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人内皮抑素抗肿瘤相关肽基因的克隆表达及活性研究 被引量:13
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作者 李丹 刘兴汉 +4 位作者 赵炜明 李冀宏 马洪星 张宇雯 栗亚 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第6期475-479,共5页
目的 克隆并表达人内皮抑素抗肿瘤相关肽,检测其生物活性。方法 人工合成人内皮抑素1—30位氨基酸(30肽,序列25—31由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,几丁质亲和... 目的 克隆并表达人内皮抑素抗肿瘤相关肽,检测其生物活性。方法 人工合成人内皮抑素1—30位氨基酸(30肽,序列25—31由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,几丁质亲和层析树脂一步纯化30肽。通过MTT法、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验、小鼠体内抑瘤实验比较30肽和内皮抑素抗肿瘤活性。结果 MTT证实30肽体外对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、胃癌7901细胞(SGC-7901)半数抑制浓度IC50为36μg/ml、47μg/nl,显著低于内皮抑素IC50179μg/ml、202μg/ml。CAM实验中30肽对血管的抑制作用更强。30肽在小鼠体内抑瘤率47.8%,效果优于内皮抑素28.7%。结论 30肽具有更强抗肿瘤活性,有可能成为治疗肿瘤的一种新药物。 展开更多
关键词 内皮抑素 RGD序列 克隆 基因表达 抗肿瘤活性
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