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题名骨肉瘤Kv1.5钾离子通道表达意义的研究
被引量：4
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作者
陈志达
刘庆军
曾文容
钟渊福
林斌
吴进
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机构
厦门大学附属东南医院骨科
厦门大学附属东南医院中心实验室
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出处
《中华肿瘤防治杂志》
CAS
北大核心
2016年第9期573-581,共9页
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基金
国家自然科学基金青年基金(81402217)
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文摘
目的研究表明,Kv1.5钾离子通道参与了多种肿瘤的生物学行为,但其在骨肉瘤中的表达和作用尚未明确。本研究拟检测Kv1.5钾离子通道在骨肉瘤中的表达,并探讨小干扰RNA(small interfering,siRNA)沉默Kv1.5表达后对骨肉瘤细胞增殖、周期和凋亡的影响及可能的调控机制。方法实验分组,Kv1.5-siRNA转染细胞为实验组,controlsiRNA转染细胞为对照组,未处理细胞为空白组。采用siRNA抑制Kv1.5的表达,并分别采用CCK-8法、克隆形成率、流式细胞仪和Tunel法检测MG-63细胞增殖、生长、周期和凋亡的变化。采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测骨肉瘤细胞中周期和凋亡相关基因的表达水平。结果 Kv1.5在骨肉瘤细胞和组织中均异常高表达。CCK-8法检测结果示,Kv1.5-siRNA组细胞增殖水平为(53.87±5.91)%,与control-siRNA组的(99.14±7.87)%相比差异有统计学意义,Z=-3.49,P<0.001;与空白组(100.00±8.37)%相比差异有统计学意义,Z=-3.57,P<0.001。克隆形成实验结果示,Kv1.5-siRNA组克隆形成数为164.00±7.66,与control-siRNA组(223.20±11.41)相比,Z=-2.61,P=0.008;与空白组(228.20±12.62)相比,Z=-2.40,P=0.016。流式细胞周期结果示,Kv1.5-siRNA组G0/G1期所占比例为(68.81±0.55)%,与control-siRNA组(41.22±0.61)%相比,Z=-2.15,P=0.031;与空白组(40.79±0.52)%相比,Z=-2.31,P=0.029。流式细胞凋亡结果示,Kv1.5-siRNA组(30.23±1.74)%与control-siRNA组(14.10±1.27)%相比,Z=-2.04,P=0.039;与空白组(12.85±1.02)%相比,Z=-2.09,P=0.035。Tunel法结果示,Kv1.5-siRNA组凋亡指数为(35.20±3.14)%,与control-siRNA组(8.03±1.50)%相比,Z=-2.41,P=0.015;与空白组(8.22±1.32)%相比,Z=-2.25,P=0.019。沉默Kv1.5表达可明显下调骨肉瘤中Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E、Bcl-2和Bik基因的表达,同时上调p21、p27、Bax、Bcl-XL和Caspase-3基因的表达,与对照组相比,P值均<0.05。结论 Kv1.5钾离子通道参与了骨肉瘤细胞增殖、周期和凋亡的过程,其作用机制可能与调控周期
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关键词
Kv1.5钾通道
骨肉瘤
细胞增殖
细胞周期
凋亡
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Keywords
Kv1. 5 potassium channel
osteosarcoma
cell proliferation
cell cycle
apoptosis
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分类号
R738.1
[医药卫生—肿瘤]
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题名他克莫司胶囊微生物限度检查法验证的探讨
被引量：2
- 2
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作者
占景华
石鹤坤
钟渊福
董智聪
胡永狮
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机构
中国人民解放军第一七五医院
厦门大学附属东南医院中心实验室
厦门大学附属东南医院药学科
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出处
《实用药物与临床》
CAS
2014年第11期1442-1445,共4页
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文摘
目的按2010版《中国药典》的要求探讨他克莫司胶囊微生物限度检测方法。方法选取5种具有代表性的微生物菌悬液,用常规法、稀释法、膜过滤法或其相结合的方法分别对他克莫司胶囊进行微生物验证试验。结果细菌总数用膜过滤法稀释1∶10,霉菌和酵母菌用膜过滤法稀释1∶1 000,检测后回收率均能达到70%以上。结论避免采用单一常规法或膜过滤法进行微生物限度检测,使实验科学合理,提高工作效率,更加规范性。
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关键词
微生物方法验证
稀释法
膜过滤法
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Keywords
Microbial verification
Dilution method
Membrane filtration method
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分类号
R927.1
[医药卫生—药学]
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