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薯蓣皂苷元对人低分化胃腺癌细胞株生长的抑制作用 被引量：6
1
作者 李晶华 李春爱 +4 位作者 霍锐 李兆良 韩中明 王本祥 周秋丽 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期198-200,共3页
目的 :观察薯蓣皂苷元 (diosgenin,Dio)对人低分化胃腺癌细胞株 (MGC- 80 3)的细胞分裂和集落形成的影响 ,初步探讨其杀伤肿瘤细胞的机制。方法 :采用四唑蓝 (MTT)比色法、平板集落形成实验以及[3H]- Td R掺入实验。结果 :MTT法检测 Di... 目的 :观察薯蓣皂苷元 (diosgenin,Dio)对人低分化胃腺癌细胞株 (MGC- 80 3)的细胞分裂和集落形成的影响 ,初步探讨其杀伤肿瘤细胞的机制。方法 :采用四唑蓝 (MTT)比色法、平板集落形成实验以及[3H]- Td R掺入实验。结果 :MTT法检测 Dio作用 2 4、 4 8、 72 h的半数抑制浓度 (IC50 )为 5 6 .2 90、 2 7.837、1 7.72 3mg· L- 1 ;平板集落形成实验显示 Dio半数集落形成抑制浓度为 5 .4 86 mg· L- 1 ;Dio在较低浓度 (3.75 0和 7.5 0 0 mg· L- 1 )下 ,可直接抑制 MGC- 80 3细胞 DNA的合成。结论 :Dio能够明显抑制 MGC- 80 展开更多
关键词 薯蓣皂甙配基 药理学 胃肿瘤 药物疗法 腺癌/药物疗法 细胞分化 集落形成单位测定
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电离辐射对小鼠EL-4淋巴瘤细胞P21蛋白表达的影响 被引量：6
2
作者 闫风琴 王建秋 +1 位作者 付士波 鞠桂芝 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期514-516,共3页
目的阐明电离辐射对小鼠EL-4淋巴瘤细胞P21蛋白表达的影响。方法采用免疫细胞化学方法和流式细胞术检测X射线照射对P21蛋白表达的时程和量效变化的影响。结果时程实验结果显示,离体培养的EL-4细胞经4.0Gy X射线照射后,P21蛋白表达在2～7... 目的阐明电离辐射对小鼠EL-4淋巴瘤细胞P21蛋白表达的影响。方法采用免疫细胞化学方法和流式细胞术检测X射线照射对P21蛋白表达的时程和量效变化的影响。结果时程实验结果显示,离体培养的EL-4细胞经4.0Gy X射线照射后,P21蛋白表达在2～72h(免疫细胞化学方法检测)和8～72h(流式细胞术检测)明显增高(分别为P<0.01、P<0.001)。量效实验结果显示,X射线照射后24h,P21蛋白表达在0.5～6.0Gy(免疫细胞化学方法检测)和1.0～4.0Gy(流式细胞术检测)明显增高(分别为P<0.05、P<0.01、P<0.001)。结论X射线能诱导P21蛋白表达增高,在一定范围内存在时间和剂量依赖关系。 展开更多
关键词 电离辐射 EL-4淋巴瘤细胞 P21 蛋白表达
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VEGF基因修饰兔骨髓间充质干细胞的研究(英文) 被引量：4
3
作者 徐松柏 赵刚 +3 位作者 赵红光 许侃 于洪泉 候宜 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2387-2390,共4页
背景：血管内皮生长因子的应用是组织工程组织血管化的有效手段。但是,血管内皮生长因子价格昂贵,并且半衰期非常短,很难在体内保持有效的作用浓度。故本实验将其转入组织工程的种子细胞——骨髓间充质干细胞中,使骨髓间充质干细胞能够... 背景：血管内皮生长因子的应用是组织工程组织血管化的有效手段。但是,血管内皮生长因子价格昂贵,并且半衰期非常短,很难在体内保持有效的作用浓度。故本实验将其转入组织工程的种子细胞——骨髓间充质干细胞中,使骨髓间充质干细胞能够有效地分泌血管内皮生长因子,从而达到促进血管生成的目的。目的：探讨应用人血管内皮生长因子165进行基因修饰的可行性,为血管化组织工程组织的构建及缺血性疾病的治疗奠定实验基础。设计：观察对比实验。单位：吉林大学第一医院和吉林大学再生医学科学研究所。材料：实验于2003-06/2004-08在吉林大学再生医学科学研究所吉林大学重点实验室（生物安全实验室二级）完成。健康新西兰大耳白兔由吉林大学实验动物中心提供。4.0～5.0月龄,体质量215～315kg,雌雄兼用,实验过程中对动物处置均在麻醉状态、无菌条件下完成,符合动物伦理学标准。实验药品及试剂：HamF12培养基（GIBCO公司）,噻唑蓝（MTT）（Sigma公司）,pLXSN-KDRp-VEGF165与pcDNA3.0载体由本实验室自备,ELISA检测试剂盒（深圳晶美生物公司）,感受态大肠杆菌DH5α、限制性内切酶BamHⅠ、XhoⅠ、HandⅢ、EcoRⅠ和标准DNA分子（Promega公司）。方法：分离、培养新西兰大白兔骨髓间充质干细胞。构建并鉴定pcDNA3.0-VEGF165真核表达载体,利用脂质体介导其转染骨髓间充质干细胞,采用ELISA方法检测转基因骨髓间充质干细胞的人血管内皮生长因子蛋白表达,MTT法检测转基因骨髓间充质干细胞表达物对血管内皮细胞增殖活性的影响,设单纯培养骨髓间充质干细胞及pcDNA3.0转染骨髓间充质干细胞组为对照组。主要观察指标：①重组质粒双酶切和基因测序分析。②ABC-ELISA法观察质粒转染后的骨髓间充质干细胞的人血管内皮细胞生长因子蛋白表达。③通过MTT法检测人� 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 血管内皮生长因子 基因 转染 骨髓祖代细胞 组织工程
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中国长白山乌苏里蝮蛇降纤酶基因克隆和结构分析 被引量：5
4
作者 孙德军 闫琪 +3 位作者 杨春伟 杨同书 颜伟群 侯立中 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期138-141,共4页
目的 :克隆乌苏里蝮蛇 ( Gloydius ussuriensis)降纤酶 ( Difibrase)基因 ,为用基因工程方法生产降纤酶打下基础。方法 :从乌苏里蝮蛇毒腺制备总 RNA,经 RT- PCR扩增、克隆和顺序测定。结果 :降纤酶 c DNA开框读码序列全长 70 2个核苷... 目的 :克隆乌苏里蝮蛇 ( Gloydius ussuriensis)降纤酶 ( Difibrase)基因 ,为用基因工程方法生产降纤酶打下基础。方法 :从乌苏里蝮蛇毒腺制备总 RNA,经 RT- PCR扩增、克隆和顺序测定。结果 :降纤酶 c DNA开框读码序列全长 70 2个核苷酸 ,编码 2 34个氨基酸 ,推测其活性中心为His41、Asp86和 Ser180 ,含有 6对二硫键。结论 :确定乌苏里蝮蛇降纤酶 c DNA顺序 ,推导出其氨基酸顺序和活性中心结构。 展开更多
关键词 乌苏里蝮蛇 降纤酶 克隆 序列分析
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PHOⅠ信号肽在毕赤酵母中引导分泌表达天然N-端rBPTI 被引量：4
5
作者 杨莉莉 贺巾超 +5 位作者 马杰 范伟全 王建秋 魏传宇 颜浩为 颜炜群 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期830-832,共3页
目的:在毕赤酵母(Pichia pastoris)中分泌表达天然N-端rBPTI。方法:将PHOⅠ/bpti基因克隆到真核表达载体pPICZα,电转化毕赤酵母菌株X-33。结果:构建了含PHOⅠ/bpti基因的表达质粒,并在X-33中分泌表达rBPTI。用胰蛋白酶抑制实验筛选出表... 目的:在毕赤酵母(Pichia pastoris)中分泌表达天然N-端rBPTI。方法:将PHOⅠ/bpti基因克隆到真核表达载体pPICZα,电转化毕赤酵母菌株X-33。结果:构建了含PHOⅠ/bpti基因的表达质粒,并在X-33中分泌表达rBPTI。用胰蛋白酶抑制实验筛选出表达rBPTI的工程菌。表达上清经阳离子交换层析分离纯化为单一组份,SDS-PAGE显示相对分子质量为6 500。结论:PHOⅠ信号肽在毕赤酵母中成功地诱导分泌表达了具有正确N-端氨基酸序列的rBPTI。 展开更多
关键词 牛胰蛋白酶抑制剂 酸性磷酸酶信号肽 毕赤酵母
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山参果汁总皂苷对大鼠离体心脏血流动力学的影响 被引量：2
6
作者 陈月 曹霞 +1 位作者 李勇 颜炜群 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期504-505,518,共3页
目的:探讨山参果汁总皂苷(WGFS)对大鼠离体工作心脏血流动力学的影响。方法:制备大鼠离体工作心脏,观察山参果汁总皂苷对心率(HR)、动脉血压(AP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张期末压(LVEDP)、左室内压最大上升及下降速率(±dp/dtmax... 目的:探讨山参果汁总皂苷(WGFS)对大鼠离体工作心脏血流动力学的影响。方法:制备大鼠离体工作心脏,观察山参果汁总皂苷对心率(HR)、动脉血压(AP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张期末压(LVEDP)、左室内压最大上升及下降速率(±dp/dtmax)的影响。结果:山参果汁总皂苷在给药后不同时间具有减慢HR,降低AP、LVSP、±dp/dtmax的作用(P<0.05或P<0.01),并呈现一定的剂量依赖关系,对LVEDP无显著影响(P>0.05)。结论:山参果汁总皂苷具有负性肌力和负性频率作用,即抑制心肌收缩和舒张功能,减慢心率、降低动脉血压。 展开更多
关键词 山参果汁总皂苷 离体工作心脏 血流动力学
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大鼠角朊细胞的无滋养层培养 被引量：2
7
作者 周余来 周宏 +3 位作者 侯立中 颜炜群 杨同书 赵轶卓 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期765-767,770,共4页
目的 :探索一种新的表皮角朊细胞 (角蛋白细胞 ,KCs)的培养方法。方法 :应用含有新生牛血清并附加多种调节因子的 DMEM- F1 2培养基 ,对大鼠表皮 KCs进行无滋养层法培养。结果 :大部分 KCs在接种后 36h贴壁 ,并有集落形成。培养至第 9... 目的 :探索一种新的表皮角朊细胞 (角蛋白细胞 ,KCs)的培养方法。方法 :应用含有新生牛血清并附加多种调节因子的 DMEM- F1 2培养基 ,对大鼠表皮 KCs进行无滋养层法培养。结果 :大部分 KCs在接种后 36h贴壁 ,并有集落形成。培养至第 9天 ,细胞接近铺满单层。结论 :采用无滋养层法培养大鼠 KCs不仅可行 ,而且具有细胞成活率高、避免滋养层细胞影响等优点。 展开更多
关键词 角蛋白细胞 细胞培养 无滋养层培养 表皮角朊细胞 大鼠 皮肤病
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角膜缘干细胞缺乏动物病理模型的建立 被引量：1
8
作者 顾国贞 王浩天 +4 位作者 谷树严 徐煌 周余来 颜炜群 王芳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期755-757,F0003,共4页
目的：研究角膜缘干细胞缺乏动物模型建立的方法，为组织工程角膜上皮的损伤移植研究奠定动物病理模型基础。方法：利用角膜缘上皮全周板层手术将实验动物兔右眼角膜缘后5mm，环绕角膜缘全周将球结膜剪开，将全板层角膜及角膜缘外5mm的... 目的：研究角膜缘干细胞缺乏动物模型建立的方法，为组织工程角膜上皮的损伤移植研究奠定动物病理模型基础。方法：利用角膜缘上皮全周板层手术将实验动物兔右眼角膜缘后5mm，环绕角膜缘全周将球结膜剪开，将全板层角膜及角膜缘外5mm的球结膜组织一同剪去，用刮刀刮去角膜上皮层。术后7、14、28d做裂隙灯检测、荧光素染色检查、PAS检测、照相，观察角膜上皮的混浊及血管化程度以确定动物模型是否成功。结果：手术1d后实验兔右眼结膜红肿，眼睑轻度肿胀；3d后生成红色肉芽组织，并伴随细小血管增生。7d后荧光素染色阳性，角膜缘全周细小血管向角膜中央逐渐长人。14d后长人角膜的结膜组织覆盖角膜。28d后细胞印迹学检查核／浆体积比为1：4～1：5，PAS染色呈阳性，成功建立角膜缘干细胞完全缺失的病理模型。结论：可通过手术法代替化学法建立角膜缘干细胞缺乏动物病理模型，本研究为角膜病的治疗奠定了实验学基础。 展开更多
关键词 角膜缘干细胞 动物模型 疾病 板层手术
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血管内皮生长因子基因在兔骨髓间充质干细胞中的转染和表达 被引量：1
9
作者 徐松柏 赵刚 +3 位作者 许侃 候宜 于洪泉 崔阳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期445-448,共4页
目的:探讨应用人血管内皮生长因子165(hVEGF165)进行基因修饰的可行性,为血管化组织工程组织的构建及缺血性疾病的治疗奠定实验基础。方法:构建pcDNA3.0-VEGF165真核表达载体,利用脂质体介导转染兔骨髓间充质干细胞(MSCs),ELISA方法检... 目的:探讨应用人血管内皮生长因子165(hVEGF165)进行基因修饰的可行性,为血管化组织工程组织的构建及缺血性疾病的治疗奠定实验基础。方法:构建pcDNA3.0-VEGF165真核表达载体,利用脂质体介导转染兔骨髓间充质干细胞(MSCs),ELISA方法检测转基因MSCs的hVEGF蛋白表达情况,MTT法检测转基因MSCs表达物对血管内皮细胞增殖活性的影响,设单纯培养MSCs及pcDNA3.0转染MSCs组为对照组。结果:成功构建hVEGF真核表达载体,并成功地将其转入MSCs中;MSCs细胞在转染pcDNA3.0-VEGF165质粒24、48和72 h后,其培养上清中hVEGF蛋白表达量均较对照组显著升高(P<0.05),至G418筛选后12代,转基因MSCs培养上清中仍有hVEGF蛋白的表达,含2%、4%、8%、16%和32%转基因细胞培养上清的培养液均明显增加血管内皮细胞的增殖率,与对照组比较,差异均具有显著性(P<0.05)。结论:hVEGF165基因成功地转染至MSCs中,并可进行有效地表达。 展开更多
关键词 内皮生长因子 基因 转染 骨髓祖代细胞 组织工程
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