MRNA 动脉粥样硬化斑块 蛋白表达 基因表达
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槲皮素对活化大鼠肝星状细胞TGF-β1信号的影响 被引量:7
13
作者 毛咏秋 刘小菁 +1 位作者 姜愚 吴红兵 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期802-805,共4页
目的 了解槲皮素对肝脏星状细胞 (HSCs)通过转化生长因子 (TGF)β1诱导的结缔组织生长因子(CTGF)及纤维连接素 (FN)表达的影响。方法 通过胶原酶与链霉蛋白酶原位灌注、Nycondenz一步法梯度离心分离雄性 Wistar大鼠 HSCs。培养活化的 ... 目的 了解槲皮素对肝脏星状细胞 (HSCs)通过转化生长因子 (TGF)β1诱导的结缔组织生长因子(CTGF)及纤维连接素 (FN)表达的影响。方法 通过胶原酶与链霉蛋白酶原位灌注、Nycondenz一步法梯度离心分离雄性 Wistar大鼠 HSCs。培养活化的 HSCs无血清饥饿后与 10 - 9~ 10 - 5m ol/ L浓度的槲皮素孵育 2 4 ,4 8或 72h。以流式细胞术测定 TGFβ1的表达与分泌。逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)检测 CTGF基因表达 ,免疫组化检测FN表达。结果 流式细胞术检测免疫荧光强度显示 10 - 8~ 10 - 5m ol/ L浓度槲皮素可抑制 HSCs TGFβ1表达 ;10 - 7mol/ L浓度槲皮素孵育 4 8h可显著抑制 HSCs TGFβ1表达 (特异性平均荧光强度分别为 13.33± 2 .4 4和 18.0 8±2 .5 4 ,t=16 .5 2 ,P<0 .0 1)。 TGFβ1可明显促进活化 HSCs CTGF m RNA表达 ,但 10 - 7mol/ L浓度槲皮素在 72 h内几乎可完全拮抗此效应。与对照相比 ,10 - 7mol/ L浓度槲皮素孵育 4 8h可显著抑制 HSCs FN表达。结论 槲皮素可抑制 TGFβ1信号通路 ,包括抑制 TGFβ1、FN表达及 CTGF的基因表达 ,具有潜在的抗肝纤维化治疗作用。 展开更多
关键词 槲皮素 HSC TGFΒ1 表达 FN CTGF 抑制 浓度 孵育 饥饿
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低频脉冲电磁场诱导大鼠骨髓间充质干细胞ACTN2、α-actin和TNNT2表达 被引量:7
14
作者 李凯 姜建 +5 位作者 姚晓林 邱飞远 严中琴 吴文超 刘小菁 李良 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期670-674,710,共6页
目的探讨低频脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)α-辅肌动蛋白-2(ACTN2)、α-肌动蛋白(α-actin)和肌钙蛋白T-2(TNNT2)表达的影响。方法采用差速贴壁分离方法获取rBMSCs,选用第3代rBMSCs用于实验。实验分为4组:①PEMFs... 目的探讨低频脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)α-辅肌动蛋白-2(ACTN2)、α-肌动蛋白(α-actin)和肌钙蛋白T-2(TNNT2)表达的影响。方法采用差速贴壁分离方法获取rBMSCs,选用第3代rBMSCs用于实验。实验分为4组:①PEMFs诱导组,给予50Hz、1mT低频PEMFs刺激,30min/d,分别刺激10d、15d和20d;②5-氮胞苷(5-Aza)诱导组,给予10μmol/L 5-Aza诱导1d,然后采用完全培养液培养10d、15d和20d;③PEMFs+5-Aza诱导组:采用10μmol/L 5-Aza诱导1d后,再给予PEMFs诱导组相同的处理;④对照组,采用完全培养液培养10d、15d和20d。通过倒置相差显微镜逐日连续观察细胞的生长状况和形态特征。采用实时荧光定量PCR方法检测ACTN2和TNNT2的mRNA表达,采用Western blot方法检测ACTN2、α-actin和TNNT2的蛋白表达。结果在各时间点,PEMFs诱导组、5-Aza诱导组和PEMFs+5-Aza诱导组的ACTN2、α-actin和TNNT2mRNA表达与蛋白表达明显高于对照组。结论 PEMFs可促进体外培养的rBMSCs向心肌样细胞分化。 展开更多
关键词 α-辅肌动蛋白-2 Α-肌动蛋白 肌钙蛋白T-2脉冲电磁场
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物理学和生物学指标与急性放射性肺炎发生的相关性研究 被引量:7
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作者 赵艳海 李志平 +6 位作者 陈晓梅 刘小菁 吴文超 徐泳 李平 张金涛 曾辉 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期796-800,共5页
目的研究血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、白介素-6(IL-6)、血栓调解蛋白(TM)水平以及剂量体积因素与急性放射性肺炎(ARP)发生的相关性。方法对27例肺癌、16例食管癌、1例胸腺瘤患者按常规给予三维适形放射治疗(3DCRT)和化疗;其中19例... 目的研究血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、白介素-6(IL-6)、血栓调解蛋白(TM)水平以及剂量体积因素与急性放射性肺炎(ARP)发生的相关性。方法对27例肺癌、16例食管癌、1例胸腺瘤患者按常规给予三维适形放射治疗(3DCRT)和化疗;其中19例采用同步放化疗,25例采用序贯化放疗。放疗前和放疗30Gy时用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清IL-6、TGF-β1、TM水平。依照美国国立肿瘤研究所CTCAEv3.0标准,为ARP评级,评价≥2级定为ARP。并分析TGF-β1、IL-6、TM水平、肺功能指标以及剂量体积因素与ARP发生率的关系。剂量体积因素包括平均肺剂量(MLD)和Vx(指照射总剂量高于xGy的肺体积占全肺总体积的百分数)。结果44例患者中有15例发生了ARP,9例2级,6例3级。ARP发生与未发生组照射30Gy时TGF-β1水平(pg/mL)平均值分别为:(866±270 vs 396±338,P=0.000)。ARP发生率在年龄<60和≥60岁组分别是:46.15%(12/26)和16.67%(3/18)(P=0.042);有、无吸烟史组是:45.45%(15/33)和0%(0/11)(P=0.017);在照射30Gy后TM降低与增高组是:45.16%(14/31)和7.69%(1/13)(P=0.041);在MLD(Gy)<10和≥10组是:16.67%(5/25)和55%(10/19)(P=0.024);在V30<13%和≥13%组是22.22%(6/27)和52.94%(9/17)(P=0.036)。V20<25%与≥25%之间,ARP发生率差异无统计学意义。多因素分析提示MLD(P=0.012)和放疗30Gy时TGF-β1水平(P=0.001)与ARP的发生有相关性。结论TGF-β1以及MLD是有意义的预测ARP的早期指标,第1秒用力呼气量(FEV1)实测/预测值%的大小对ARP的严重程度有一定的预测价值。 展开更多
关键词 急性放射性肺炎 细胞因子 计量体积直方图 预测价值
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Survivin反义核酸对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响 被引量:8
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作者 潘克俭 刘小菁 +2 位作者 杨春蕾 王玉明 王西岩 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期625-629,共5页
Surv iv in是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的一个成员,具有强大的抗细胞凋亡功能,在几乎所有肿瘤组织中特异性表达,而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达。本研究针对Surv iv in mRNA序列设计了反义寡核甘酸,RT-PCR检测表明,该序列反... Surv iv in是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的一个成员,具有强大的抗细胞凋亡功能,在几乎所有肿瘤组织中特异性表达,而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达。本研究针对Surv iv in mRNA序列设计了反义寡核甘酸,RT-PCR检测表明,该序列反义寡核苷酸可明显降低细胞中surv iv in基因的mRNA含量;W estern印迹显示Surv iv in蛋白水平也被降低。M TT比色实验法检测结果说明人Surv iv in反义寡核苷酸抑制SMM C-7721细胞增殖,抑制率为43%,远高于无义寡核苷酸组和空白对照组。反义寡核苷酸还显著增强SMM C-7721细胞对于抗肿瘤药高三尖杉酯碱的敏感性,TUNEL法检测结果显示,在较低高三尖杉酯碱浓度下,反义寡核苷酸转染细胞的凋亡率明显高于其它对照组。本研究结果提示,surv iv in表达的靶向抑制有望应用于肿瘤的辅助治疗之中。 展开更多
关键词 存活素 反义寡核苷酸 SMMC-7721细胞 增殖 凋亡
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慢性心功能不全时经主动脉移植干细胞的可行性研究 被引量:8
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作者 陈茂 范忠才 +4 位作者 刘小菁 张立 饶莉 杨庆 黄德嘉 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期280-282,共3页
心肌梗死或/和慢性心功能不全时,心脏干细胞移植是一项颇有应用前景的新的治疗技术。但是,对于非缺血性心脏病所致的慢性心功能不全,目前所采用的移植路径有一定的局限性。本试验拟研究慢性心功能不全时,封堵主动脉窦上部经主动脉根部... 心肌梗死或/和慢性心功能不全时,心脏干细胞移植是一项颇有应用前景的新的治疗技术。但是,对于非缺血性心脏病所致的慢性心功能不全,目前所采用的移植路径有一定的局限性。本试验拟研究慢性心功能不全时,封堵主动脉窦上部经主动脉根部移植干细胞是否可行。阿霉素所致的慢性心功能不全兔模型,采用双球囊封堵主动脉窦上部经主动脉根部自体移植骨髓单核细胞,4周后评价心功能。在封堵主动脉窦上部经主动脉根部移植干细胞时,无1例因移植手术死亡。双球囊充盈时造影显示,主动脉窦显影良好,大部分情况下,左、右冠状动脉可显影。骨髓单核细胞移植4周后,左室射血分数改善明显(P=0 .0 34)。所以,慢性心功能不全时,封堵主动脉窦上部经主动脉根部移植干细胞安全可行。 展开更多
关键词 慢性心功能不全 干细胞移植 骨髓单核细胞 经主动脉移植干细胞 移植干细胞 主动脉根部 主动脉窦 左室射血分数 右冠状动脉 心肌梗死
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低频脉冲电磁场诱导大鼠骨髓间充质干细胞软骨样细胞分化 被引量:7
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作者 邱飞远 何学令 +4 位作者 姚晓琳 李凯 况薇 吴文超 李良 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期501-507,共7页
骨髓间充质干细胞(BMSCs)是一类具有多向分化潜能的细胞。低频脉冲电磁场(LEPEMFs)治疗可导致哺乳动物细胞水平的生物化学变化,加速组织修复。因此,我们假设LFPEMFs可以促进体外大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)向软骨样细胞分化。实验分为... 骨髓间充质干细胞(BMSCs)是一类具有多向分化潜能的细胞。低频脉冲电磁场(LEPEMFs)治疗可导致哺乳动物细胞水平的生物化学变化,加速组织修复。因此,我们假设LFPEMFs可以促进体外大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)向软骨样细胞分化。实验分为3组:1)LFPEMFs组,rBMSCs暴露于50Hz、1mT低频脉冲电磁场,30min/d;2)成软骨诱导组,采用软骨诱导介质培养rBMSCs;3)对照组,采用完全培养介质培养rBMSCs。通过倒置相差显微镜逐日连续观察rBMSCs的生长状况和形态特征。分别于实验第10、15和20d收集各组rBMSCs标本,采用实时荧光定量PCR方法检测Ⅱ型胶原(ColⅡ)和聚集蛋白聚糖(aggrecan)mRNA表达,采用组织化学与免疫组化方法检测aggrecan和ColⅡ的蛋白表达。结果表明:在各时间点,LFPEMFs组与成软骨诱导组的ColⅡ、ag-grecan mRNA表达和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。本实验提示,LFPEMFs可以促进rBMSCs向软骨样细胞分化。 展开更多
关键词 低频脉冲电磁场 大鼠骨髓间充质干细胞 二型胶原 聚集蛋白聚糖 软骨样细胞分化
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细胞核结构与力学生物学 被引量:5
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作者 李良 陈槐卿 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2009年第1期1-5,共5页
机体所有的组织都受到由细胞自身和细胞外环境所产生的生物机械力(Biome chanical force)的作用。生物机械力既可诱导细胞增殖,亦可诱导细胞死亡。而生理学水平的生物机械力是器官结构与功能发育和维持的必要条件之一,提高或降低生物机... 机体所有的组织都受到由细胞自身和细胞外环境所产生的生物机械力(Biome chanical force)的作用。生物机械力既可诱导细胞增殖,亦可诱导细胞死亡。而生理学水平的生物机械力是器官结构与功能发育和维持的必要条件之一,提高或降低生物机械力则可导致细胞死亡,引发机体一系列病理学变化。在真核细胞中,细胞核含有染色体组,是转录调节场所。细胞核是最大和最硬的细胞器。除了承受通过细胞骨架所传递的来自于细胞外部的生物机械力作用,细胞核内染色质结构的后天性修饰也会改变核的物理性质。在细胞发育、分化、成熟和衰老等基本生命过程中,细胞核的形状和结构组分均会发生变化,从而改变细胞核内基因表达,实现对生物机械力的应答反应。然而,细胞核自身如何感知力学信号并对其发生应答反应,仍不清楚。在这里,我们回顾了当前关于细胞核结构与细胞核力学生物学的相关文献以及它们的研究现状。讨论了细胞核和核结构蛋白的力学研究,诸如,核纤层蛋白(Lamins);细胞内与细胞外的生物机械力对细胞核形状和结构的影响;力诱导的变化如何转变为细胞信号传导和基因转录。但要更深入地了解核细胞核的形状、结构和核材料性质与细胞核力学生物学间的关系,了解生物机械力与基因组相互作用的直接机制,则需要进一步系统地深入地研究。 展开更多
关键词 细胞核 核纤层蛋白 基因调节 力学生物学
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激活素A在心肌缺血后适应中的表达变化及意义 被引量:5
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作者 张令军 黄鹤 +3 位作者 潘平喜 刘小菁 吴文超 付华 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期97-99,共3页
目的观察激活素A在心肌缺血/再灌注损伤过程中的表达变化,分析其与羟自由基(.OH)、乳酸脱氢酶(LDH)之间的相互关系,并探讨缺血后适应对心脏的保护作用是否与激活素A表达变化有关。方法健康SD大鼠随机分为假手术组、缺血组、再灌注组及... 目的观察激活素A在心肌缺血/再灌注损伤过程中的表达变化,分析其与羟自由基(.OH)、乳酸脱氢酶(LDH)之间的相互关系,并探讨缺血后适应对心脏的保护作用是否与激活素A表达变化有关。方法健康SD大鼠随机分为假手术组、缺血组、再灌注组及后适应组,每组10只。假手术组为分离冠状动脉降支(LAD),但不阻断;缺血组为阻断LAD30min;缺血/再灌注组为阻断LAD30min后再灌注1h;后适应组为阻断LAD30min后,接着复流30s/阻断LAD30s,重复3次,再灌注1h。实验完毕处死大鼠,取各组大鼠心肌组织,提取心肌组织蛋白,分别采用ELISA法、Fenton反应及生化比色法检测心肌组织中激活素A蛋白水平、抑制.OH能力及LDH活力。结果与假手术组相比,缺血组、缺血/再灌注组及后适应组心肌组织的激活素A表达水平均明显升高,尤以缺血/再灌注组为最;而与缺血/再灌注组相比,后适应处理可明显下调激活素A的表达水平〔(343.05±25.8)μg/mg蛋白vs(470.61±33.1)μg/mg蛋白,P<0.05〕。心肌组织中激活素A表达水平与抑制.OH能力及LDH水平呈负相关(相关系数分别为r=-0.921,P<0.001;r=-0.915,P<0.001)。结论激活素A参与心肌缺血/再灌注损伤过程,而缺血后适应抑制激活素A的表达可能是其心脏保护作用的机制之一。 展开更多
关键词 激活素A 心肌缺血/再灌注 缺血后适应 羟自由基 乳酸脱氢酶
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