梅花鹿和马鹿鹿茸尖部与基部水溶性成分含量测定 被引量：11

1

作者 刘佳 赵海平 +3 位作者 杨万云 赵志峰 张伟 李春义 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期567-569,共3页

目的测定不同种类鹿茸尖部和基部水溶性成分含量,并分析其含量差异。方法对传统方法加工的鹿茸进行水溶性成分提取,采取凝胶过滤层析方法,以细胞色素C为内参,采用Superdex^(TM)75 10/300 GL凝胶过滤层析柱,缓冲液使用0.05mol·L^(-1... 目的测定不同种类鹿茸尖部和基部水溶性成分含量,并分析其含量差异。方法对传统方法加工的鹿茸进行水溶性成分提取,采取凝胶过滤层析方法,以细胞色素C为内参,采用Superdex^(TM)75 10/300 GL凝胶过滤层析柱,缓冲液使用0.05mol·L^(-1)PBS+0.3 mol·L^(-1)NaCl,流速0.5 ml/min,检测波长280 nm,通过峰下面积积分,计算水溶性成分含量。结果实验建立了水溶性成分含量的计算方法。经计算水溶性成分含量分别为梅花鹿二杠茸尖部30.50%,基部为6.77%;梅花鹿三杈茸尖部29.69%,基部为5.98%;马鹿四杈茸尖部28.27%,基部为3.22%。结论水溶性成分含量在鹿茸尖部和基部差异明显,梅花鹿二杠茸、梅花鹿三杈茸和马鹿四杈茸的尖部分别为基部的4.5倍,5倍和9倍;从不同种类鹿茸的水溶性成分含量上看,梅花鹿二杠茸优于梅花鹿三杈茸优于马鹿四杈茸,与传统分类相一致。 展开更多

关键词 鹿茸 水溶性成分 凝胶过滤层析 含量差异

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鹿角盘水提物对大鼠乳腺增生的作用效果及其机制研究 被引量：7

2

作者 关晴 赵海平 +3 位作者 王东旭 王玉俗 李春义 徐莉 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第1期296-304,共9页

为了探索鹿角盘(DHAB)水提物对大鼠乳腺增生的治疗作用,初步探讨其作用机理和用药剂量,试验利用苯甲酸雌二醇(0.5mg/(kg·d))联合黄体酮(5.0mg/(kg·d))对SD大鼠进行肌内注射建立乳腺增生模型。试验共分7个组,每组10只大鼠,分... 为了探索鹿角盘(DHAB)水提物对大鼠乳腺增生的治疗作用,初步探讨其作用机理和用药剂量,试验利用苯甲酸雌二醇(0.5mg/(kg·d))联合黄体酮(5.0mg/(kg·d))对SD大鼠进行肌内注射建立乳腺增生模型。试验共分7个组,每组10只大鼠,分别为空白组、乳腺增生症(HMG)模型组、阳性药三苯氧胺组(0.036mg/(kg·d))、鹿角盘水提物4个剂量组(高剂量,2.625g/(kg·d);中高剂量,1.575g/(kg·d);中低剂量,1.05g/(kg·d);低剂量,0.63g/(kg·d))。按组别连续灌胃45d,每周固定时间测定大鼠乳头直径、高度及体重。试验结束后采血取样,称量大鼠胸腺、脾脏、子宫和卵巢质量,取乳腺组织做病理学切片、HE染色,用放射免疫法检测大鼠血清中雌二醇(E2)及孕酮(P)的含量。结果表明,使用不同剂量鹿角盘水提物均能减小乳腺增生大鼠乳头直径、高度,提高胸腺、脾脏指数,降低子宫指数,减轻乳腺小叶数、腺泡数和分泌物,降低血清E2含量,升高血清P的含量,与模型组相比有统计学差异(P<0.01;P<0.05))。综合试验结果,鹿角盘水提物对乳腺增生大鼠有治疗作用,效果显著,且以中高剂量组变化最为明显。其作用机制可能通过增强机体免疫力、调节血清中E2、P水平实现。 展开更多

关键词 鹿角盘水提物 乳腺增生症(HMG) 治疗效果 作用机制

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鹿茸角柄断面伤口无疤痕愈合过程中骨形态蛋白的表达及功能分析 被引量：2

3

作者 林珊珊 郭倩倩 +3 位作者 陈奕其 郑慧洁 郑美霞 褚文辉 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期47-53,共7页

为研究骨形态蛋白(bone morphogenetic proteins,BMP)在鹿茸再生早期角柄断面伤口无疤痕愈合过程中的功能,本研究通过免疫组化技术对比分析了BMP 2和BMP 4在正常皮肤及茸皮中的表达及分布差异,同时利用添加外源性蛋白分析了BMP 4对鹿真... 为研究骨形态蛋白(bone morphogenetic proteins,BMP)在鹿茸再生早期角柄断面伤口无疤痕愈合过程中的功能,本研究通过免疫组化技术对比分析了BMP 2和BMP 4在正常皮肤及茸皮中的表达及分布差异,同时利用添加外源性蛋白分析了BMP 4对鹿真皮成纤维细胞和毛乳头细胞的影响。结果显示:(1)原代培养的真皮成纤维细胞表达波形蛋白阳性率几乎为100%;(2)BMP 2和BMP 4强烈表达于茸皮中新生毛囊的毛基质细胞中;(3)BMP 4可促进鹿真皮成纤维细胞向脂肪细胞转分化;(4)BMP 4可促进鹿真皮毛乳头细胞成团。以此推测BMP在鹿毛囊形成及伤口愈合过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 鹿茸 骨形态蛋白 角柄 无疤痕愈合 毛囊 转分化

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脂肪干细胞在伤口愈合中的作用研究进展 被引量：1

4

作者 王玉俗 褚文辉 +2 位作者 王琦 李春义 赵全民 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2019年第6期527-531,共5页

皮肤是包裹在身体表面的一层组织,是动物抵御外界机械、化学及病原微生物侵袭的第一屏障。皮肤创伤是最常见的外科疾病之一,其愈合过程可概括为:炎症期、增生期和修复期3个阶段。伤口的不完全修复可导致皮肤出现瘢痕,使组织失去正常结... 皮肤是包裹在身体表面的一层组织,是动物抵御外界机械、化学及病原微生物侵袭的第一屏障。皮肤创伤是最常见的外科疾病之一,其愈合过程可概括为:炎症期、增生期和修复期3个阶段。伤口的不完全修复可导致皮肤出现瘢痕,使组织失去正常结构和功能,并严重影响外观美感。传统的治疗方法不能恢复皮肤的正常功能且不良反应明显,已不能满足人们的需求。干细胞治疗,特别是脂肪来源的干细胞(ADSCs)可促进伤口愈合,是近年来研究的热点之一。ADSCs在伤口愈合中可分泌多种生长因子以减轻伤口炎症反应,促进伤口再生上皮化及血管重建,从而促进伤口愈合。在总结伤口愈合过程及其调控机制的同时,对国内外有关ADSCs在伤口愈合中的作用及临床应用进展作一综述。 展开更多

关键词 脂肪干细胞 皮肤 伤口愈合

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鹿角盘成分提取及其工艺的优化

5

作者 关晴 赵海平 李春义 《食品工业》 CAS 北大核心 2018年第11期124-130,共7页

摸索鹿角盘提取条件,优化提取工艺。利用正交试验考察水提法和酶解法对鹿角盘提取率的影响。水提法:料液比1︰25 (g/mL), 100℃煎煮6 h,提取率为28.11%。单酶酶解法:胃蛋白酶酶解工艺为料液比1︰30 (g/mL),pH 1.8,加酶量4%,酶解温度37℃... 摸索鹿角盘提取条件,优化提取工艺。利用正交试验考察水提法和酶解法对鹿角盘提取率的影响。水提法:料液比1︰25 (g/mL), 100℃煎煮6 h,提取率为28.11%。单酶酶解法:胃蛋白酶酶解工艺为料液比1︰30 (g/mL),pH 1.8,加酶量4%,酶解温度37℃,酶解4 h,提取率为22.39%;胰蛋白酶酶解工艺为料液比1︰20 (g/mL), pH 8.0,加酶量4%,酶解温度55℃,酶解6 h,提取率为20.99%。复合酶解酶解工艺:先胃蛋白酶,处理条件为料液比1︰20 (g/mL),pH 1.8,加酶量1%,酶解温度37℃,酶解12 h;后胰蛋白酶,处理条件为料液比1︰20 (g/mL), pH 8.0,加酶量0.4%,酶解温度37℃,酶解2 h,提取率可达31.84%。按照复合酶解工艺,对水提法最佳条件下提取后的鹿角霜进行复合酶解,提取率仅为1.33%。利用水提和酶解的方法筛选出鹿角盘的最优提取条件,制备工艺合理。由结果看出,两个方法中得到的提取率差异不明显。复合酶解得到的提取物种类和含量多于水提法的种类和含量。 展开更多

关键词 鹿角盘成分 提取 提取工艺 优化 提取率

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鹿茸成分研究进展 被引量：27

6

作者 刘佳 赵海平 李春义 《特产研究》 2016年第4期50-54,共5页

鹿茸是一种具有多种药理作用的传统名贵中药材,在我国中药方剂中应用广泛。鹿茸的多种药效与其化学成分息息相关。本文综述了鹿茸中9种主要化学成分的研究进展,即无机元素类、脂质、蛋白质、多肽、生长因子、氨基酸、糖类、生物胺和不... 鹿茸是一种具有多种药理作用的传统名贵中药材,在我国中药方剂中应用广泛。鹿茸的多种药效与其化学成分息息相关。本文综述了鹿茸中9种主要化学成分的研究进展,即无机元素类、脂质、蛋白质、多肽、生长因子、氨基酸、糖类、生物胺和不溶性物质。发现鹿茸的各成分在鹿茸不同种类、不同生长阶段以及其不同区段的含量存在差异。为鹿茸化学成分的进一步分离鉴别奠定基础,并为研究鹿茸成分与药效之间的关系提供思路。 展开更多

关键词 鹿茸 化学成分 无机元素 蛋白质 多肽

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鹿茸药材鉴定和质量控制的研究进展 被引量：20

7

作者 雒伟伟 赵海平 +4 位作者 齐晓妍 关睛 刘佳 张忠湛 李春义 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第21期4110-4114,共5页

鹿茸是我国传统名贵中药材,产业开发潜力巨大。然而,鹿茸鉴定和质量控制体系不健全,导致鹿茸市场混乱,鹿茸深加工产业发展缓慢。该文对近年来鹿茸药材鉴定和质量控制体系研究进展进行概述,并剖析目前存在的问题。在此基础上,作者提出鹿... 鹿茸是我国传统名贵中药材,产业开发潜力巨大。然而,鹿茸鉴定和质量控制体系不健全,导致鹿茸市场混乱,鹿茸深加工产业发展缓慢。该文对近年来鹿茸药材鉴定和质量控制体系研究进展进行概述,并剖析目前存在的问题。在此基础上,作者提出鹿茸鉴定和质量控制体系建立的可行性研究方案,为建立鹿茸综合评价体系提供思路。 展开更多

关键词 鹿茸 质量鉴定 质量控制 指纹图谱

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动物药材鉴别及质量评价方法研究进展与策略 被引量：14

8

作者 王海璐 李庆杰 +1 位作者 赵海平 李春义 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第16期3942-3949,共8页

动物药材在传统中药应用中有着极为重要的地位,是中药的重要组成部分,被认为具有活性强、潜力大和应用广等优势。随着人们对动物药材需求量的不断增大,市场上大量出现伪品、劣品和混淆品的现象严重影响了动物药材的使用效果和质量评价工... 动物药材在传统中药应用中有着极为重要的地位,是中药的重要组成部分,被认为具有活性强、潜力大和应用广等优势。随着人们对动物药材需求量的不断增大,市场上大量出现伪品、劣品和混淆品的现象严重影响了动物药材的使用效果和质量评价工作;同时动物药材在鉴别和质量评价方面研究也比植物类中药发展缓慢、体系薄弱,特别是缺乏特色和专属的鉴定指标与评价手段。因此,如何构建和完善动物药材质量评价体系尤为重要,将成为今后研究的重点和热点工作。对动物药材鉴别和质量评价方法研究进展现状进行概述,对构建其质量评价体系中存在的问题和挑战进行合理建议和分析,为动物药材质量评价体系的构建和完善研究提供参考和新思路。 展开更多

关键词 动物药材 药材鉴别 质量评价 DNA条形码 X射线衍射

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鹿茸水溶性与脂溶性成分提取方法的优化及含量分析 被引量：7

9

作者 刘佳 赵海平 +4 位作者 张伟 雒伟伟 杨万云 齐晓妍 李春义 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第15期65-69,共5页

目的:探索鹿茸可溶性成分(水溶性成分和脂溶性成分)的最优提取工艺,并分析其在我国常见鹿茸中的含量规律。方法:通过比较3种不同破碎方法(超声波提取法,Bullet Blender细胞组织破碎仪提取法和净信组织细胞研磨仪提取法),结合凝胶过滤色... 目的:探索鹿茸可溶性成分(水溶性成分和脂溶性成分)的最优提取工艺,并分析其在我国常见鹿茸中的含量规律。方法:通过比较3种不同破碎方法(超声波提取法,Bullet Blender细胞组织破碎仪提取法和净信组织细胞研磨仪提取法),结合凝胶过滤色谱,得出最佳水溶性成分提取方法。通过比较样品的两种前处理方式(105℃烘干法和24 h冻干法),采用索氏提取法,筛选最适的脂溶性成分测定方法。最后按照优化后实验方案对梅花鹿二杠茸、梅花鹿三杈茸、马鹿茸的尖部和基部可溶性成分进行测定。结果:水溶性成分的提取采用Bullet Blender细胞组织破碎仪法,参数为三档位,3 min,破碎3次,可得到最高提取效率;脂溶性成分的提取采用105℃烘干法,平行实验数据较稳定,相对偏差<5%。不同种类鹿茸尖部和基部的可溶性成分质量分数分别为梅花鹿二杠茸36.06%,8.30%,梅花鹿三杈茸34.54%,7.20%,马鹿茸32.42%,3.91%。结论:该实验成功筛选出鹿茸水溶性与脂溶性成分的最优提取方法,并且发现不同种类鹿茸的可溶性成分在尖部含量明显高于基部,且含量差异表现为梅花鹿二杠茸>梅花鹿三杈茸>马鹿茸的递减趋势,但差异并不显著。 展开更多

关键词 鹿茸 水溶性成分 凝胶过滤色谱 脂溶性成分 含量差异

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抗雄性激素和孕酮对6岁龄梅花鹿二茬茸生长发育的影响 被引量：7

10

作者 赵海平 崔学哲 +4 位作者 张伟 陈广信 杨万云 王权威 李春义 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第13期2713-2719,共7页

为研究抗雄性激素药物和醋酸美伦孕酮对6岁龄梅花鹿二茬茸生长发育的影响,选择体质量和头茬茸产量相近的6岁龄健康梅花鹿20只,采用单因子试验设计,随机均分成5组。基础粮饲相同,对照组不做特殊处理,其余4组分别注射抗雄性激素氟他胺（fl... 为研究抗雄性激素药物和醋酸美伦孕酮对6岁龄梅花鹿二茬茸生长发育的影响,选择体质量和头茬茸产量相近的6岁龄健康梅花鹿20只,采用单因子试验设计,随机均分成5组。基础粮饲相同,对照组不做特殊处理,其余4组分别注射抗雄性激素氟他胺（flutamide）、康士得（bicalutamide）、醋酸环丙孕酮（progesterone acetate）和醋酸美伦孕酮（melengestrol acetate）。试验期60 d,共采集血液4次,测定梅花鹿血浆中雄性激素睾酮的含量,对比不同组变化规律;观察二茬茸生长发育状态;实验结束,梅花鹿二茬茸锯茸称重,计算二茬茸比重。结果发现,试验组二茬茸质量显著高于对照组,氟他胺、康士得、醋酸环丙孕酮、醋酸美伦孕酮与对照组相比分别增重100.50%,64.46%,87.16%,117.46%。试验早期（35 d）各组梅花鹿血液睾酮含量差异不显著;试验末期各组梅花鹿睾酮含量均极显著高于前一阶段（P〈0.01）;其中注射氟他胺组极显著低于其他组（P〈0.01）,康士得组和醋酸美伦孕酮组极显著高于其他组（P〈0.01）。结果表明对梅花鹿注射抗雄性激素和孕酮均促进了二茬茸的发育,增加了二茬茸的质量,其中以醋酸美伦孕酮组最为显著。从鹿茸的形态观察发现,抗雄性激素和孕酮处理延缓鹿茸骨化,从而延长了二茬茸的生长期,但是均没有影响血浆睾酮水平。 展开更多

关键词 梅花鹿 抗雄性激素 孕酮 睾酮 二茬茸

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碳点的研究进展及其在鹿茸研究中应用前景分析 被引量：3

11

作者 徐源 李春义 赵海平 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期2580-2586,共7页

碳点是一种具有优异荧光性质的新兴纳米材料。相比于传统的有机染料和半导体量子点,碳点具有毒性低和生物相容性好等优点。目前,碳点在分析检测、荧光成像、药物运载等诸多领域有着广泛的应用。鹿茸是一味具有多种药效的传统名贵中药,... 碳点是一种具有优异荧光性质的新兴纳米材料。相比于传统的有机染料和半导体量子点,碳点具有毒性低和生物相容性好等优点。目前,碳点在分析检测、荧光成像、药物运载等诸多领域有着广泛的应用。鹿茸是一味具有多种药效的传统名贵中药,也是罕见的具备再生能力的哺乳动物器官。鹿茸的生物学特性和药效与其化学成分有着密切联系。简要综述了碳点在荧光检测、荧光成像以及光诊疗方面的应用进展,对碳点应用于鹿茸生物学特性及其化学成分分析研究的可行性进行了探讨。 展开更多

关键词 鹿茸 碳点 荧光检测 活性物质 光诊疗 生物学特性

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基于组织结构特征和蛋白质与钙含量比值的鹿茸分区研究

12

作者 赵海平 姚梦杰 +4 位作者 徐源 刘佳 岳志刚 齐晓妍 李春义 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1518-1527,共10页

目的建立客观鹿茸分区方法。方法采集3种规格的鹿茸,分别为马鹿三杈茸、梅花鹿三杈茸和二杠茸。通过纵向剖面、横断面和组织学切片对鹿茸内部组织结构、形态特征和组织类型进行分析,确定鹿茸的感官分区指标。通过测定鹿茸不同区段成分... 目的建立客观鹿茸分区方法。方法采集3种规格的鹿茸,分别为马鹿三杈茸、梅花鹿三杈茸和二杠茸。通过纵向剖面、横断面和组织学切片对鹿茸内部组织结构、形态特征和组织类型进行分析,确定鹿茸的感官分区指标。通过测定鹿茸不同区段成分上的差异,设立数据化的分区指标。结果建立血管形态和骨密质环2个感官分区指标,蜡片:无肉眼可见血管;粉片:血管细密,粗细均匀;蜂片:开始出现密质骨时,周围血管细密,中间粗,呈蜂窝状;骨片:密质骨连成骨密质环。利用蛋白质含量和钙含量的比值设定了不同区段鹿茸分区值(PV值):蜡片≥65.00,粉片6.30~64.99,蜂片4.70~6.29,骨片≤4.69。结论通过感官指标和PV值建立了鹿茸的客观分区方法,能够精确客观地对鹿茸进行分区,不仅适用于不同种鹿茸,如马鹿茸和梅花鹿茸;而且也适用于不同规格的鹿茸,如二杠茸和三杈茸;还能够适用于不同加工方式处理的鹿茸,如传统煮炸法和冷冻真空干燥法。该方法为增强鹿茸治疗的针对性和促进鹿茸深加工奠定了基础。 展开更多

关键词 鹿茸 内部组织特点 马鹿三杈茸 梅花鹿三杈茸 二杠茸 分区值

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梅花鹿Fibulin 5编码区cDNA的克隆及功能研究

13

作者 褚文辉 王权威 +2 位作者 王玉俗 王桂武 李春义 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期172-181,共10页

为研究梅花鹿扣针蛋白5(Fibulin 5, FBLN5)在鹿茸再生过程中的作用,本研究通过RT-PCR获得了梅花鹿FBLN 5的cDNA编码区,并对其进行生物信息学分析。同时利用RNA干扰技术(RNA interference, RNAi)下调了梅花鹿角柄骨膜致敏区(Potentiated ... 为研究梅花鹿扣针蛋白5(Fibulin 5, FBLN5)在鹿茸再生过程中的作用,本研究通过RT-PCR获得了梅花鹿FBLN 5的cDNA编码区,并对其进行生物信息学分析。同时利用RNA干扰技术(RNA interference, RNAi)下调了梅花鹿角柄骨膜致敏区(Potentiated pedicle periosteum, PPP)细胞中FBLN5基因表达,并研究了基因表达下调后PPP细胞条件培养液对HUVEC细胞增殖的影响。结果显示:(1)梅花鹿FBLN5 cDNA编码区长1 347 bp,编码448个氨基酸;(2)生物信息学软件分析显示,梅花鹿FBLN5蛋白含有一个跨膜区,一段23个氨基酸的信号肽序列,vWA_Matrilin、cEGF和EGF_CA等重要的功能结构域;(3)构建了梅花鹿FBLN5基因的RNAi重组质粒并获得了一条能有效下调目的基因效率达88.72%的靶序列pLVTHM-FBLN2,MTT结果显示PPP细胞FBLN5基因表达量下调后,所获细胞条件培养液可显著促HUVEC细胞增殖,推测FBLN5可能参与了鹿茸再生过程中的血管生成及稳态维持等过程。 展开更多

关键词 梅花鹿 鹿茸 FBLN5 生物信息学分析 干扰 血管生成

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梅花鹿Thymosin beta 10基因的原核表达、活性鉴定和多克隆抗体制备

14

作者 褚文辉 张伟 +2 位作者 赵海平 王大涛 李春义 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期72-79,共8页

为研究梅花鹿Thymosin beta 10基因(Tβ10)在鹿茸快速生长过程中的作用,利用Gateway技术构建梅花鹿Tβ10基因的原核表达载体—pDEST17-Tβ10并诱导表达,对融合蛋白进行功能检测及多克隆抗体制备。结果表明:1)获得了190bp Tβ10基因开放... 为研究梅花鹿Thymosin beta 10基因(Tβ10)在鹿茸快速生长过程中的作用,利用Gateway技术构建梅花鹿Tβ10基因的原核表达载体—pDEST17-Tβ10并诱导表达,对融合蛋白进行功能检测及多克隆抗体制备。结果表明:1)获得了190bp Tβ10基因开放阅读框序列,并获得重组表达载体pDEST17-Tβ10。2)pDEST17-Tβ10在宿主BL21-SI中诱导表达条件为0.3mol/L NaCL诱导2h,获得产物的最终浓度为0.50mg/mL。3)制备的Tβ10蛋白多克隆抗体血清效价在105之上,该抗体可以特异性结合天然和原核表达的Tβ10蛋白。4)离体检测发现,Tβ10融合蛋白一方面可以促进人脐静脉内皮细胞增殖,另一方面可以抑制鹿茸前成软骨区细胞的增殖。综上所述,本研究获得了具有生物活性的Tβ10融合蛋白,并制备了高度特异性的梅花鹿Tβ10蛋白多克隆抗体,为深入研究Tβ10基因的生物学功能奠定了基础。 展开更多

关键词 梅花鹿 THYMOSIN BETA 10 原核表达 鹿茸 多克隆抗体

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鹿茸干细胞内[Na^+]测定及其影响因素鉴定

15

作者 赵海平 陈广信 +3 位作者 孙红梅 褚文辉 张伟 李春义 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期78-85,共8页

为探索鹿茸的形态发生与鹿茸干细胞(包括发生干细胞和再生干细胞)内[Na^+]的关系有关,以鹿茸干细胞为模型,研究不同干性的哺乳动物干细胞内[Na^+]的差异,并鉴定引起这种差异的电压门控性钠离子通道(NaV)因素。采集并培养具有不同干性的... 为探索鹿茸的形态发生与鹿茸干细胞(包括发生干细胞和再生干细胞)内[Na^+]的关系有关,以鹿茸干细胞为模型,研究不同干性的哺乳动物干细胞内[Na^+]的差异,并鉴定引起这种差异的电压门控性钠离子通道(NaV)因素。采集并培养具有不同干性的梅花鹿鹿茸干细胞,包括生茸区骨膜细胞(AP细胞,鹿茸发生干细胞)和角柄骨膜细胞(PP细胞,鹿茸再生干细胞,其干性低于AP细胞),以鹿普通脸部骨膜细胞(FP细胞)作为对照,并采用CoroNa染色方法,通过荧光强度来分析不同类型细胞内[Na^+]的差异,结合PCR方法鉴定转录水平上NaV基因的差异,并分别用睾酮和MS-222对细胞进行处理,观测其对细胞内[Na^+]的影响。结果表明:鹿茸干细胞内[Na^+]高于FP细胞,其中AP细胞内[Na^+]高于PP细胞;NaV1.1基因在AP细胞中特异性转录;睾酮对这3种细胞内[Na^+]水平没有显著影响;但是,MS-222处理能够在一定程度上降低细胞内[Na^+]。本研究发现:鹿茸干细胞内[Na^+]与其干性一致,干性高的AP细胞内[Na^+]也相对较高;NaV1.1基因在转录水平上的差异,可能是造成AP细胞内[Na^+]高的主要原因;干扰NaV的MS-222能够在一定程度上降低细胞内[Na^+]。说明哺乳动物器官的发生和再生可能与低等动物器官上的发现类似,都与细胞内[Na^+]有关。 展开更多

关键词 鹿茸干细胞 发生和再生 细胞内钠离子浓度 电压门控性钠离子通道

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