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双重RT-PCR同步检测马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒 被引量：2
1
作者 宁红 张涛 +3 位作者 孟兴 张敏 郭迪金 万佳 《植物检疫》 北大核心 2009年第5期28-30,共3页
根据马铃薯A病毒全基因序列和马铃薯卷叶病毒衣壳蛋白区序列分别设计PVA和PLRV的特异性引物,应用双重RT-PCR同步检测马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒,分别得到300bp和222bp大小的扩增片段。试验从反转录、PCR等方面对双重RT-PCR同步检测2... 根据马铃薯A病毒全基因序列和马铃薯卷叶病毒衣壳蛋白区序列分别设计PVA和PLRV的特异性引物,应用双重RT-PCR同步检测马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒,分别得到300bp和222bp大小的扩增片段。试验从反转录、PCR等方面对双重RT-PCR同步检测2种病毒进行了探索和优化。结果表明反转录反应中dNTPs浓度、2种病毒下游引物浓度比例以及PCR反应中Mg2+浓度对双重RT-PCR同时检测PVA和PLRV有较大的影响。 展开更多
关键词 双重RT-PCR 马铃薯 病毒检测
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猕猴桃溃疡病菌的分子检测技术研究 被引量：13
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作者 邵宝林 刘瑶 +1 位作者 朱天辉 李姝江 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期458-466,共9页
猕猴桃溃疡病是猕猴桃生产上的主要病害,为建立该病的快速诊断技术,本实验通过RAPD分析获得一条1 300 bp左右的致病菌的特异片段,对该片段进行克隆测序,在测序的基础上设计并合成一对特异引物F7/R7,优化特异引物扩增条件,并验证引物的... 猕猴桃溃疡病是猕猴桃生产上的主要病害,为建立该病的快速诊断技术,本实验通过RAPD分析获得一条1 300 bp左右的致病菌的特异片段,对该片段进行克隆测序,在测序的基础上设计并合成一对特异引物F7/R7,优化特异引物扩增条件,并验证引物的特异性和灵敏性。利用该特异引物对包括猕猴桃溃疡病菌在内的14个菌株基因组DNA进行PCR扩增表明,只有猕猴桃溃疡病菌能扩增出1条约为950 bp的特异条带,其他菌株及对照均未扩增出特异条带。对采自果园的染病枝干组织和接种致病菌的枝干组织的检测表明,该特异引物能特异性地检测到猕猴桃溃疡病菌的存在,其在组织中的检测灵敏度为100 fg/μL。因此,利用设计合成的特异引物F7/R7,参考优化的体系和程序,结合简单的试剂盒法提取猕猴桃溃疡病菌或植物组织DNA,可以在短时间内完成对该病原菌的分子检测。 展开更多
关键词 猕猴桃 溃疡病 RAPD 特异引物 丁香假单胞杆菌猕猴桃致病变种
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