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电离辐射对转染pcDNA3.1-Egr-1-AIF_(△1-480)质粒的MCF-7细胞增殖和侵袭能力的影响
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作者 齐亚莉 刘洪彬 +2 位作者 谢忠伟 刘彦军 王剑锋 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期929-932,I0001,共5页
目的:探讨辐射增强靶向截短型凋亡诱导因子(AIFΔ1-480)对MCF-7细胞增殖和侵袭能力的影响,阐明其提高肿瘤基因-放射治疗的可能性。方法:人乳腺癌MCF-7细胞经质粒转染早期生长反应1(Egr-1)介导的AIFΔ1-480重组表达载体pcDNA3.1-Egr-1-AI... 目的:探讨辐射增强靶向截短型凋亡诱导因子(AIFΔ1-480)对MCF-7细胞增殖和侵袭能力的影响,阐明其提高肿瘤基因-放射治疗的可能性。方法:人乳腺癌MCF-7细胞经质粒转染早期生长反应1(Egr-1)介导的AIFΔ1-480重组表达载体pcDNA3.1-Egr-1-AIFΔ1-480(pE-AIFΔ1-480),2Gy X射线照射后24h,分别采用MTT法和Transwell侵袭实验检测细胞增殖和侵袭能力。实验分为正常对照组、pcDNA3.1组(只转染pcDNA3.1质粒)、pE-AIFΔ1-480组(转染pE-AIFΔ1-480质粒)、2Gy X线照射组和pE-AIFΔ1-480+2Gy X线照射组。结果:质粒转染并经2Gy X线照射后,正常对照组、pcDNA3.1组和pE-AIFΔ1-480质粒组细胞生长较快,且增殖规律基本一致。与正常对照组比较,2Gy X线照射组和pE-AIFΔ1-480+2Gy X线照射组细胞增殖能力显著降低(P<0.05),且以pE-AIFΔ1-480+2Gy X线照射组降低更明显,从12h开始较2Gy X线照射组明显降低(P<0.05)。正常对照组、pcDNA3.1组和pE-AIFΔ1-480组穿过基底膜细胞数基本一致,而2Gy X线照射组和pE-AIFΔ1-480+2Gy照射组穿过基底膜细胞较正常对照组明显减少(P<0.05或P<0.01),并且pE-AIFΔ1-480+2Gy照射组穿过基底膜的细胞数较2Gy照射组减少更明显(P<0.01)。结论:AIFΔ1-480和电离辐射均能抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖和侵袭,二者具有协同作用,并且Egr-1启动子能增强辐射条件下的抑制效果。 展开更多
关键词 早期生长反应1 截短型凋亡诱导因子 细胞增殖 侵袭 电离辐射
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pEgr1-TRAIL重组质粒联合电离辐射对乳腺癌MCF-7细胞死亡受体通路相关基因和蛋白表达的影响
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作者 胡志宏 赵大力 +5 位作者 谢忠伟 王梦莹 胡景坤 龚守良 刘扬 齐亚莉 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期419-423,共5页
目的:将Egr1-TRAIL重组质粒转染人乳腺癌MCF-7细胞且加X线照射,探讨MCF-7细胞中死亡受体通路相关基因和蛋白表达的变化。方法:将MCF-7细胞分为对照组、空质粒组、pEgr1-TRAIL质粒组、4.0Gy X射线组、空质粒+4.0Gy X射线组和pEgr1-TRAIL+... 目的:将Egr1-TRAIL重组质粒转染人乳腺癌MCF-7细胞且加X线照射,探讨MCF-7细胞中死亡受体通路相关基因和蛋白表达的变化。方法:将MCF-7细胞分为对照组、空质粒组、pEgr1-TRAIL质粒组、4.0Gy X射线组、空质粒+4.0Gy X射线组和pEgr1-TRAIL+4.0Gy X射线组。Real-time PCR法检测各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6mRNA表达水平;Western blotting法检测各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6蛋白相对表达水平。结果:经4.0Gy X射线照射后4h,与对照组比较,各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6mRNA表达水平升高(P<0.01),8h达最高值,之后开始降低,到24h恢复到照射前水平;各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6 mRNA表达由高到低的顺序为pEgr1-TRAIL+4.0Gy X射线组>空质粒+4.0Gy X射线组>pEgr1-TRAIL质粒组>空质粒组>4.0Gy X射线组>对照组,其中pEgr1-TRAIL+4.0Gy X射线组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6mRNA表达水平明显高于其他各组(P<0.01)。MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6蛋白在照射后6h开始表达,12h达高峰,48h后细胞中DR4、caspase-9和caspase-6蛋白表达水平仍高于6h时蛋白表达水平。与对照组比较,其他各组MCF-7细胞中蛋白相对表达水平由高到低的顺序为pEgr1-TRAIL+4.0Gy X射线组>空质粒+4.0Gy X射线组>4.0Gy X射线组>pEgr1-TRAIL质粒组>空质粒组>对照组,其中pEgr1-TRAIL+4.0Gy X射线组MCF-7细胞中蛋白相对表达水平明显高于其他各组。结论:pEgr1-TRAIL重组质粒联合放疗对MCF-7细胞具有杀伤和诱导凋亡的作用,其效果优于单纯质粒或单纯照射。 展开更多
关键词 pEgr1-TRAIL重组质粒 电离辐射 MCF-7细胞 死亡受体通路
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