植物F-box基因家族的研究进展 被引量：19

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作者 许克恒 张云彤 +3 位作者 张莹 王彬 王法微 李海燕 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期26-32,共7页

F-box基因家族是植物中最大的基因家族之一,由于其数量巨多,根据其蛋白C末端结构域的不同被分为不同的亚家族。F-box基因编码的蛋白能够调节多种多样的生命活动,如延缓植物衰老、调控植物开花以及响应生物胁迫、干旱和盐等逆境胁迫。近... F-box基因家族是植物中最大的基因家族之一,由于其数量巨多,根据其蛋白C末端结构域的不同被分为不同的亚家族。F-box基因编码的蛋白能够调节多种多样的生命活动,如延缓植物衰老、调控植物开花以及响应生物胁迫、干旱和盐等逆境胁迫。近年来,随着全基因组测序的不断完善,越来越多物种的F-box基因被分析鉴定出来。已经鉴定出功能的F-box基因编码的蛋白大多能够和结合蛋白Skp1、骨架蛋白Cullin 1及Rbx1形成SCF复合体,进而参与泛素-蛋白酶途径(UPP)而发挥作用;少部分F-box蛋白以非SCF复合体形式发挥作用。泛素-蛋白酶途径(UPP)是机体重要的调节机制之一,大多数细胞内蛋白都是经过这一途径降解。主要对其蛋白结构,作用途径以及生物学功能进行概述,探讨F-box基因参与的生命活动,旨为F-box的深入研究奠定基础。 展开更多

关键词 F-box基因 逆境胁迫 SCF复合体 泛素-蛋白酶途径(UPP)

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木质素降解菌株的分离及其降解玉米秸秆过程中产酶特点 被引量：7

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作者 郭晓威 王秀然 +6 位作者 解长睿 孙丹 陈欢 高红桃 张超 李明堂 李海燕 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1806-1816,共11页

【目的】筛选高效降解木质素的菌株,并研究其以玉米秸秆为底物时木素降解酶活性。【方法】本研究以愈创木酚培养基和苯胺蓝培养基从吉林省不同经纬度的自然朽木及腐朽玉米秸秆土壤样品中分离、筛选得到高效降解木质素的菌株,并对其形态... 【目的】筛选高效降解木质素的菌株,并研究其以玉米秸秆为底物时木素降解酶活性。【方法】本研究以愈创木酚培养基和苯胺蓝培养基从吉林省不同经纬度的自然朽木及腐朽玉米秸秆土壤样品中分离、筛选得到高效降解木质素的菌株,并对其形态学鉴定,通过ITS序列分析构建系统发育树,分析菌株的分类地位。通过秸秆固体发酵过程产生的胞外木质素酶的活性分析,选出高效秸秆降解菌。【结果】筛选出1株高效降解秸秆的真菌,对其进行形态学特征和ITS序列分析,命名为白囊耙齿菌W2(Irpex lacteus W2)。该菌株在4–8 d内产生的锰过氧化物酶(Manganese peroxidase)呈上升趋势,并且在8 d达到峰值86.31 U/mL,与黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)的最高酶活力45.86 U/mL相比,高出了88.20%(P<0.01);该菌株的漆酶(Laccase)活力8 d时达到20.60 U/mL,比对照高40.76%(P<0.05)。【结论】本研究分离到一株具有较强降解秸秆能力的真菌,初步鉴定为Irpex lacteus W2,具有较强的降解秸秆能力,其降解秸秆过程中产生较高的锰过氧化物酶与漆酶活力。 展开更多

关键词 玉米秸秆 木质素 筛选 锰过氧化物酶 漆酶

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甘露聚糖的理化特性、制备、测定和代谢途径及其应用的研究进展

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作者 王子源 李浩然 +4 位作者 甄玉国 王涛 张学峰 秦贵信 孙喆 《饲料工业》 CAS 北大核心 2024年第13期23-30,共8页

甘露聚糖是一种天然的多糖物质,广泛分布于酵母菌、植物组织中。甘露聚糖作为饲料添加剂能够增强动物体液免疫和细胞免疫的能力,保持肠道微生态平衡并改善瘤胃功能。文章分别对甘露聚糖的理化特性、制备、测定和代谢途径及其应用进行了... 甘露聚糖是一种天然的多糖物质,广泛分布于酵母菌、植物组织中。甘露聚糖作为饲料添加剂能够增强动物体液免疫和细胞免疫的能力,保持肠道微生态平衡并改善瘤胃功能。文章分别对甘露聚糖的理化特性、制备、测定和代谢途径及其应用进行了归纳和总结,以期为甘露聚糖的开发应用提供参考价值。 展开更多

关键词 甘露聚糖 理化特性 制备方法 测定方法 代谢途径 应用

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功能性寡糖的特性、代谢途径及其在反刍动物中的应用研究进展

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作者 夏元鸿 甄玉国 +3 位作者 王涛 张学峰 吴琦璐 孙喆 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第16期23-27,37,共6页

寡糖是指由糖苷键连接的2~10个单糖的糖类化合物,种类繁多,分为普通寡糖和功能性寡糖两类,具有抗菌、抗氧化、调节免疫、改善肠道菌群等多种生理功能。功能性寡糖作为饲料添加剂在反刍动物生产中发挥着重要作用,应用前景广阔。文章简要... 寡糖是指由糖苷键连接的2~10个单糖的糖类化合物,种类繁多,分为普通寡糖和功能性寡糖两类,具有抗菌、抗氧化、调节免疫、改善肠道菌群等多种生理功能。功能性寡糖作为饲料添加剂在反刍动物生产中发挥着重要作用,应用前景广阔。文章简要综述了功能性寡糖的理化性质、代谢途径及其在反刍动物中的应用,旨在为功能性寡糖在畜牧生产中的应用提供理论参考。 展开更多

关键词 寡糖 理化性质 代谢途径 反刍动物 应用

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新型植物生物反应器研究进展 被引量：6

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作者 杨晶 杜林娜 +4 位作者 王法微 高延妍 刘欣 李校堃 李海燕 《生物产业技术》 2018年第5期104-109,共6页

植物生物反应器生产重组药用蛋白的研究已经逐渐被人们所关注,其应用也越来越广泛。对几种新型的植物生物反应器生产药用蛋白的研发及现状进行了阐述,分析了几种新型植物生物反应器的优势及限制其产业化发展的因素,并对其发展前景进行... 植物生物反应器生产重组药用蛋白的研究已经逐渐被人们所关注,其应用也越来越广泛。对几种新型的植物生物反应器生产药用蛋白的研发及现状进行了阐述,分析了几种新型植物生物反应器的优势及限制其产业化发展的因素,并对其发展前景进行了展望。 展开更多

关键词 种子 胚乳 油体 叶绿体 发状根 悬浮细胞

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油莎草(Cyperus esculentus)MADS-box转录因子家族鉴定及表达分析

6

作者 王一非 门婧婕 +5 位作者 张笑笑 荆美玲 李佳 王艺瑾 王丽艳 董园园 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2024年第6期1892-1900,共9页

MADS-box基因家族与植物生长和发育调控密切相关。为揭示油莎草MADS-box家族成员组织表达模式,本研究根据油莎草茎块RNA-Seq结果,利用HMM搜索鉴定了26个家族成员,系统发育分析及保守结构域分析表明油莎草MADS-box成员主要属于MIKC型,具... MADS-box基因家族与植物生长和发育调控密切相关。为揭示油莎草MADS-box家族成员组织表达模式,本研究根据油莎草茎块RNA-Seq结果,利用HMM搜索鉴定了26个家族成员,系统发育分析及保守结构域分析表明油莎草MADS-box成员主要属于MIKC型,具有典型的MEF2类MADS结构域,在不同茎块发育时期具有7种表达模式,其中CeMADSXAL1基因在茎块发育初期高表达,推测CeMADSXAL1基因对油莎草茎块发育过程具有重要调控作用。此外,研究对CeMADSXAL1基因进行克隆,获得长度为747 bp的开放阅读框,编码249个氨基酸;亚细胞定位分析结果显示,Ce MADSXAL1蛋白主要在细胞核内表达,结果为进一步阐明油莎草MADS-box基因功能提供了理论基础。 展开更多

关键词 油莎草 MADS-box基因家族 表达分析 CeMADSXAL1 亚细胞定位

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大豆GmEPSPS1基因表达及草甘膦抗性功能分析 被引量：5

7

作者 贾惠舒 张云彤 +4 位作者 余洪宇 贺舒阳 赵维鹏 刘伟灿 李海燕 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期35-43,共9页

在田间种植大豆过程中,杂草对其产量影响很大,因此培育抗除草剂大豆新品种至关重要。在大豆中成功克隆了莽草酸途径关键酶基因GmEPSPS1,并分析了其进化关系及蛋白结构。荧光定量结果显示,在大豆不同组织中,GmEPSPS1基因在叶片中的相对... 在田间种植大豆过程中,杂草对其产量影响很大,因此培育抗除草剂大豆新品种至关重要。在大豆中成功克隆了莽草酸途径关键酶基因GmEPSPS1,并分析了其进化关系及蛋白结构。荧光定量结果显示,在大豆不同组织中,GmEPSPS1基因在叶片中的相对表达量最高;并且大豆幼苗在草甘膦胁迫处理下,GmEPSPS1基因的表达呈现应激性升高,在植物体损伤后又表达下降。在大豆发状根中过表达GmEPSPS1基因发现,在草甘膦胁迫处理下,可导致发状根中莽草酸积累程度降低,且叶片中叶绿素含量提高,说明过表达GmEPSPS1基因可削弱草甘膦导致的杀伤作用,提高植物对草甘膦的耐受性。这为培育抗除草剂大豆新品系提供了候选基因。 展开更多

关键词 大豆 GmEPSPS1基因 草甘膦 莽草酸途径

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亚麻芥未成熟胚中磷脂酶基因家族的转录组学分析 被引量：5

8

作者 李晓薇 戢舒涵 +3 位作者 赵旭 张百兵 王法微 李海燕 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期793-800,共8页

为了解磷脂酶基因家族在亚麻芥胚中的表达情况,本研究基于454测序技术对亚麻芥花后10d(DAF10)和花后20d(DAF20)的胚中磷脂酶基因家族进行筛选和分析。测序结果表明,DAF10样本和DAF20样本分别获得有效序列521 507个和310 125个,序列长度... 为了解磷脂酶基因家族在亚麻芥胚中的表达情况,本研究基于454测序技术对亚麻芥花后10d(DAF10)和花后20d(DAF20)的胚中磷脂酶基因家族进行筛选和分析。测序结果表明,DAF10样本和DAF20样本分别获得有效序列521 507个和310 125个,序列长度主要分布在341～560 bp,序列组装分别获得25 398个和23 678个Unigene,Unigene平均长度分别为630 bp和654 bp。在此基础上,筛选两个样本全部Unigene,共获得磷脂酶基因36个,其中属于磷脂酶A1基因4个、磷脂酶A2基因9个、磷脂酶C基因10个、磷脂酶D基因13个。Pathway基因功能注释显示,PLA1的4个候选基因没有注释到任何代谢通路上;PLA2中只有候选基因Unigene19110被成功注释,它在植物中主要参与甘油磷脂代谢途径和醚酯代谢途径。PLC家族中只有4个候选成员Unigene443、Unigene8071、Unigene8213和Unigene7311被成功注释,它们除参与甘油磷脂代谢和醚酯代谢之外,还在肌醇磷酸代谢途径中发挥重要作用。而PLD家族中除Unigene18630、Unigene17966和Unigene441没有代谢通路注释信息外,其他的10个成员,也都只在甘油磷脂代谢途径和醚酯代谢途径有作用。 展开更多

关键词 亚麻芥 转录组 磷脂酶 基因 代谢通路

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羊草液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因LcNHX1的克隆及功能分析 被引量：5

9

作者 李晓薇 郭嘉 +2 位作者 王鑫 王法微 李海燕 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期1-9,共9页

植物Na^+/H^+逆向转运蛋白具有调节pH值和维持细胞内Na^+平衡、减少盐胁迫对植物伤害的功能。本研究从羊草中克隆Na^+/H^+逆向转运蛋白基因LcNHX1,并对它的功能进行了初步分析。该基因全长2022bp,其中ORF区1614bp,编码537个氨基酸。LcN... 植物Na^+/H^+逆向转运蛋白具有调节pH值和维持细胞内Na^+平衡、减少盐胁迫对植物伤害的功能。本研究从羊草中克隆Na^+/H^+逆向转运蛋白基因LcNHX1,并对它的功能进行了初步分析。该基因全长2022bp,其中ORF区1614bp,编码537个氨基酸。LcNHX1蛋白具有10个跨膜区,且具有NHX蛋白的多个典型结构特征。半定量RT-PCR结果表明,盐(NaCl 400mM)、碱(NaHCO_3150mM)、盐碱(NaCl 200mM+NaHCO_3100mM)、干旱(10%PEG8000)、低温(4℃)和ABA(100μM)均能够不同程度的诱导LcNHX1基因的表达。利用Δnhx1盐敏感酵母突变体进行功能互补试验,结果发现在60mM、100mM NaCl胁迫条件下,转基因酵母Δnhx1+LcNHX1不仅回补了酵母突变株Δnhx1的盐敏感特性,并且具有更高的耐盐能力。通过比较转LcNHX1基因株系与野生型拟南芥幼苗在含有50mM NaCl和8mM NaHCO_3的MS培养基中的生长情况,发现转基因拟南芥株系具有更好的抗盐碱能力。 展开更多

关键词 羊草 NA^+/H^+逆向转运蛋白 LcNHX1基因 抗盐性

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溶磷菌Pseudomonas sp. wj1的Pst系统鉴定及pstS基因功能分析 被引量：4

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作者 杨雪 岳胜天 +3 位作者 武志海 付丽 于人杰 杨美英 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期40-48,共9页

为明确溶磷菌wj1的无机磷酸盐(Pi)的转运机制,对溶磷菌wj1磷酸盐特异性转运系统(Pst)进行生物信息学分析并与土壤中常见细菌的Pst系统进行比较,通过亚克隆构建溶磷菌wj1pstS蛋白的原核表达系统,利用钼酸铵分光光度法测定诱导表达的pstS... 为明确溶磷菌wj1的无机磷酸盐(Pi)的转运机制,对溶磷菌wj1磷酸盐特异性转运系统(Pst)进行生物信息学分析并与土壤中常见细菌的Pst系统进行比较,通过亚克隆构建溶磷菌wj1pstS蛋白的原核表达系统,利用钼酸铵分光光度法测定诱导表达的pstS蛋白对磷酸盐的结合率。结果表明:溶磷菌wj1的Pst系统是由pstS、pstC、pstA、pstB和phoU 5个基因组成,且依次分布于染色体上,这种结构与土壤中常见细菌的大多数菌属相似。溶磷菌wj1的pstS蛋白位于细胞质外,是一种具有信号肽的可溶性蛋白,其空间结构是由2个球状结构域组成。与绿脓假单胞菌的pstS蛋白结构相比,溶磷菌wj1pstS蛋白的活性中心位于两个球状结构域的裂缝中,其中有9个氨基酸参与Pi特异性结合,1个氨基酸通过疏水作用维持蛋白与Pi的结合。溶磷菌wj1pstS蛋白在大肠杆菌中过量表达后,使得重组大肠杆菌的无机磷酸盐吸收率显著提高,表明溶磷菌wj1pstS蛋白具有结合Pi的能力,但菌浓度不变时Pi浓度的增加会抑制溶磷菌wj1pstS蛋白对Pi的结合。 展开更多

关键词 溶磷菌 磷酸盐特异性转运系统 pstS蛋白 磷酸盐结合率

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逆境胁迫下红花CYP450s基因的表达与幼叶总黄酮含量的相关性分析 被引量：3

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作者 孙国庆 刘建雨 +7 位作者 吴发明 张庆宇 马鑫彤 张馨月 洪瑛琪 姚娜 杨建文 刘秀明 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期222-230,共9页

目的克隆细胞色素P450s(CYP450s)家族成员的2个基因,探究红花Carthamustinctorius幼叶在逆境胁迫下CYP450s基因的表达与红花总黄酮含量变化关系。方法以吉红1号为材料,对CYP450s家族的2个基因CYP81E8、CYP71A1进行基因克隆表达及分析。... 目的克隆细胞色素P450s(CYP450s)家族成员的2个基因,探究红花Carthamustinctorius幼叶在逆境胁迫下CYP450s基因的表达与红花总黄酮含量变化关系。方法以吉红1号为材料,对CYP450s家族的2个基因CYP81E8、CYP71A1进行基因克隆表达及分析。研究了茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)、干旱(PEG-6000)、光及暗处理4种逆境胁迫对红花总黄酮含量的影响,分析了CtCYP81E8和CtCYP71A1基因的表达与叶片总黄酮含量之间的相关性。结果 CtCYP81E8编码区序列为1014 bp,编码337个氨基酸;CtCYP71A1编码区序列为1287 bp,编码428个氨基酸。2个基因在不同胁迫条件下的表达量及总黄酮含量的变化表明:MeJA处理后,与野生型相比,叶片中的总黄酮含量均有不同程度的增加。CtCYP81E8、CtCYP71A1的表达量与总黄酮的积累量呈正相关;当采用PEG-6000处理后,CtCYP81E8处于正调控,而CtCYP71A1处于负调控状态,红花的叶片中总黄酮含量均显著增加;光胁迫下,在一定时间内总黄酮含量与CtCYP71A1基因表达量呈正相关,与CtCYP81E8基因表达量呈负相关,暗胁迫下,总黄酮含量与CtCYP81E8及CtCYP71A1基因表达趋势一致,都在一定时间内呈正相关。结论成功克隆了红花CtCYP81E8及CtCYP71A1基因。qRT-PCR分析表明,CtCYP81E8、CtCYP71A1基因可能在红花幼叶期对逆境胁迫的适应中发挥重要作用,为红花CYP450s家族基因在红花黄酮代谢合成的功能研究提供理论依据。 展开更多

关键词 红花 CYP450s基因 黄酮 逆境胁迫 基因表达 茉莉酸甲酯

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分子对接技术在研究群体感应抑制剂中的进展

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作者 周昱伽 贾宇 +2 位作者 马文敏 张昊 马红霞 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期4626-4638,共13页

在大多数致病菌中都存在群体感应系统,而群体感应抑制剂就是以此系统作为靶点,在不影响细菌生长的情况下阻断细菌生物被膜形成或抑制毒力基因表达,不易导致耐药性的产生,是一种理想的抗菌增效剂。分子对接作为虚拟筛选技术之一,其目标... 在大多数致病菌中都存在群体感应系统,而群体感应抑制剂就是以此系统作为靶点,在不影响细菌生长的情况下阻断细菌生物被膜形成或抑制毒力基因表达,不易导致耐药性的产生,是一种理想的抗菌增效剂。分子对接作为虚拟筛选技术之一,其目标具体、效率高、成本低,是药物研发的重要手段。本文重点介绍了分子对接的主要模块及其在研究群体感应抑制剂中的进展。 展开更多

关键词 分子对接 群体感应 群体感应抑制剂

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非生物胁迫下植物中CBL-CIPK信号通路研究进展 被引量：4

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作者 李洋 李晓薇 +4 位作者 徐赫韩 肖红庆 孙大千 王南 李海燕 《农业与技术》 2018年第11期7-10,共4页

植物在外界胁迫环境中能够生存得益于它们对胁迫的快速应答和体内复杂的调控机制。钙调磷酸酶B样蛋白(CBL)和CBL相互作用蛋白激酶(CIPK)信号通路是一类灵敏的Ca^(2+)信号传导网络。在众多植物中都已经鉴定出了编码CBL和CIPK的基因。本... 植物在外界胁迫环境中能够生存得益于它们对胁迫的快速应答和体内复杂的调控机制。钙调磷酸酶B样蛋白(CBL)和CBL相互作用蛋白激酶(CIPK)信号通路是一类灵敏的Ca^(2+)信号传导网络。在众多植物中都已经鉴定出了编码CBL和CIPK的基因。本文将围绕CBL/CIPK基因的表达模式和功能,非生物胁迫下植物CBL和CIPK调控网络上最新的研究发现进行综述,以期为抗逆育种提供新思路。 展开更多

关键词 钙调磷酸酶B样蛋白 CBL相互作用蛋白激酶 非生物胁迫 信号通路

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磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C基因研究进展 被引量：4

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作者 孙大千 董金晔 +4 位作者 李洋 肖红庆 徐赫韩 李海燕 王法微 《生物技术》 CAS 北大核心 2017年第1期92-97,共6页

磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C是能够水解磷脂进而生成二酰甘油和三磷酸肌醇(两种钙离子信号转导途径中的第二信使)的一种酶。在动物中研究得很透彻,含有EF手性结构域、XY催化结构域、与磷脂结合的C2结构域以及高度保守的pleckstrin同源性(PH... 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C是能够水解磷脂进而生成二酰甘油和三磷酸肌醇(两种钙离子信号转导途径中的第二信使)的一种酶。在动物中研究得很透彻,含有EF手性结构域、XY催化结构域、与磷脂结合的C2结构域以及高度保守的pleckstrin同源性(PH)域,每个结构域具有各自的相应的功能;但是植物中并不含有pleckstrin同源性(PH)域,而且在植物中发现C2结构域可以在不含有XY催化结构域和EF手型结构域情况下,单独行使结合细胞质膜的功能。近些年来,一些研究也证明了磷脂酶C在植物逆境胁迫中起着重要的调控作用。该文对磷脂酶C的结构与功能及其作用机制进行概述。 展开更多

关键词 磷脂酶C 甘油二酯 细胞质膜 信号通路

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两个大豆ERD15基因的克隆、生物信息学分析及功能初步鉴定 被引量：2

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作者 曹沙沙 吴楠 +5 位作者 汪丽萍 刘晓宇 汪炜奇 张贵峰 王法微 李晓薇 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期790-797,共8页

大豆ERD15(early responsive to dehydration 15)作为一种转录因子,能够与NRP-B启动子结合,激活NRP-B介导的细胞死亡反应。该家族包含6个成员,本文主要对其中两个成员GmERD15a和GmERD15b进行研究。通过对GmERD15a、GmERD15b基因的克隆... 大豆ERD15(early responsive to dehydration 15)作为一种转录因子,能够与NRP-B启动子结合,激活NRP-B介导的细胞死亡反应。该家族包含6个成员,本文主要对其中两个成员GmERD15a和GmERD15b进行研究。通过对GmERD15a、GmERD15b基因的克隆、生物信息学分析、组织表达分析以及在酵母体系中的抗逆性鉴定,初步探究GmERD15a和GmERD15b基因的功能。结果表明,GmERD15a基因全长378 bp,GmERD15b基因全长318 bp;GmERD15a与GmERD15c相似性最高,其次是JrERD15;GmERD15b与GmERD15f相似性最高,其次是VaERD15;在线网站分析表明GmERD15a与GmERD15b均为亲水性蛋白;GmERD15a基因在20 d的胚中表达量最高,GmERD15b基因在根中的表达量最高;GmERD15a和GmERD15b基因对干旱胁迫和盐胁迫敏感。此研究为深入研究两基因的功能和作用机理提供理论依据。 展开更多

关键词 大豆 ERD15 生物信息学分析 功能初步鉴定

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抗草甘膦转基因作物分子育种策略 被引量：3

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作者 张云彤 王瑞楠 +4 位作者 孙墨楠 贾惠舒 李晓薇 刘伟灿 李海燕 《生物技术》 CAS 2019年第3期288-293,307,共7页

杂草生长茂盛给农田经济造成了巨大的损失,而草甘膦的高效除草则有利于防治农业杂草。培育抗草甘膦作物也为农业杂草管治带来了便利。近年来,已从微生物、植物中均挖掘到了草甘膦抗性基因并用于开发抗草甘膦转基因作物,该文根据这些抗... 杂草生长茂盛给农田经济造成了巨大的损失,而草甘膦的高效除草则有利于防治农业杂草。培育抗草甘膦作物也为农业杂草管治带来了便利。近年来,已从微生物、植物中均挖掘到了草甘膦抗性基因并用于开发抗草甘膦转基因作物,该文根据这些抗性基因作用的不同机制总结了抗草甘膦转基因作物的育种策略及其利弊,并对未来抗草甘膦作物的发展方向进行讨论。 展开更多

关键词 草甘膦 作物 转基因

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猪瘟病毒表面抗原E2-Erns蛋白在拟南芥种子中的表达及抗原性分析 被引量：2

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作者 杨贺 李晓微 +5 位作者 刘伟灿 陈欢 李余先 张敏 周永刚 李海燕 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期830-837,共8页

根据拟南芥密码子偏好性对猪瘟病毒表面抗原基因E2和E^rns的序列进行优化,并将优化的E2-E^rns基因克隆入植物表达载体中;利用农杆菌介导的花序浸染法转化拟南芥,通过1%草铵膦喷洒筛选阳性植株,利用PCR鉴定阳性植株;提取阳性种子总蛋白进... 根据拟南芥密码子偏好性对猪瘟病毒表面抗原基因E2和E^rns的序列进行优化,并将优化的E2-E^rns基因克隆入植物表达载体中;利用农杆菌介导的花序浸染法转化拟南芥,通过1%草铵膦喷洒筛选阳性植株,利用PCR鉴定阳性植株;提取阳性种子总蛋白进行ELISA检测评价重组E2-E^rns蛋白的免疫反应原性;用E2-E^rns融合蛋白灌胃免疫小鼠并检测其血清中的特异抗体效价。结果,成功构建了由菜豆蛋白启动子驱动的种子特异性表达目的基因的植物表达载体p PHAP1301-E2-E^rns,并利用拟南芥成功表达了猪瘟病毒表面抗原E2-E^rns融合蛋白。免疫试验结果表明,通过拟南芥表达的E2-E^rns融合蛋白具有良好的免疫反应原性。结果表明,本研究获得了表达E2-E^rns蛋白的转基因拟南芥,小鼠口服植物源E2-E^rns融合蛋白具有良好的抗原性,这为深入研究利用植物表达猪瘟病毒表面抗原奠定了基础。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 E2-E^rns蛋白 拟南芥 转化 抗原性

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大豆(Glycine max)SUT4基因的克隆、表达及抗逆功能的鉴定 被引量：1

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作者 张引鹤 周永刚 +2 位作者 高红桃 刘伟灿 李海燕 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2022年第17期5578-5587,共10页

以大豆‘吉育72’为材料,利用PCR克隆技术,克隆大豆蔗糖转运蛋白GmSUT4基因,对其进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR方法检测GmSUT4在大豆不同组织及不同胁迫处理下的相对表达量。同时利用酵母系统对GmSUT4基因功能进行初步鉴定... 以大豆‘吉育72’为材料,利用PCR克隆技术,克隆大豆蔗糖转运蛋白GmSUT4基因,对其进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR方法检测GmSUT4在大豆不同组织及不同胁迫处理下的相对表达量。同时利用酵母系统对GmSUT4基因功能进行初步鉴定。GmSUT4基因全长5672 bp,CDS区1518 bp,编码505个氨基酸,具有6个外显子,位于2号染色体Chr.2:40653016~40658687位置。预测该基因编码的蛋白质分子量大小为54.17kD,等电点为9.04,具有12个跨膜区域。通过序列比对以及进化分析发现,GmSUT4属于SUT4分支,且与其他物种SUT4家族成员高度保守,属于低亲和力蔗糖转运蛋白。另外,组织特异性结果显示,Gm SUT4在大豆的各组织中均有表达,在根中的表达量最高,在叶中表达量最低。通过对水培幼苗进行胁迫处理发现,该基因在干旱、盐和盐碱胁迫下表达量均明显上调。进一步利用酵母突变株SUSY7/ura3对其功能进行验证,同时发现该基因对干旱、盐和盐碱逆境均有响应,且在盐和盐碱胁迫下表型更为明显。GmSUT4基因作为胁迫相关基因可能在大豆逆境中发挥着重要作用。 展开更多

关键词 大豆 蔗糖转运蛋白基因GmSUT4 功能 逆境

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红花类黄酮生物合成通路2-ODD基因家族鉴定与表达分析 被引量：2

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作者 马鑫彤 朱枚桦 +7 位作者 王南 张馨月 张庆宇 王宇菲 侯钰莹 李志凌 姚娜 刘秀明 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期2858-2866,共9页

黄烷酮3-羟化酶(F3H)、黄酮醇合成酶(FLS)和花青素合成酶(ANS)是植物2-酮戊二酸依赖性双加氧酶(2-ODD)超级家族中的成员,在植物类黄酮生物合成途径中起着重要的作用。本研究利用生物信息学的方法,从红花基因组数据库中共筛选鉴定16个类... 黄烷酮3-羟化酶(F3H)、黄酮醇合成酶(FLS)和花青素合成酶(ANS)是植物2-酮戊二酸依赖性双加氧酶(2-ODD)超级家族中的成员,在植物类黄酮生物合成途径中起着重要的作用。本研究利用生物信息学的方法,从红花基因组数据库中共筛选鉴定16个类黄酮生物合成通路上的2-ODD基因,这些基因编码蛋白的长度为283(CtFLS2)~442 aa(CtANS6),分子质量为32062.05(CtFLS2)~48245.49 Da(CtANS6),其编码蛋白均为亲水性蛋白。系统进化将其分为3个亚家族,保守基序分析发现该家族成员均含有H-x-D-xn-H和R-x-S两个保守残基,对上游2000 bp区域顺式作用元件分析显示该家族基因受到光、温度等环境因素及水杨酸、茉莉酸甲酯等植物激素的调控,利用qRT-PCR技术揭示了红花类黄酮生物合成通路上的2-ODD家族基因成员在红花不同花期及叶片中的差异表达。本研究可为深入挖掘红花类黄酮生物合成途径上的2-ODD基因的功能奠定基础。 展开更多

关键词 红花 类黄酮 2-酮戊二酸依赖性双加氧酶 生物信息学 表达分析

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水稻OsTPP3基因的克隆及生物信息学分析 被引量：2

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作者 杨雪 崔喜艳 +1 位作者 李艳丽 杨美英 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期3785-3793,共9页

海藻糖-6-磷酸磷酸酶(TPP)是海藻糖合成的关键酶,通过合成具有渗透能力的海藻糖增加植物在逆境中的存活能力。本研究通过克隆得到水稻OsTPP3基因并构建原核表达载体进行体外表达,对基因启动子顺式作用元件组成、表达模式和模拟蛋白三维... 海藻糖-6-磷酸磷酸酶(TPP)是海藻糖合成的关键酶,通过合成具有渗透能力的海藻糖增加植物在逆境中的存活能力。本研究通过克隆得到水稻OsTPP3基因并构建原核表达载体进行体外表达,对基因启动子顺式作用元件组成、表达模式和模拟蛋白三维结构等生物信息学分析,揭示OsTPP3基因在水稻抵抗逆境胁迫中的作用。结果显示,OsTPP3基因编码366个氨基酸,预测分子量39.99 kD,成功构建原核表达载体并体外表达。OsTPP3蛋白具有三个保守的基序构成酶活性位点,蛋白两个结构域之间是底物结合位点。OsTPP3基因的基因芯片结果显示在正常生长条件下各器官均检测到表达信号,是组成型表达基因。但在花和种子各器官中表达量明显较高;7 d幼苗经干旱和盐胁迫处理后,OsTPP3基因在根和芽中表现出表达量明显增加的特点。OsTPP3基因启动子组成元件预测基因表达模式与基因芯片表达情况一致。通过对OsTPP3基因表达模式的研究,发现其在生长发育和渗透性胁迫中发挥重要功能,可作为转基因遗传育种的备选基因。 展开更多

关键词 海藻糖-6-磷酸磷酸酶 基因克隆 表达模式分析 蛋白质结构模拟

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