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TNF-α对人糖皮质激素受体表达的影响 被引量：5
1
作者 赵艳红 周晋 +1 位作者 贾智艳 张华 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2005年第17期1547-1549,共3页
目的:研究TNF-α对人糖皮质激素受体(GR)表达的影响,探讨炎性细胞因子与糖皮质激素抵抗的相关性.方法:分离人外周血单个核细胞(PBMCs),用TNF-α刺激培养后,采用RT-PCR方法分析其与未用TNF-α刺激培养的PBMCs在GRα和GRβmRNA表达方面的... 目的:研究TNF-α对人糖皮质激素受体(GR)表达的影响,探讨炎性细胞因子与糖皮质激素抵抗的相关性.方法:分离人外周血单个核细胞(PBMCs),用TNF-α刺激培养后,采用RT-PCR方法分析其与未用TNF-α刺激培养的PBMCs在GRα和GRβmRNA表达方面的变化.结果:经TNF-α刺激培养24 h的PBMCs,与未加TNF-α刺激培养的PBMCs相比,GRαmRNA表达无显著变化(P>0.05),GRα/GAPDHmRNA分别为1.16±0.73,1.20±0.51,但GRβmRNA表达明显增加(P<0.05),GRβ/GAPDH mRNA分别为1.62±0.59,0.81±0.66.结论:TNF-α可以增加GRβ的表达,这可能是炎性细胞因子诱发糖皮质激素抵抗的内在机制之一. 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-Α 外周血单个核细胞 糖皮质激素受体
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TLR7/8激动剂R848体外诱导记忆B细胞分化抗原特异性浆细胞的方法研究
2
作者 程婕 刘晔 +2 位作者 孙欣 黄晶晶 金艾顺 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期553-561,共9页
目的为了从PBMCs获得病原体特异性浆细胞,我们建立了TLR7/8激动剂R848体外诱导记忆B淋巴细胞分化浆细胞的方法。方法使用TLR7/8激动剂R848联合细胞因子组合,诱导接种乙肝疫苗(3年及以上)的健康志愿者来源的PBMCs,进行体外活化和分化浆... 目的为了从PBMCs获得病原体特异性浆细胞,我们建立了TLR7/8激动剂R848体外诱导记忆B淋巴细胞分化浆细胞的方法。方法使用TLR7/8激动剂R848联合细胞因子组合,诱导接种乙肝疫苗(3年及以上)的健康志愿者来源的PBMCs,进行体外活化和分化浆细胞。分别利用ELISA和ELISPOT检测培养液上清中总IgG、HBsAg特异性IgG以及总抗体分泌细胞(ASCs)和HBsAg抗原特异性ASCs。结果成功建立R848体外诱导PBMCs中记忆B淋巴细胞分化浆细胞的方法。R848(使用质量浓度在1~2.5μg/ml)仅与IL-2联合使用,最早在第5天即可检测到特异性ASCs。结论通过该方法可以从患者恢复期少量(仅需5~10 ml)的外周血中获得抗原特异性抗体分泌细胞用于分析和分选,为中和抗体的制备提供方法。 展开更多
关键词 记忆B细胞 体外活化 外周血单个核细胞 浆细胞
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全人源抗人肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体单克隆抗体蛋白高效表达体系的建立及其功能性分析 被引量：2
3
作者 石佳宁 韩晓健 +2 位作者 吕福莲 毕冬梅 金艾顺 《国际免疫学杂志》 CAS 2015年第5期403-408,共6页
目的建立高效表达全人源抗人肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体（TRAIL）-R1单克隆抗体（TR1-404）蛋白体系，并评价TR1-404抗体蛋白功能特性。方法构建pcDNA3．4载体抗体质粒，转染Expi293F^TM细胞，表达抗体蛋白。收集细胞培养上清，... 目的建立高效表达全人源抗人肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体（TRAIL）-R1单克隆抗体（TR1-404）蛋白体系，并评价TR1-404抗体蛋白功能特性。方法构建pcDNA3．4载体抗体质粒，转染Expi293F^TM细胞，表达抗体蛋白。收集细胞培养上清，使用ProteinA／G纯化抗体蛋白。利用双抗体夹心和间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测抗体蛋白浓度及特异性。流式细胞分析检测TRl_404与Hela细胞和HCT116细胞表面TRAIL-R1的结合能力。MTT法检测在不同时间点TR1-404、TRAIL及二者联合作用对Hela细胞和HCT116细胞生存和增殖的影响。Annexin V／PI双染色检测Hela细胞和HCT116细胞凋亡。结果成功构建pcDNA3．4载体抗体质粒和建立Expi293F^TM细胞蛋白高效表达系统。精制的TR1-404抗体既与重组TRAIL-R1抗原特异性结合，也能与Hela和HCT116细胞表面的TRAIL-R1结合。发现TR1-404联合TRAIL作用于Hela细胞，肿瘤细胞凋亡效果显著提高。而在HCT116细胞中，TRAIL与TR1-404的联合作用未见显著提高。结论成功建立抗体蛋白高效表达系统。TR1-404抗体特异性与TRAIL-R1抗原结合。TR1-404抗体提高TRAIL诱导的Hela细胞凋亡作用。本研究为TRAIL—R1靶向的抗肿瘤治疗研究提供新方法。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体 单克隆抗体 凋亡
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医学免疫学汉英双语教学实践探析 被引量：1
4
作者 李思佳 刘平 +2 位作者 邢文婧 董裕翠 任欢 《基础医学教育》 2015年第2期142-144,共3页
在高校医学免疫学教学中开展汉英双语教学,目的在于提高医学生对专业英语的掌握,扩大专业词汇量,提高医学生查阅英文医学文献能力。在教学过程中,通过精选教材,适时调整中英文授课学时比例,加强师生教学互动,在教学实践中取得了较好效果。
关键词 医学免疫学 双语教学 教学方法
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自外周血记忆B细胞体外活化和分化抗原特异性浆细胞的方法研究 被引量：1
5
作者 毕冬梅 韩晓建 +2 位作者 石佳宁 刘晔 金艾顺 《国际免疫学杂志》 CAS 2015年第4期305-310,共6页
目的建立自人外周血淋巴细胞（PBMCs）中的记忆B细胞活化和分化特异性抗体分泌细胞（如浆细胞）的体外活化方法，为抗体药物研发提供研究基础。方法采集两名接种过乙型肝炎疫苗3年和25年健康成年志愿者（z和L）外周血，分离PBMCs，通过... 目的建立自人外周血淋巴细胞（PBMCs）中的记忆B细胞活化和分化特异性抗体分泌细胞（如浆细胞）的体外活化方法，为抗体药物研发提供研究基础。方法采集两名接种过乙型肝炎疫苗3年和25年健康成年志愿者（z和L）外周血，分离PBMCs，通过白细胞介素（IL）-2、IL-4和Toll样受体诱导剂（CpG、R848）体外诱导活化记忆B细胞。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测培养上清中总抗体和HBsAg特异性抗体的含量；通过酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测培养细胞中总抗体分泌细胞（ASC）数量的变化和HBsAg特异性抗体细胞数量。结果活化第6天，对照组和两个活化组[CpGDNA2006联合IL-2（C组）和R848联合IL-2（R组）]细胞培养上清总免疫球蛋白（Ig）G浓度分别为37．06ng／mL、80．87ng／mL和85．97ng／mL，两个活化组（C组和R组）均明显高于对照组（t=23．318，60．639，P均〈0．05）。ELISPOT检测ASC数量，结果显示，C组和R组数量均多于对照组，并且R组明显多于C组。两种活化方法均能在体外诱导B细胞活化，但R组活化效果更佳，确立R组为最佳活化方法。用该方法活化两名乙型肝炎疫苗接种者PBMCs，ELISA检测活化组特异性抗体浓度，R组显著高于对照组（t=5．031，11．561，P均〈0．05）。不同细胞数量诱导的分组，ELISPOT检测HBsAg特异性抗体分泌细胞数量，R组均明显多于对照组。结论确立诱导剂R848和细胞因子IL-2联合能够有效地诱导外周血记忆B细胞体外活化和分化抗原特异性浆细胞，为今后抗体药物研发提供了研究基础。 展开更多
关键词 外周血单个核细胞 记忆B淋巴细胞 体外活化 抗原特异性浆细胞
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系统性红斑狼疮与IL-12
6
作者 张凤山 支玉香 +3 位作者 谭静澜 王振宇 卢滨 吴长有 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期49-50,共2页
ＩＬ１２即自然杀伤细胞刺激因子，有很强的免疫调节作用，已知它在Ｔｈ１细胞介导的自身免疫病尤其是器官特异的自身免疫病中发挥重大作用，而在系统性自身免疫病中的作用仍不清楚，本研究旨在探讨ＩＬ１２与ＳＬＥ的关系，以进一... ＩＬ１２即自然杀伤细胞刺激因子，有很强的免疫调节作用，已知它在Ｔｈ１细胞介导的自身免疫病尤其是器官特异的自身免疫病中发挥重大作用，而在系统性自身免疫病中的作用仍不清楚，本研究旨在探讨ＩＬ１２与ＳＬＥ的关系，以进一步揭示ＳＬＥ的发病机制，探索新的治... 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 白细胞介素12 病理
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