单宁酸对糖尿病模型大鼠肾脏氧化应激水平及炎性因子表达的抑制作用 被引量：3

1

作者 魏海峰 李才 +4 位作者 刘磊 芦小单 米旭光 谭岩 方艳秋 《中国医药》 2014年第10期1479-1484,共6页

目的 观察单宁酸对糖尿病模型大鼠抗氧化能力的影响及对机体微炎症状态的改善作用.方法 选择6周龄健康雄性Wistar大鼠68只,随机选取其中8只作为正常对照组,其余60只给予高糖高脂饲料喂养4周后以链脲佐菌素（STZ）按52 mg/kg单次腹腔注... 目的 观察单宁酸对糖尿病模型大鼠抗氧化能力的影响及对机体微炎症状态的改善作用.方法 选择6周龄健康雄性Wistar大鼠68只,随机选取其中8只作为正常对照组,其余60只给予高糖高脂饲料喂养4周后以链脲佐菌素（STZ）按52 mg/kg单次腹腔注射制造糖尿病大鼠模型,造模成功的大鼠进一步随机分为模型组、氨基胍组、单宁酸低剂量组、单宁酸高剂量组,各15只.氨基胍组及单宁酸低、高剂量组分别腹腔注射氨基胍40 mg/（kg·d）及单宁酸[20、30 mg/（kg·d）],正常对照组和模型组给予0.9％氯化钠注射液[30 mg/（kg·d）],10周后处死大鼠取材.化学比色法检测各组大鼠血清及肾皮质丙二醛含量及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性;酶联免疫吸附测定法检测肾组织匀浆8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量、血清C反应蛋白（CRP）水平;免疫组织化学检测肾组织细胞间黏附分子1（ICAM-1）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的蛋白表达,逆转录-聚合酶链反应检测肾组织ICAM-1、MCP-1 mRNA表达.结果 单宁酸低、高剂量组大鼠血清丙二醛含量明显低于模型组[（23.5±8.5）、（19.8±5.3） μmol/L比（35.5±14.6） μmol/L]（P＜0.05或P＜0.01）,GSH-Px、总SOD及CAT活性明显高于模型组[GSH-Px：（295 ±58）、（322±52） U/L比（232 ±72） U/L,总SOD：（75±13）、（86±15） U/ml比（49±13） U/ml,CAT：（6.9±2.2）、（7.2±2.9） U/ml比（3.7±1.4） U/ml]（P＜0.05或P＜0.01）;单宁酸低、高剂量组大鼠肾组织匀浆丙二醛含量明显低于模型组[（344±120）、（269±52） μmol/L比（464±62） μmol/L]（P＜0.05或P＜0.01）;单宁酸高剂量组GSH-Px活性明显高于模型组[（32 ±8）U/L比（17±4） U/L]（P＜0.01）;单宁酸低剂量组总SOD活性明显高于模型组[（23±4）U/ml比（17±4） U/ml] （P＜0.05）;单宁酸高剂量组大鼠肾组织8-O 展开更多

关键词 糖尿病肾病 单宁酸 氧化应激 微炎症 8-羟基脱氧鸟苷

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单宁酸对高糖和糖化终末产物培养条件下肾小球系膜细胞氧化应激及微炎症状态的改善作用 被引量：2

2

作者 魏海峰 李才 +2 位作者 方艳秋 魏雁虹 谭岩 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1007-1012,I0004,共7页

目的:探讨单宁酸对肾小球系膜细胞(GMC)的作用,从氧化应激及微炎症角度阐明单宁酸改善糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法:体外培养GMC,分别用高浓度葡萄糖(30mmol·L-1)及糖化终末产物(AGEs)牛血清白蛋白(BSA,250mg·L-1)处理,正... 目的:探讨单宁酸对肾小球系膜细胞(GMC)的作用,从氧化应激及微炎症角度阐明单宁酸改善糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法:体外培养GMC,分别用高浓度葡萄糖(30mmol·L-1)及糖化终末产物(AGEs)牛血清白蛋白(BSA,250mg·L-1)处理,正常糖培养及不含糖的BSA处理的细胞作为相应对照组,在高糖或AGEs处理的同时采用不同浓度单宁酸(10、20、40和80μmol·L-1)进行干预,培养48h后检测细胞培养上清中丙二醛(MDA)水平及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,ELISA法检测细胞培养上清中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平,免疫组织化学法检测GMC中细胞间黏附分子1(ICAM-1)蛋白表达,RT-PCR法检测GMC中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和ICAM-1mRNA的表达水平。结果:与高糖组和AGEs组比较,单宁酸处理组MDA水平明显降低(P<0.05),GSH-Px、SOD及CAT活性明显升高(P<0.05或P<0.01),GMC培养上清中8-OHdG水平明显降低(P<0.05)。与高糖组和AGEs组比较,40和80μmol·L-1单宁酸组ICAM-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与高糖组比较,单宁酸组MCP-1和ICAM-1mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。结论:单宁酸可保护GMC免受氧化及炎症介质的损伤,从而延缓和改善DN的肾小球病变。 展开更多

关键词 单宁酸 糖尿病肾病 氧化应激 微炎症 8-羟基脱氧鸟苷

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体外受精-胚胎移植失败患者心理弹性与应对方式的相关性研究 被引量：13

3

作者 朴丽 丛云凤 +1 位作者 杨蕊 陈可欣 《中华现代护理杂志》 2016年第26期3721-3726,共6页

目的：调查体外受精-胚胎移植失败患者住院期间心理弹性与应对方式的相关性,为制定针对性干预措施提供科学的理论依据。方法采取横断面研究,便利抽样法选取妇科体外受精-胚胎移植失败患者225例,收集其一般人口学资料,并使用心理弹性量表... 目的：调查体外受精-胚胎移植失败患者住院期间心理弹性与应对方式的相关性,为制定针对性干预措施提供科学的理论依据。方法采取横断面研究,便利抽样法选取妇科体外受精-胚胎移植失败患者225例,收集其一般人口学资料,并使用心理弹性量表（ CD-RIS）和医学应对量表（ MCMQ）对其心理弹性及医学应对方式进行评估。结果体外受精-胚胎移植失败患者心理弹性平均分为（66.79±14.27）分、应对方式平均分为（44.77±5.61）分。心理弹性在民族、不孕原因、学历、移植失败次数、不孕类型以及住院原因等方面比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。患者应对方式中体外受精-胚胎移植失败患者心理弹性总分与应对方式总分呈正相关（r＝0.377,P〈0.01）,各维度间除乐观维度与回避维度无相关关系外,其他各维度之间均有相关性（ P〈0.01）。结论体外受精-胚胎移植失败的不孕症患者心理弹性与应对方式存在相关性,医护人员应关注并了解患者的心理弹性水平,通过针对性地干预,提高患者的心理弹性,并且帮助患者建立有效的应对方式。 展开更多

关键词 弹性 心理 不孕症 体外受精-胚胎移植 应对方式

原文传递

紫薯花青素抗结肠癌作用及其诱导细胞凋亡机制 被引量：7

4

作者 陈伟莉 张晨 +2 位作者 张旭浩 刘冬影 赵玺 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期785-789,I0005,共6页

目的:探讨紫薯中原花青素(PCI)对人结肠癌细胞(HCT-116)的细胞毒性作用,阐明其诱导细胞凋亡的机制。方法:取处于对数生长期HCT-116细胞和人成纤维细胞HF-91随机分为对照组(PBS组)、阳性药组[25mg·L-1顺铂(DDP)]和PCI组(终浓度分别... 目的:探讨紫薯中原花青素(PCI)对人结肠癌细胞(HCT-116)的细胞毒性作用,阐明其诱导细胞凋亡的机制。方法:取处于对数生长期HCT-116细胞和人成纤维细胞HF-91随机分为对照组(PBS组)、阳性药组[25mg·L-1顺铂(DDP)]和PCI组(终浓度分别为25、50和100mg·L-1)。采用CCK8法检测细胞增殖抑制率,AO/EB法荧光显微镜观察细胞凋亡情况,流式细胞术检测JC-1线粒体膜电位变化,qPCR法检测p53和caspase-3mRNA表达水平。结果:与DDP组比较,100mg·L-1 PCI组HCT-116细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05),各浓度PCI组HF-91细胞增殖抑制率明显降低(P<0.05),且呈浓度依赖性。与DDP组比较,50和100mg·L-1 PCI组HCT-116细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与对照组比较,DDP组和不同浓度PCI组HCT-116细胞中caspase-3和p53 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05);与DDP组比较,不同浓度PCI组HCT-116细胞中caspase-3mRNA表达水平均明显升高(P<0.05),100mg·L-1 PCI组HCT-116细胞中p53mRNA表达水平明显升高(P<0.05),且呈浓度依赖性。结论:紫薯花青素对消化系统肿瘤细胞具有较强的毒性作用,而对正常细胞毒性较小。 展开更多

关键词 紫薯 花青素 结肠肿瘤 细胞凋亡

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儿童哮喘相关蛋白靶标筛选 被引量：3

5

作者 卢洪华 刘丽 +1 位作者 常明 华树成 《中国实验诊断学》 2013年第12期2166-2169,共4页

目的采用蛋白质组学方法,筛选儿童哮喘诊断相关的蛋白靶标。方法使用二维差异凝胶电泳技术(2D-DIGE),分离及筛选稳定期哮喘儿童48例及12例健康儿童血浆蛋白,筛选蛋白进一步经基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱(MALDITOF/TOF MS)进行... 目的采用蛋白质组学方法,筛选儿童哮喘诊断相关的蛋白靶标。方法使用二维差异凝胶电泳技术(2D-DIGE),分离及筛选稳定期哮喘儿童48例及12例健康儿童血浆蛋白,筛选蛋白进一步经基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱(MALDITOF/TOF MS)进行鉴定。组间比较采用独立样本t检验。结果通过蛋白质组学分析,组间共筛选出32个差异蛋白(P<0.05),13个蛋白点经质谱鉴定,代表了5种已知蛋白及2种未知蛋白,分别为抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、α2巨球蛋白(A2M)、补体C3、补体C4a及IGKGIgkappa。其中AT-Ⅲ在哮喘组表达高于对照组(P<0.05);补体C3、A2M在对照组高于哮喘组(P<0.05)。结论通过蛋白质组学方法发现了儿童哮喘病情相关系列蛋白靶标,AT-Ⅲ、A2M、补体C3可能作为未来辅助诊断儿童哮喘的系列蛋白靶标。 展开更多

关键词 哮喘 儿童 蛋白质组学 生物标志物

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不同运动负荷对老龄大鼠认知能力及海马组织VEGF/VEGI表达的影响 被引量：2

6

作者 李静 刘忠民 +2 位作者 李海军 王永良 郑妍 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期572-578,共7页

目的:检测不同运动负荷对老龄大鼠认知能力的影响并探讨其可能的机制。方法:40只16月龄雄性Wistar大鼠随机分为4组:即对照组(不游泳)、小负荷组(游泳15 min)、中负荷组(游泳30 min)和大负荷组(游泳60 min)。各负荷组大鼠经8周无负重游... 目的:检测不同运动负荷对老龄大鼠认知能力的影响并探讨其可能的机制。方法:40只16月龄雄性Wistar大鼠随机分为4组:即对照组(不游泳)、小负荷组(游泳15 min)、中负荷组(游泳30 min)和大负荷组(游泳60 min)。各负荷组大鼠经8周无负重游泳训练后,进行八臂迷宫实验观察各组大鼠的行为学表现;运用实时定量PCR和免疫组化实验检测各组大鼠海马神经组织(VEGF)、血管内皮生长抑制因子(VEGI)的表达情况。结果:(1)与对照组相比,大负荷组大鼠的参考记忆错误次数和工作记忆错误次数均显著增多(P <0. 05,P <0.01);中负荷组大鼠各检测指标与对照组相比无统计学差异(P> 0. 05);小负荷组大鼠的工作记忆错误次数和觅食完成时间均显著降低(P <0. 05)。(2)与对照组相比,小负荷组大鼠海马组织VEGF mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P <0. 01),VEGI mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P <0. 05,P <0. 001);大负荷组大鼠海马组织VEGF mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P <0. 01,P <0. 001),VEGI mRNA和蛋白表达水平均上调(P <0. 01,P <0. 001);中等负荷组大鼠海马神经组织VEGF和VEGI mRNA和蛋白的表达水平与对照组相比无统计学差异(P> 0. 05)。结论:小负荷运动有利于改善老龄大鼠的认知能力,中等负荷对此改变不大,而大负荷运动则对于老龄大鼠的认知能力具有损伤作用。其机制可能为小负荷运动能够上调老龄大鼠海马神经组织VEGF表达、下调VEGI表达,促进血管的新生,进而改善海马神经元的增殖;大负荷运动组则表现出了相反的影响趋势。 展开更多

关键词 老龄大鼠 海马组织 认知能力 运动负荷 血管内皮生长因子 血管内皮抑制因子

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全身亚低温联合人脐带血间充质干细胞移植改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后认知障碍和能量衰竭的机制研究 被引量：1

7

作者 祝巍 王立君 +9 位作者 沈文生 王思思 李颖 李雨静 王静竹 高燕 方聪 赵寒阳 孙秀红 孙智勇 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第18期13-24,共12页

目的探究全身亚低温联合人脐带血间充质干细胞(hCMNCs)移植改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后认知障碍和能量衰竭的机制。方法7日龄新生SD乳鼠330只。随机分为11组,每组30只。空白对照组(A组)、HIBD常温组(B组)、HIBD亚低温持续72 h... 目的探究全身亚低温联合人脐带血间充质干细胞(hCMNCs)移植改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后认知障碍和能量衰竭的机制。方法7日龄新生SD乳鼠330只。随机分为11组,每组30只。空白对照组(A组)、HIBD常温组(B组)、HIBD亚低温持续72 h组(C组)、HIBD亚低温24 h干细胞移植组(D组)、HIBD亚低温48 h干细胞移植组(E组)、HIBD亚低温72 h移植组(F组)、HIBD亚低温24 h后持续3 d移植干细胞(G组)、HIBD 24 h干细胞移植组(H组)、HIBD 48 h干细胞移植组(I组)、HIBD 72 h干细胞移植组(J组)、HIBD 24 h、48 h、72 h干细胞移植组(K组)。乳鼠生长的第10天、第21天和第35天对其进行称重;通过Morris水迷宫实验检测乳鼠学习和记忆能力,超微电镜观察分析乳鼠脑组织神经元细胞及突触超微结构的变化,苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织病理学变化,酶联免疫吸附试验检测乳鼠脑组织炎症因子和干细胞分化标记蛋白含量,免疫荧光染色检测脐带CD24和CD29阳性表达率,荧光显微镜测量线粒体膜电位。结果A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K组乳鼠生长第10天、第21天和第35天体重比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:①不同时间点乳鼠体重有差异(F=13.285,P=0.000),各组乳鼠第21天与第35天体重比较,差异有统计学意义(P<0.05);②各组乳鼠体重有差异(F=20.097,P=0.000),B组乳鼠体重较A组降低(P<0.05),C~K组乳鼠体重较B组升高(P<0.05),G、I组乳鼠体重较B、C、D、E、F、H、J、K组均升高(P<0.05),且G组与I组乳鼠体重比较,差异无统计学意义(P>0.05);③各组乳鼠体重变化趋势有差异(F=28.712,P=0.000)。C~F组3种反射(悬崖调转反射、阴性趋地性、步态反射)时间较A组延长(P<0.05),但较B组缩短(P<0.05);C组3种反射时间较A、D~J组延长(P<0.05);G~K组3种反射时间与A组比较,差异无统计学意义(P>0.05);C~F组3种反射时间较G~K组延长(P<0.05)。HE染色结果显示,与A组比较, 展开更多

关键词 亚低温 干细胞移植 脑缺血损伤 能量衰竭 乳鼠

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新型纳米碳对行腹腔镜膀胱癌根治术患者盆腔淋巴结的示踪效果及其安全性评价 被引量：1

8

作者 马佳男 高宝山 +3 位作者 肖平 张永瑞 吴大威 安伟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期582-586,I0004,共6页

目的:探讨新型纳米碳(卡纳琳)在腹腔镜膀胱癌根治术(RC)中对患者盆腔淋巴结的示踪效果,阐明其在精准外科治疗中应用的意义。方法:依据术前是否使用卡纳琳将44例行腹腔镜RC患者分为示踪剂组(n=22)和对照组(n=22),2组患者均行腹腔镜下RC... 目的:探讨新型纳米碳(卡纳琳)在腹腔镜膀胱癌根治术(RC)中对患者盆腔淋巴结的示踪效果,阐明其在精准外科治疗中应用的意义。方法:依据术前是否使用卡纳琳将44例行腹腔镜RC患者分为示踪剂组(n=22)和对照组(n=22),2组患者均行腹腔镜下RC联合标准盆腔淋巴结清扫术(LND)。收集并比较2组患者有效性评价指标和安全性评价指标。有效性评价指标包括示踪剂组患者术中淋巴结黑染情况、检出淋巴结总数、淋巴结黑染数、淋巴结黑染率、阳性淋巴结数和手术时间;安全性评价指标包括术中出血量和围手术期相关并发症发生率。结果:示踪剂组患者淋巴结染色效果确切,围手术期未见示踪剂相关不良反应及并发症。与对照组比较,示踪剂组患者淋巴结清除率和检出率均升高(P<0.01),各例患者淋巴结黑染率均高于50%,甚至可达85%;2组患者阳性淋巴结检出数、手术时间、出血量和围手术期相关并发症发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在腹腔镜RC中,应用卡纳琳进行盆腔淋巴结示踪安全且无不良反应,卡纳琳对提高淋巴结的术中清扫率和术后病理检出率均具有重要意义。 展开更多

关键词 淋巴示踪剂 纳米碳混悬注射液 膀胱癌根治术 淋巴结清扫

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人源化小鼠模型构建和应用的研究进展 被引量：9

9

作者 陈冰 刘昊川 +5 位作者 李龙云 赵国庆 王震 杨永广 李凯 胡正 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期667-674,共8页

人源化小鼠是指带有功能性的人类基因、细胞或组织的小鼠模型,通常被用于人类疾病体内研究的活体替代模型,是利用转基因或同源重组的方法将人类基因"放置"在小鼠模型上所制备的模型,这类小鼠模型在模拟某些人类疾病时有效性... 人源化小鼠是指带有功能性的人类基因、细胞或组织的小鼠模型,通常被用于人类疾病体内研究的活体替代模型,是利用转基因或同源重组的方法将人类基因"放置"在小鼠模型上所制备的模型,这类小鼠模型在模拟某些人类疾病时有效性较高。人源化小鼠模型在艾滋病、癌症、传染病和血液病研究领域等均有广泛的应用。具有人造血免疫系统组成的人源化小鼠模型已经被证明在解码人类疾病奥秘中具有巨大的优势和广泛的应用前景。本文从免疫系统人源化小鼠模型演变的历史过程、具体的分类方法及模型的应用等几个方面进行综述。 展开更多

关键词 人源化小鼠 肿瘤 传染性疾病 自身免疫性疾病

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人抑癌基因p53与PTEN的CRISPR-Cas9导向RNA靶点筛选与效率验证

10

作者 许文舒 胡正 +1 位作者 杨永广 王晓丹 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期235-242,共8页

目的:探讨应用新兴基因编辑技术规律性成簇的间隔短回文重复序列-核酸酶系统(CRISPR-Cas9)对人体内2个抑癌基因p53与PTEN进行编辑的可行性,并通过体外检测研究其编辑效果,为原代细胞向肿瘤细胞转化及建立人源化小鼠肿瘤模型提供实验研... 目的:探讨应用新兴基因编辑技术规律性成簇的间隔短回文重复序列-核酸酶系统(CRISPR-Cas9)对人体内2个抑癌基因p53与PTEN进行编辑的可行性,并通过体外检测研究其编辑效果,为原代细胞向肿瘤细胞转化及建立人源化小鼠肿瘤模型提供实验研究工具。方法:序列分析确定p53及PTEN基因各亚型mRNA剪辑的共同外显子区域,针对该区域进行软件评分,设计选择针对p53及PTEN基因的CRISPR-Cas9导向RNA(sgRNA)靶点各2个,即p53-1、p53-2、PTEN-1和PTEN-2。构建共表达sgRNA与Cas9-P2A-GFP的CRISPR-Cas9质粒。选择处于对数生长期的293T细胞,将其分为对照组(未转染质粒的野生型293T细胞)和实验组(利用Lipofectamine 2000转染sgRNA-Cas9-P2A-GFP共表达质粒的293T细胞),流式细胞术分选实验组绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞(成功转染质粒的细胞),2周扩增培养后提取基因组DNA,PCR扩增基因组DNA包含突变位点的区段,将扩增产物凝胶电泳后胶回收,连接至pEASY-Blunt Zero克隆载体中,转化,挑取单克隆菌斑培养,提取质粒DNA测序,对比对照组与实验组测序结果后确定RNA介导的特异基因位点突变效率。结果:转染sgRNA-Cas9-P2A-GFP质粒的实验组流式细胞术分选后GFP阳性率高达82%,与分选前(4%)比较明显升高(P<0.05)。对分选培养后的细胞提取基因组PCR,其中包含p53突变位点的扩增片段长度均为612bp,而包含PTEN-1突变位点的扩增片段长度为667bp,包含PTEN-2突变位点的扩增片段长度为947bp。对比实验组基因测序结果与未经sgRNA-Cas9-P2A-GFP质粒转染的对照组野生型细胞测序结果,p53-1、p53-2和PTEN-2诱导的突变效率分别为54.5%、45.5%和33.3%。结论:针对人p53及PTEN基因设计的sgRNA p53-1、p53-2和PTEN-2能够在基因组水平较高效率地成功介导Cas9进行位点特异性的基因编辑。 展开更多

关键词 导向RNA 规律性成簇的间隔短回文重复序列 抑癌基因P53 抑癌基因PTEN 人类

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具有人红细胞重建的人源化小鼠模型构建和应用的研究进展

11

作者 范伟 杨永广 胡正 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期859-863,共5页

人源化小鼠是具有人类基因、细胞、组织和器官的小鼠。具有人造血免疫系统重建的人源化小鼠模型作为唯一能够活体研究人淋巴造血过程和人免疫应答的小动物模型,已经在感染、肿瘤、自身免疫病及异种/异体移植等领域的基础研究和药物开发... 人源化小鼠是具有人类基因、细胞、组织和器官的小鼠。具有人造血免疫系统重建的人源化小鼠模型作为唯一能够活体研究人淋巴造血过程和人免疫应答的小动物模型,已经在感染、肿瘤、自身免疫病及异种/异体移植等领域的基础研究和药物开发中得到广泛应用。然而,普通人源化小鼠的外周血循环中人红细胞的重建缺陷严重限制了其在人红细胞相关疾病(如遗传性贫血和疟疾感染等)研究中的应用。因此开发具有高水平人红细胞稳定重建的人源化小鼠模型是该领域的难点之一。本文作者从人源化小鼠模型的基本情况、模型中人红细胞重建缺失的主要原因和制备具有人红细胞重建的人源化小鼠模型的可行方法等方面进行综述,并对其应用进行阐述。 展开更多

关键词 人源化小鼠 红细胞 巨噬细胞 补体 疟疾 贫血

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基于piggyBac转座子系统构建长期表达人细胞因子的免疫缺陷小鼠模型

12

作者 吕亚楠 范伟 胡正 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期176-181,共6页

目的:探讨表达人白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素3 (IL-3)、白细胞介素15 (IL-15)、干细胞生长因子(SCF)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因的piggyBac (PB)转座子系统在免疫缺陷小鼠体内的长效表达情况,为改善人源化小鼠模型... 目的:探讨表达人白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素3 (IL-3)、白细胞介素15 (IL-15)、干细胞生长因子(SCF)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因的piggyBac (PB)转座子系统在免疫缺陷小鼠体内的长效表达情况,为改善人源化小鼠模型中人免疫细胞的重建提供简单长效的新方法。方法:构建含有绿色荧光蛋白(GFP)基因的PB转座子质粒(PB-GFP),构建含有人IL-6、IL-3、IL-15、SCF和GM-CSF基因的PB转座子质粒(PB-5F)。293T细胞分为阴性对照组(未转染质粒)、阳性对照组(转染pLVTHM质粒)、瞬时转染组(转染PB-GFP质粒)和稳定转染组[共同转染PB-GFP和转座酶质粒(super-PB)]。转染后每3d,采用流式细胞术检测各组细胞中GFP阳性(GFP+)细胞百分率。将NOD.Cg-Prkdcscid IL2rgtm1Wjl/SzJ (NCG)小鼠分为瞬时转染组和稳定转染组,瞬时转染组小鼠尾静脉高压注射PB-5F质粒,稳定转染组小鼠尾静脉高压注射PB-5F质粒和super-PB质粒。小鼠尾静脉高压注射后1、3、5和9d及随后每周1次采血分离血清,ELISA法检测各组NCG小鼠血清中IL-6、IL-3、IL-15、SCF和GM-CSF水平。结果:PB-GFP转染293T细胞30d后,稳定转染组GFP+细胞百分率(4.61%±0.42%)明显高于阳性对照组(0.58%±0.05%)和瞬时转染组(0.86%±0.10%)(P<0.05)。NCG小鼠尾静脉高压注射PB-5F质粒,注射后第30天,稳定转染组小鼠血清中IL-6、IL-15和GM-CSF水平均高于瞬时转染组(P=0.048,P=0.051,P=0.045);注射后第60天,稳定转染组小鼠血清中仍能检测到IL-6、IL-15和GM-CSF。结论:体外验证了PB转座子系统的长效表达,成功构建了具有人IL-6、IL-3、IL-15、SCF和GM-CSF基因的PB转座子载体的质粒,建立了长效稳定表达人IL-6、IL-15和GM-CSF的免疫缺陷小鼠模型。 展开更多

关键词 免疫系统人源化小鼠 白细胞介素6 白细胞介素3 白细胞介素15 干细胞生长因子 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 转座子

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