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以差速贴壁与化学药物并胰酶限时消化法纯化新生大鼠嗅鞘细胞:优于单一差速贴壁和化学药物法吗? 被引量：6
1
作者 杨博宇 王锋 王玮 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第49期9761-9764,共4页
背景:目前国内外对嗅鞘细胞培养条件的报道各不相同,个别方法重复性较差,不利于实际应用。目的:观察差速贴壁+化学药物+胰酶限时消化法纯化大鼠嗅鞘细胞的效果,并与化学药物法、差速贴壁法培养结果进行比较。设计、时间及地点:细胞学体... 背景:目前国内外对嗅鞘细胞培养条件的报道各不相同,个别方法重复性较差,不利于实际应用。目的:观察差速贴壁+化学药物+胰酶限时消化法纯化大鼠嗅鞘细胞的效果,并与化学药物法、差速贴壁法培养结果进行比较。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2007-06/2008-06在福建医科大学人体解剖与组织胚胎学系实验室完成。材料:新生2d的SD大鼠8只,由福建医科大学试验动物中心提供。方法:无菌条件下完整取出大鼠双侧嗅球,剥除嗅球表面的软脑膜及毛细血管网,剪成0.5mm3的小块进行胰蛋白酶消化,过筛后按4.0×108L-1密度种植于包被多聚左旋赖氨酸的培养瓶中进行原代培养。设立4组:①未经纯化的常规对照组。②化学药物组加入5μmol/L阿糖胞苷抑制成纤维细胞分裂。③差速贴壁组采用Nash差速贴壁法纯化嗅鞘细胞。④差速贴壁+化学药物+胰酶限时消化组首先采用Nash差速贴壁法去除大部分成纤维细胞,而后对于少量残留的成纤维细胞加入阿糖胞苷处理,培养6d贴壁细胞大部分融合后,加入1.25g/L胰蛋白酶消化1min,显微镜下见突起回缩、细胞变圆、少量细胞浮起时终止消化。主要观察指标:嗅鞘细胞的形态,NGFRp75免疫细胞荧光染色结果。结果:体外培养的新生大鼠嗅球嗅鞘细胞主要为双极或三极细胞,其突起细长;未经纯化的常规对照组培养7d时视野内成纤维细胞已达60%以上,至14d成纤维细胞完全长满;经过纯化处理的另外3组始终以嗅鞘细胞居多,嗅鞘细胞的形态与原代基本相同。存活的双极和3极嗅鞘细胞呈NGFRp75阳性反应,但化学药物组、差速贴壁组嗅鞘细胞纯度偏低,仅为75%;差速贴壁+化学药物+胰酶限时消化组嗅鞘细胞纯化效率明显增高,达85%以上。结论:实验结果证实了差速贴壁+化学药物+胰酶限时消化法的三合一操作技术,是一种高效率的纯化培养嗅球嗅鞘细 展开更多
关键词 差速贴壁 阿糖胞苷 胰酶限时消化 纯化 嗅球 嗅鞘细胞
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牛垂体提取物、碱性成纤维细胞生长因子及Forskolin影响嗅鞘细胞增殖的量效关系 被引量：3
2
作者 杨博宇 王锋 王玮 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第40期7447-7452,共6页
背景:生长因子参与调节嗅鞘细胞增殖、分化及代谢功能,因此有望通过应用其合理的序贯刺激形式,达到细胞数量地大量扩增。目的:观察牛垂体提取物、碱性成纤维细胞生长因子及Forskolin对嗅鞘细胞增殖的影响及剂量-效应关系。方法:采用原... 背景:生长因子参与调节嗅鞘细胞增殖、分化及代谢功能,因此有望通过应用其合理的序贯刺激形式,达到细胞数量地大量扩增。目的:观察牛垂体提取物、碱性成纤维细胞生长因子及Forskolin对嗅鞘细胞增殖的影响及剂量-效应关系。方法:采用原代培养技术,从新生大鼠的嗅球分离培养嗅鞘细胞,并用差速贴壁+化学药物+胰酶快速消化法纯化培养嗅鞘细胞,添加牛垂体提取物、碱性成纤维细胞生长因子及Forskolin 3种促增殖因子及其组合。MTT法检测各组嗅鞘细胞生长的情况。根据NGFRp75抗体的免疫细胞化学染色统计嗅鞘细胞的纯度和计算嗅鞘细胞的增殖率。结果与结论:在嗅鞘细胞原代培养和纯化后,添加牛垂体提取物具有促进嗅鞘细胞增殖的效应,但未见典型的剂量-效应关系;添加碱性成纤维细胞生长因子具有促进嗅鞘细胞增殖的效应,且呈现典型的剂量-效应关系;添加Forskolin并不具有促进嗅鞘细胞增殖的效应。说明合理应用不同质量浓度的碱性成纤维细胞生长因子与Forskolin进行联合刺激,能有效促进细胞的增殖。结果表明序贯的使用合适浓度的生长因子组合,将是有效促进嗅鞘细胞增殖的合理策略,有助于解决脊髓损伤治疗中种子细胞来源不足这一问题。 展开更多
关键词 嗅鞘细胞 牛垂体提取物 碱性成纤维细胞生长因子 FORSKOLIN 细胞增殖 纯度
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双侧股骨干骨折并脂肪栓塞1例报告并文献复习 被引量：1
3
作者 王洪根 马一功 《实用骨科杂志》 2013年第1期89-91,共3页
目的探讨长骨骨折合并脂肪栓塞的临床特征、诊断要点及治疗方法。方法报告1例双侧股骨干骨折合并脂肪栓塞病例,结合相关文献,分析脂肪栓塞综合征在骨折创伤后发生的机制、临床特征、诊断要点及治疗对策。结果脂肪栓塞综合征较常见于骨... 目的探讨长骨骨折合并脂肪栓塞的临床特征、诊断要点及治疗方法。方法报告1例双侧股骨干骨折合并脂肪栓塞病例,结合相关文献,分析脂肪栓塞综合征在骨折创伤后发生的机制、临床特征、诊断要点及治疗对策。结果脂肪栓塞综合征较常见于骨折创伤、髓内手术,虽然其发生率较低,但一旦发生,病情凶险,其主要以进行性低氧血症、排除颅脑外伤后的意识障碍、皮下瘀斑、肺部斑点状实变或更典型的"暴风雪"样改变为特征,治疗上以充足供氧及防止并发症为主。结论脂肪栓塞综合征目前无特异性诊断及治疗方法,对于长骨骨折及涉及髓内手术的患者应时刻警惕脂肪栓塞的发生,以便及时发现、对症治疗,因其发生率较低,进一步加深认识、提高抢救成功率需要多中心、多单位之间联合探讨、数据共享。 展开更多
关键词 股骨干骨折 脂肪栓塞
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微创治疗胸腰椎压缩性骨折的围手术期护理
4
作者 胡银华 刘助英 《医学信息（西安上半月）》 2007年第10期1857-1859,共3页
随着我国人口老龄化进程的发展,骨质疏松症、椎体肿瘤等疾病逐年增加。而由其导致的椎体病理性骨折亦随之而增加。传统的保守治疗卧床时间长,老年患者易出现各种并发症。外科手术治疗因为其创伤大、恢复时间长,仍不能令人满意。经皮椎... 随着我国人口老龄化进程的发展,骨质疏松症、椎体肿瘤等疾病逐年增加。而由其导致的椎体病理性骨折亦随之而增加。传统的保守治疗卧床时间长,老年患者易出现各种并发症。外科手术治疗因为其创伤大、恢复时间长,仍不能令人满意。经皮椎体成形术（percutaneous vertebroplasty,PVP）以及经皮椎体后凸成形术（percutaneous kyphoplasty，PKP）是近年来出现的一种新型治疗方法。 展开更多
关键词 胸腰椎压缩性骨折 围手术期护理 微创治疗 经皮椎体后凸成形术 椎体病理性骨折 经皮椎体成形术 人口老龄化 骨质疏松症
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两种方法治疗跟骨关节内骨折的疗效比较 被引量：2
5
作者 杨博宇 马一功 《医学信息（西安上半月）》 2007年第10期1842-1844,共3页
目的探讨切开复位内固定与经皮撬拨复位石膏固定治疗跟骨关节内骨折的疗效。方法结我科自2001年7月-2006年8月收治的60例(64足)跟骨关节内骨折患者,分别采用切开复位钢板内固定或经皮撬拨复位石膏固定治疗,随访1年-6年,平均2.6年。结果... 目的探讨切开复位内固定与经皮撬拨复位石膏固定治疗跟骨关节内骨折的疗效。方法结我科自2001年7月-2006年8月收治的60例(64足)跟骨关节内骨折患者,分别采用切开复位钢板内固定或经皮撬拨复位石膏固定治疗,随访1年-6年,平均2.6年。结果采用张铁良等改良的足部功能评分法。切开复位钢板内固定组优72%,良20%,可8%;经皮撬拨组优60%,良36%,可4%。两组间差异采用t检验,按检验水准=0.05,p>0.50。两种方法间优良率无显著性差异。结论跟骨骨折治疗的关键是尽可能的恢复B?hler角、Gissane角,跟距、跟骰关节面的平整,跟骨高度、宽度等正常解剖形态。应根据患者年龄、性别、工作强度、居住环境、骨折类型,术者对于治疗方法掌握的熟练程度等综合考虑方可达到最佳的治疗效果。 展开更多
关键词 跟骨骨折 内固定 经皮撬拨
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