癫痫患者脑组织TNF-αmRNA、IL-6mRNA以及HLA-Ⅱ抗原表达的改变 被引量：24

1

作者 杜静 方敏 +5 位作者 龚非力 李卓娅 黄家强 徐勇 熊平 李龄 《同济医科大学学报》 CSCD 2000年第2期111-113,共3页

为探讨肿瘤坏死因子 (TNF-α)、白细胞介素 6 (1L - 6 )以及 HL A- 抗原表达在癫痫免疫学发病机制中的作用 ,采用地高辛标记 c DNA探针技术组织原位杂交方法研究癫痫患者 TNF- α m RNA和 IL- 6 m RNA在脑组织中的表达与分布 ;同时借... 为探讨肿瘤坏死因子 (TNF-α)、白细胞介素 6 (1L - 6 )以及 HL A- 抗原表达在癫痫免疫学发病机制中的作用 ,采用地高辛标记 c DNA探针技术组织原位杂交方法研究癫痫患者 TNF- α m RNA和 IL- 6 m RNA在脑组织中的表达与分布 ;同时借助免疫组织化学技术检测癫痫患者脑组织中 HL A- 抗原的表达水平。结果发现 :癫痫患者脑组织中星形胶质细胞异常高表达 TNF- α m RNA和 IL- 6 m RNA;星形胶质细胞和小胶质细胞异常高表达 HL A- 类抗原。结果提示 :脑组织局部自分泌或旁分泌的细胞因子 (TNF-α和 IL - 6 )水平以及胶质细胞表面 HL A- 展开更多

关键词 癫痫 肿瘤坏死因子 白细胞介素6 HLA-Ⅱ mRNA

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黄芪刺五加合剂对小鼠免疫功能的调节作用 被引量：22

2

作者 杨一清 毕爱华 +3 位作者 王立人 梁智辉 冯玮 诸葛坚 《同济医科大学学报》 CSCD 1998年第1期62-65,共4页

选用自然杀伤(NK)活性测定、肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素2(IL-2)诱生水平检测3项免疫指标研究黄芪(A)和刺五加(AS)合剂(简称A-AS合剂)对小鼠免疫功能的影响。并比较A-AS合剂及A或AS单剂的作用。结果显示:环磷酰胺(Cy)组所有免疫指标... 选用自然杀伤(NK)活性测定、肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素2(IL-2)诱生水平检测3项免疫指标研究黄芪(A)和刺五加(AS)合剂(简称A-AS合剂)对小鼠免疫功能的影响。并比较A-AS合剂及A或AS单剂的作用。结果显示:环磷酰胺(Cy)组所有免疫指标均显著低于正常对照组(P<0.001);Cy+A-AS组与Cy+A或AS组所有免疫指标均高于Cy组,但Cy+A-AS组又明显高于Cy+A或AS组。结果表明A-AS的作用明显强于A或AS,A-AS合剂对小鼠免疫功能有上调作用,而且A与AS具有一定的协同作用。 展开更多

关键词 黄芪刺五加合剂 免疫功能 调节 中药 TNF IL-2

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简单可行的EB病毒转化B淋巴细胞方法的探讨 被引量：12

3

作者 刘敏 吴雄文 +2 位作者 吴锋 杨志章 赵修竹 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 1997年第4期274-275,278,共3页

介绍两种简便可行的EB病毒转化B淋巴细胞的方法，即微量全血法和冻存全血法。与环孢霉素A法相比较，这两种方法具有操作简单，所需血样少，无需环孢霉素A等优点。这些特点尤其是在进行大量样本转化时显得更为突出。用微量全血法和冻存... 介绍两种简便可行的EB病毒转化B淋巴细胞的方法，即微量全血法和冻存全血法。与环孢霉素A法相比较，这两种方法具有操作简单，所需血样少，无需环孢霉素A等优点。这些特点尤其是在进行大量样本转化时显得更为突出。用微量全血法和冻存全血法共进行79例转化试验，转化成功率分别为46％与85％。对于影响这两种EB病毒转化结果的因素也进行了讨论。 展开更多

关键词 B淋巴母细胞样细胞株 EB病毒

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氢化可的松诱导特发性血小板减少性紫癜淋巴细胞凋亡和增殖抑制 被引量：9

4

作者 王开颜 房崇芸 彭光洁 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期149-152,共4页

探讨氢化可的松对儿童急性特发性血小板减少性紫癜 (AITP)外周血淋巴细胞增殖和凋亡的影响。对 12例确诊的儿童 AITP外周血淋巴细胞进行体外培养 ,用流式细胞术观察糖皮质激素处理后外周血淋巴细胞凋亡数量的变化 ,并用Wst- 1(四氮唑盐 ... 探讨氢化可的松对儿童急性特发性血小板减少性紫癜 (AITP)外周血淋巴细胞增殖和凋亡的影响。对 12例确诊的儿童 AITP外周血淋巴细胞进行体外培养 ,用流式细胞术观察糖皮质激素处理后外周血淋巴细胞凋亡数量的变化 ,并用Wst- 1(四氮唑盐 )测定代表增殖的活细胞数。结果显示 ,激素处理组淋巴细胞凋亡率明显高于对照组 ,而活细胞数则明显低于对照组 ;激素处理后的外周血淋巴细胞凋亡率也明显高于处理前和正常对照组 ,均具有显著性差异。结果表明 ,氢化可的松具有明显的诱导淋巴细胞凋亡和增殖抑制作用 ,说明糖皮质激素可通过诱导 AITP外周血淋巴细胞凋亡和增殖抑制发挥治疗作用。 展开更多

关键词 氢化可的松 特发性血小板减少性紫癜 淋巴细胞凋亡 抑制

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癫痫患者PBMC分泌TNF-α、IL-6及HLA-Ⅱ类抗原表达的改变 被引量：6

5

作者 杜静 黄家强 +4 位作者 龚非力 李卓娅 熊平 徐勇 阮旭中 《同济医科大学学报》 CSCD 1997年第3期187-190,共4页

采用ELISA方法检测了30例癫痫患者外周血单个核细胞（PBMC）经脂多糖（LPS）诱生后培养上清中的细胞因子水平。结果发现，癫痫患者PBMC分泌肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）的水平分别为（5．705±0．702）μg／L和（17... 采用ELISA方法检测了30例癫痫患者外周血单个核细胞（PBMC）经脂多糖（LPS）诱生后培养上清中的细胞因子水平。结果发现，癫痫患者PBMC分泌肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）的水平分别为（5．705±0．702）μg／L和（177．60±54．50）ng／L，较正常对照组［分别为（3．118±0．373）μg／L和（78．67±6．47）ng／L］明显升高（均为P＜0．01），并且TNF－α与IL-6的升高存在明显的正相关（r＝0．705，P＜0．05）。应用Dot－ELISA及图像分析技术证实，癫痫患者PBMC表面人白细胞Ⅱ类抗原（HLA－Ⅱ抗原）的表达密度也显著高于正常对照组（P＜0．01）。结果提示，IL－6、TNF－α的分泌紊乱及HLA－Ⅱ类抗原的表达异常可能与癫痫的发病有关。 展开更多

关键词 癫痫 肿瘤坏死因子Α 白细胞介素6 ELISA

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比较跨膜型与分泌型TNF-α在体内的杀瘤效应 被引量：6

6

作者 李清芬 冯玮 +4 位作者 李卓娅 龚非力 姜晓丹 徐勇 熊平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第4期250-252,共3页

目的:比较分泌型和跨膜型TNF-α在体内抗瘤作用的异同.方法:在肿瘤局部直接注射3种TNF-α(野生型TNF-α重组体、跨膜型及分泌型TNF-α突变体)基因,观察其抗瘤效应 结果:3种TNF-α均能有效表达。并具明显抑瘤效应,跨膜型TNF-α突变体对... 目的:比较分泌型和跨膜型TNF-α在体内抗瘤作用的异同.方法:在肿瘤局部直接注射3种TNF-α(野生型TNF-α重组体、跨膜型及分泌型TNF-α突变体)基因,观察其抗瘤效应 结果:3种TNF-α均能有效表达。并具明显抑瘤效应,跨膜型TNF-α突变体对早期肿瘤的仰制效应明显高于其它2种TNF-α(P<0.01),而野生型TNF-α对中肿瘤的抗瘤效应则最佳.此外,注射3种TNF-α裸DNA均未观察到明显副作用,结论:分泌型和跨膜型TNF-α抑瘤机制可能下同,裸DNA直接用于细胞因子基因治疗较安全。 展开更多

关键词 基因治疗 跨膜型 TNF-Α 分泌型 抗瘤效应

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白细胞共同分化抗原CD45 被引量：6

7

作者 李鸣 《国外医学（分子生物学分册）》 CSCD 1995年第3期112-116,共5页

白细胞共同抗原CD45由一类结构相似、分子量较大的跨膜蛋白组成,广泛存在于白细胞表面,其胞浆区段具有蛋白质酪氨酸磷酸酶的作用,能使底物P56^(lcd)和P59^(fyn)上酪氨酸脱磷酸而激活,在细胞的信息传导中发挥重要作用。CD45是细胞膜上信... 白细胞共同抗原CD45由一类结构相似、分子量较大的跨膜蛋白组成,广泛存在于白细胞表面,其胞浆区段具有蛋白质酪氨酸磷酸酶的作用,能使底物P56^(lcd)和P59^(fyn)上酪氨酸脱磷酸而激活,在细胞的信息传导中发挥重要作用。CD45是细胞膜上信号传导的关键分子,在淋巴细胞的发育成熟、功能调节及信号传递中具有重要意义。CD45的分布可作为某些T细胞亚群的分类标志。 展开更多

关键词 白细胞共同抗原 CD45 分子结构 基因序列

原文传递

雷公藤甲素对正常人细胞免疫功能的抑制效应 被引量：6

8

作者 邵静芳 沈关心 +1 位作者 王晓林 张悦 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期241-242,共2页

雷公藤甲素(Triptalide)系从雷公藤中提取到的一种二萜类单体成份。

关键词 雷公藤 单核细胞 雷公藤甲素 免疫功能 抑制

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免疫磁性微珠的研制及其在免疫检测中的应用 被引量：5

9

作者 熊平 徐勇 +5 位作者 朱颉安 龚非力 冯新为 孙恩杰 饶微 李成红 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期443-445,共3页

应用材料科学和免疫学的新技术，我们在国内首次研制成功免疫磁性微珠（IMB）。在对一些临床常用血清指标以及两种激素标准品的免疫学定量检测中，自制IMB与瑞士Serono公司同类产品所获的结果十分接近（P＜0.01）,而且与放射免疫法的结... 应用材料科学和免疫学的新技术，我们在国内首次研制成功免疫磁性微珠（IMB）。在对一些临床常用血清指标以及两种激素标准品的免疫学定量检测中，自制IMB与瑞士Serono公司同类产品所获的结果十分接近（P＜0.01）,而且与放射免疫法的结果也有可比性(P＜O.01）。自制IMB在用于免疫学检测时的特异性、精密度、重复性、准确性均符合质量控制要求。 展开更多

关键词 免疫磁性微珠 定量检测 免疫测定

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癫痫患者抗脑抗体及脑组织中HLA—Ⅱ类抗原的表达 被引量：4

10

作者 李震中 阮旭中 +3 位作者 王宏毅 蔺建国 杜静 龚非力 《脑与神经疾病杂志》 1997年第5期263-265,共3页

目的:为获得癫痫患者免疫学异常的证据,本实验检测了患者血清中抗脑抗体(Anti-encephalic antibodies,AEAb)及脑组织人类白细胞抗原Ⅱ类抗原(Human leukocyte antigen class Ⅱantigen,HLA class Ⅱ antigen,HLA-Ⅱ类抗原),并与正常对... 目的:为获得癫痫患者免疫学异常的证据,本实验检测了患者血清中抗脑抗体(Anti-encephalic antibodies,AEAb)及脑组织人类白细胞抗原Ⅱ类抗原(Human leukocyte antigen class Ⅱantigen,HLA class Ⅱ antigen,HLA-Ⅱ类抗原),并与正常对照组比较。对象及方法:1.用ELISA方法测定37例癫痫患者血清抗脑自身抗体;2.借助免疫组织化学方法观察了HLA—Ⅱ类抗原在脑组织中表达与分布。结果:1.癫痫患者血清抗脑抗体高于正常对照;2.癫痫患者脑组织中星形胶质细胞和小胶质细胞异常表达HLA—Ⅱ类抗原。讨论:本实验证实癫痫患者存在一定程度的自身免疫应答异常。脑组织胶质细胞表面HLA—Ⅱ类抗原表达异常可能通过多种机制参与癫痫发病。 展开更多

关键词 癫痫 抗脑抗体 人类白细胞抗原 Ⅱ类抗原

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淋巴细胞经TCR－CD3活化增殖作用的分析 被引量：3

11

作者 李鸣 杨敬 +4 位作者 沈关心 张茜 刘忠北 刘慎沛 叶维新 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期91-94,共4页

本文探讨了抗ＣＤ３单抗诱导的淋巴细胞活化增殖及有关影响因素。实验结果表明：①淋巴细胞内钙升高是淋巴细胞活化增殖的重要条件，ＣＤ３ＭｃＡｂ引起的早期胞浆游离钙迅速升高主要由内质网释放钙离子所致，而淋巴细胞增殖不仅需要细... 本文探讨了抗ＣＤ３单抗诱导的淋巴细胞活化增殖及有关影响因素。实验结果表明：①淋巴细胞内钙升高是淋巴细胞活化增殖的重要条件，ＣＤ３ＭｃＡｂ引起的早期胞浆游离钙迅速升高主要由内质网释放钙离子所致，而淋巴细胞增殖不仅需要细胞内钙释放，还需要细胞外钙内流；②ＧＴＰ结合蛋白是淋巴细胞激活过程的一重要环节，经Ｇ蛋白作用物霍乱毒素作用后，淋巴细胞ＤＮＡ合成显著降低；③新霉素和ＰＳＳ可抑制ＰＬＣ和ＰｋＣ的活性，对淋巴细胞ＮＤＡ合成造成剂量依赖性抑制作用。此外，抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞ＤＮＡ合成需要辅佐细胞的存在，高度纯化的Ｔ细胞对ＣＤ３ＭｃＡｂ的刺激不发生增殖反应。 展开更多

关键词 CD3McAb 淋巴细胞活化增殖 G蛋白 胞浆游离钙

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AC－cAMP－PKA途径对淋巴细胞DNA合成的调节作用 被引量：2

12

作者 李鸣 张茜 +3 位作者 杨敬 王晓林 崔武任 叶仙桃 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期147-150,共4页

以ＣＤ３ＭｃＡｂ为激动剂，以淋巴细胞体外ＤＮＡ合成为研究手段，探讨了ＡＣ－ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号途径在ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞活化中的意义。研究结果表明ＡＣ、ｃＡＭＰ和ＰＫＡ在决定细胞对外界刺激的反应中起着重要作用... 以ＣＤ３ＭｃＡｂ为激动剂，以淋巴细胞体外ＤＮＡ合成为研究手段，探讨了ＡＣ－ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号途径在ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞活化中的意义。研究结果表明ＡＣ、ｃＡＭＰ和ＰＫＡ在决定细胞对外界刺激的反应中起着重要作用。在淋巴细胞活化早期细胞内ｃＡＭＰ出现一过性升高，随着细胞活化增殖，ｃＡＭＰ降至正常水平以下。活化ＡＣ、升高细胞内ｃＡＭＰ水平可显著降低ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞ＤＮＡ合成，而ＰＫＩ却能在一定程度上促进淋巴细胞活化增殖。 展开更多

关键词 淋巴细胞 DNA合成 腺苷酸环化酶 CAMP PKA

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新一代治疗用抗体——改型抗体 被引量：1

13

作者 黄家强 《国外医学（分子生物学分册）》 CSCD 1997年第2期87-92,共6页

改型抗体是在嵌合抗体基础上构建的新一代人源化抗体,因其免疫原性进一步降低而适用于临床治疗。本文较为详细地介绍了改型抗体有关研究进展,包括改型抗体的产生与发展、设计和构建、优点及应用等。

关键词 改型抗体 免疫原性 抗体亲和力

原文传递

外源性哮喘患者白细胞介素2和可溶性白细胞介素2受体的测定

14

作者 刘光辉 彭慧 +4 位作者 陈欢 李洪 梁智辉 王立人 冯玮 《同济医科大学学报》 CSCD 1998年第5期370-372,共3页

采用酶联双抗体夹心法,对36例哮喘患者和54例正常献血者(对照组)进行了外周血单个核细胞诱生白细介素2(IL-2)水平的检测。结果;哮喘组外周血单个核细胞诱生的IL-2活性[吸光度(A)值]为0.2015±0.0225,血浆可溶白细胞介素2(sIL-2)水平... 采用酶联双抗体夹心法,对36例哮喘患者和54例正常献血者(对照组)进行了外周血单个核细胞诱生白细介素2(IL-2)水平的检测。结果;哮喘组外周血单个核细胞诱生的IL-2活性[吸光度(A)值]为0.2015±0.0225,血浆可溶白细胞介素2(sIL-2)水平为167.5±52.4kU/L,均高于对照组[前者A值为0.1881±0.0300,后者为(114.2±48.6)kU/L(P<0.05,P<0.01)]。提示:外源性哮喘患者发病中存在着T淋巴细胞的活化,导致IL-2诱生水平和血浆sIL-2R水平的增高,二者在哮喘发病机制中起着一定的作用。 展开更多

关键词 哮喘 白细胞介素2 SIL-2R

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性激素对人免疫功能影响的体外试验

15

作者 宋丽华 毕爱华 王立人 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1995年第5期373-376,共4页

以生理浓度的雌二醇（Ｅ_２）和睾丸酮（Ｔｅ）体外作用于人外周血淋巴细胞，观察对ＰＨＡ刺激的淋巴细胞增殖反应、白细胞介素－２（ＩＬ－２）诱生水平及淋巴细胞对ＩＬ－２的反应性．取肝素抗凝血１０份，男女各５份，设Ｅ_２、Ｔｅ... 以生理浓度的雌二醇（Ｅ_２）和睾丸酮（Ｔｅ）体外作用于人外周血淋巴细胞，观察对ＰＨＡ刺激的淋巴细胞增殖反应、白细胞介素－２（ＩＬ－２）诱生水平及淋巴细胞对ＩＬ－２的反应性．取肝素抗凝血１０份，男女各５份，设Ｅ_２、Ｔｅ及Ｅ_２＋Ｔｅ实验组和无激素对照组．结果表明：Ｅ_２可明显抑制ＰＨＡ刺激的淋巴细胞增殖反应、ＩＬ－２诱生水平及静止淋巴细胞对ＩＬ－２的反应性，对ＰＨＡ活化的淋巴细胞反应性无影响，Ｔｅ的作用在各例间不一致． 展开更多

关键词 雌二醇 睾丸酮 淋巴细胞 白细胞介素2 免疫功能

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41例Graves病患者HLA-Ⅲ(Bf,C4A,C4B)补体型遗传多态性的检测 被引量：1

16

作者 蔡仕林 张木勋 +1 位作者 陈芳琦 赵修竹 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 1993年第S1期27-29,共3页

本研究对41例Graves病(GD,其中17例系家系)患者血,按我校常规的Bf,C4多态性检测程序进行了检测,并与同地区同民族的36个健康献血员家系资料进行对比。检测结果发现:Bf基因的分布和频率与正常组比较均无明显差异;C4 基因中C4A·QO ... 本研究对41例Graves病(GD,其中17例系家系)患者血,按我校常规的Bf,C4多态性检测程序进行了检测,并与同地区同民族的36个健康献血员家系资料进行对比。检测结果发现:Bf基因的分布和频率与正常组比较均无明显差异;C4 基因中C4A·QO 频率明显高于正常组(Pc=0.0367,RR=2.0333,EF=0.1364);补体型分布与正常组比较亦无明显差异,其中S42,F31 呈正连锁不平衡。本研究结果提示 C4A·QO 与GD的关系值得重视。 展开更多

关键词 甲状腺肿 突眼性 组织相容性抗原 补体成分4

全文增补中

生物频谱治疗对哮喘患者可溶性白细胞介素-2受体、T细胞亚群的影响

17

作者 刘光辉 李洪 +3 位作者 王立人 梁智辉 冯玮 刘惕 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 1997年第S1期40-41,45,共3页

为探讨生物频谱治疗对哮喘患者免疫功能的影响,用生物频谱对哮喘患者进行穴位照射治疗。采用单克隆与多克隆双抗夹心法和间接免疫荧光法,对15例哮喘患者和15例正常献血者(对照组)进行了可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平和T细胞亚群... 为探讨生物频谱治疗对哮喘患者免疫功能的影响,用生物频谱对哮喘患者进行穴位照射治疗。采用单克隆与多克隆双抗夹心法和间接免疫荧光法,对15例哮喘患者和15例正常献血者(对照组)进行了可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平和T细胞亚群的检测,结果发现哮喘患者治疗后sIL-2R水平明显高于治疗前,而治疗后CD_8^+虽有所升高但仍低于正常对照组,CD_4^+/cD_8^+比值与正常对照组差异无显著性,结果表明生物频谱治疗能调整哮喘患者紊乱的T细胞亚群的比例和促进活化的T细胞的自我调节。 展开更多

关键词 生物频谱 哮喘 受体 白细咆介素-2 T细胞亚群

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EB病毒受体的放射配基结合分析 被引量：1

18

作者 吴锋 赵明伦 +1 位作者 黄培春 吴雄文 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1996年第5期333-337,共5页

用３Ｈ－ＴｄＲ标记爱波斯坦－巴尔病毒（ＥＢＶ）进行结合饱和实验和竞争性抑制实验检测３种类型细胞的ＥＢＶ受体。结果表明，Ｂ淋巴细胞性白血病细胞系Ｒａｊｉ细胞存在高低两种亲和性ＥＢＶ结合位点，其Ｋｄ１＝１．２５×１０... 用３Ｈ－ＴｄＲ标记爱波斯坦－巴尔病毒（ＥＢＶ）进行结合饱和实验和竞争性抑制实验检测３种类型细胞的ＥＢＶ受体。结果表明，Ｂ淋巴细胞性白血病细胞系Ｒａｊｉ细胞存在高低两种亲和性ＥＢＶ结合位点，其Ｋｄ１＝１．２５×１０（－１３）ｍｏｌ／Ｌ，Ｂ（ｍａｘ）１＝９．８９病毒粒子／细胞；Ｋｄ２＝２．８０×１０（－１２）ｍｏｌ／Ｌ，Ｂ（ｍａｘ）２＝１７０．３５病毒粒子／细胞，而ＥＢＶ不与红白血病细胞系Ｋ５６２细胞结合。上皮细胞性低分化鼻咽癌细胞系ＣＮＥ－２Ｚ细胞也表达ＥＢＶ受体，其Ｋｄ＝６．１７×１０（－１３）ｍｏｌ／Ｌ，Ｂ（ｍａｘ）＝１０．２４病毒粒子／细胞。ＥＢＶ及α干扰素均能阻止３Ｈ－ＥＢＶ与Ｒａｊｉ细胞或ＣＮＥ－２Ｚ细胞的特异性结合。 展开更多

关键词 放射配位体测定 鼻咽肿瘤 受体 EB病毒

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人肿瘤坏死因子-α的免疫PCR检测方法 被引量：1

19

作者 方敏 龚非力 +4 位作者 李卓娅 熊平 冯玮 徐勇 姜小丹 《同济医科大学学报》 CSCD 1998年第5期354-356,360,共4页

将ＰＣＲ技术的极高灵敏度与ＥＬＩＳＡ技术检测肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）抗原的特异性相结合，利用生物素标记的腺病毒六邻体基因重组质粒（ＡｄＡＴ）作为ＰＣＲ的模板ＤＮＡ，以链亲和素作连接分子，与生物标记的兔抗鼠ＩｇＧ... 将ＰＣＲ技术的极高灵敏度与ＥＬＩＳＡ技术检测肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）抗原的特异性相结合，利用生物素标记的腺病毒六邻体基因重组质粒（ＡｄＡＴ）作为ＰＣＲ的模板ＤＮＡ，以链亲和素作连接分子，与生物标记的兔抗鼠ＩｇＧ抗体相连接，后者再与ＴＮＦ－α的单克隆抗体结合。设计一对扩增六邻体基因的引物进行ＰＣＲ，通过对ＤＮＡ扩增片段浓度的定量分析。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子 免疫PCR 细胞因子 检测方法

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抗慢性淋巴细胞白血病独特型单抗SM6可变区基因序列分析 被引量：1

20

作者 苏娜 杨敬 +1 位作者 王晓林 沈关心 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第7期367-370,共4页

目的：对独特型抗体可变区基因进行序列分析，为其基因工程抗体的构建打下基础。方法：采用ＴＲＩｚｏｌＲ试剂从分泌抗独特型抗体ＳＭ６杂交瘤细胞株中提取ｍＲＮＡ，以特异性引物采用ＰＣＲ技术扩增并克隆出独特型单抗ＳＭ６重、轻链... 目的：对独特型抗体可变区基因进行序列分析，为其基因工程抗体的构建打下基础。方法：采用ＴＲＩｚｏｌＲ试剂从分泌抗独特型抗体ＳＭ６杂交瘤细胞株中提取ｍＲＮＡ，以特异性引物采用ＰＣＲ技术扩增并克隆出独特型单抗ＳＭ６重、轻链可变区（ＶＨ、ＶＬ）基因。将ＶＨ和ＶＬ基因分别克隆到ｐＧＥＭＴ载体中。采用链末端终止法荧光染色测定ＶＨ和ＶＬ基因序列，应用ＤＮＡＳＩＳ７分析软件并与美国国立卫生研究院基因库比较分析。结果：５个克隆的重链基因序列一致，３个克隆的轻链基因中有２个克隆基因一致。结论：ＶＨ和ＶＬ基因分别属Ｑ５２、ＪＨ３和ＶＫ１９、ＪＫ２。 展开更多

关键词 白血病 抗体 抗独特型 序列分析 基因克隆

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