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题名猪轮状病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立
被引量：14
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作者
黄小波
徐璐
曹三杰
文心田
曾燕
余慧
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机构
四川农业大学动物传染病与基因芯片实验室四川省动物疫病与人类健康重点实验室
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出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期723-727,共5页
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基金
教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目(IRTO848)
四川省教育厅资助项目(08zb075)
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文摘
用差速离心法纯化的猪轮状病毒(RV)分别免疫仔猪和兔,制备了猪抗RV和兔抗RV超免疫血清,并用层析方法进行了纯化,建立了检测RV的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,该双抗体夹心ELISA的最佳反应条件为:猪抗RV IgG包被浓度为4μg/mL,兔抗RV IgG最佳工作浓度为3.5μg/mL,样品反应时间为90 min,酶标抗体工作浓度为1∶8 000,以D450 nm≥0.161作为阳性判定标准。该ELISA的重复性变异系数小于10%,最低检测限为1.25μg/mL,并与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪大肠杆菌和沙门菌等病原无交叉反应,该ELISA试剂在室温和4℃条件下至少可保存4个月。用该ELISA方法和RV金标检测卡检测70份临床粪便样品,结果显示,ELISA的阳性检出率为22.9%,而金标检测卡的阳性检出率为20.0%。表明,建立的双抗体夹心ELISA方法具有特异性好、灵敏性高和重复性好等优点,可用于RV的快速检测。
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关键词
猪轮状病毒
双抗体夹心酶联免疫吸附试验
检测
建立
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Keywords
porcine rotavirus
double antibody sandwich ELISA
detection
development
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分类号
S852.659.4
[农业科学—基础兽医学]
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