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索拉菲尼对肝癌HepG2细胞凋亡、耐药及PTEN蛋白表达的影响 被引量：15
1
作者 祝珊珊 秦飞 +4 位作者 陈仲巍 毕丽伟 陈丹 许莉 郑晓辉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1532-1536,共5页
目的探讨索拉菲尼(Sorafenib,So)对肝细胞癌HepG2的毒性作用及其机制。方法不同浓度索拉菲尼作用HepG2细胞,CCK-8法测定细胞活性,结晶紫染色观察;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞内蛋白表达采用Western blot检测。结果So剂量依赖地降低HepG... 目的探讨索拉菲尼(Sorafenib,So)对肝细胞癌HepG2的毒性作用及其机制。方法不同浓度索拉菲尼作用HepG2细胞,CCK-8法测定细胞活性,结晶紫染色观察;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞内蛋白表达采用Western blot检测。结果So剂量依赖地降低HepG2细胞活性并诱导细胞凋亡;Western blot显示So可上调PTEN、Bax蛋白表达,抑制磷酸化AKT、Bcl-2的蛋白以及耐药基因ABCC2和ABCG2蛋白的表达。结论So抑制HepG2细胞存活并诱导凋亡;机制可能与So促进肝癌细胞PTEN以及Bax蛋白表达;抑制Bcl-2以及p-AKT和耐药基因ABCC2、ABCG2的表达有关。 展开更多
关键词 肝癌细胞 索拉菲尼 细胞增殖 PTEN 细胞凋亡 耐药基因
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槲皮素通过激活PTEN抑制PI3K/AKT及JNK信号通路诱导人乳腺癌细胞凋亡 被引量：6
2
作者 祝珊珊 余惟一 +4 位作者 毕丽伟 秦飞 李杰 曾海泉 陆灵松 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期714-720,共7页
目的研究槲皮素对乳腺癌MCF-7细胞增殖活性以及对第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物/磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PTEN/PI3K/AKT)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响。方法采用CCK-8法检测(0、20、40、60、80、100)μmol/L... 目的研究槲皮素对乳腺癌MCF-7细胞增殖活性以及对第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物/磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PTEN/PI3K/AKT)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响。方法采用CCK-8法检测(0、20、40、60、80、100)μmol/L槲皮素对MCF-7细胞增殖的影响;Hochesst33342染色观察细胞核数量以及核型的变化,流式细胞术检测细胞凋亡;免疫荧光细胞化学染色检测PTEN和磷酸化的JNK(p-JNK)表达,Western blot法检测PTEN、磷酸化的PI3K(p-PI3K)、p-JNK、磷酸化的AKT(p-AKT)蛋白水平;加入PI3K/AKT通路抑制剂LY294002处理后,再次采用以上方法检测对细胞凋亡和相关蛋白表达的影响。结果随着槲皮素浓度的升高,细胞活性下降,细胞生长受到抑制,且具有浓度依赖性;细胞核浓缩增强、细胞凋亡增加;高浓度槲皮素显著增强PTEN蛋白表达和分布,降低p-PI3K、p-AKT蛋白水平,并抑制p-JNK蛋白的核表达。加入PI3K/AKT信号抑制剂LY294002处理细胞后,LY294002和槲皮素联合作用组细胞凋亡率增加,PTEN蛋白的表达也增强,槲皮素能明显增强LY294002对p-PI3K/AKT/PTEN蛋白的作用。结论槲皮素诱导MCF-7细胞凋亡,可能与激活PTEN的表达,抑制PI3K/AKT和JNK信号通路有关。 展开更多
关键词 槲皮素 乳腺癌 MCF-7细胞 第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN) 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K) AKT
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槲皮素影响胃癌细胞增殖并诱导细胞凋亡的研究 被引量：8
3
作者 祝珊珊 陆灵松 +2 位作者 毕丽伟 秦飞 李杰 《海峡药学》 2021年第11期14-17,共4页
目的针对槲皮素的抗癌功效,研究不同浓度槲皮素对胃癌细胞SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响以及对p-PI3K信号蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2的作用。方法不同浓度的槲皮素(0、20、40、60、80、100μmol)干预细胞后,采用CCK-8法检测SCG-7901细胞增... 目的针对槲皮素的抗癌功效,研究不同浓度槲皮素对胃癌细胞SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响以及对p-PI3K信号蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2的作用。方法不同浓度的槲皮素(0、20、40、60、80、100μmol)干预细胞后,采用CCK-8法检测SCG-7901细胞增殖情况,采用hoechst 33342染色,观察细胞核变化,流式细胞凋亡分析槲皮素对细胞凋亡的影响,以及Western Blotting检测槲皮素对p-PI3K和Bcl-2蛋白表达的影响。结果槲皮素对胃癌细胞SGC-7901的活性具有抑制效应,且这种效应呈现浓度依赖性;荧光显微镜下观察到随着槲皮素浓度的增高,细胞核发生皱缩、核裂变,DNA出现片段化、染色质固缩、染色加深、染色质形态改变等现象。流式细胞凋亡实验证实槲皮素对胃癌SGC-7901具有诱导细胞凋亡的作用,Western Blotting实验发现槲皮素能抑制胃癌细胞SGC-7901内p-PI3K和Bcl-2蛋白的表达。结论上述结果表明槲皮素能抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖并诱导其凋亡,并能调节p-PI3K和Bcl-2蛋白的表达,其可以作为抗胃癌细胞活性的药物进行药物靶点研究。 展开更多
关键词 胃癌细胞 槲皮素 细胞凋亡 p-PI3K BCL-2
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雄激素受体基因慢病毒干扰载体的构建及在肝癌细胞中的表达
4
作者 陆灵松 沈梅玲 +5 位作者 祝珊珊(指导) 刘敏 毕丽伟 李海浪 秦飞 李杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1306-1310,共5页
目的:构建敲减人雄激素受体(AR)基因的慢病毒质粒,转染Hep3B细胞使其表达目的蛋白并探索其对PTEN、p-AKT蛋白表达的影响。方法:设计合成3对针对AR基因特异性敲减的寡核苷酸片段,分别连接于重组慢病毒载体pLKO.1,构建3条AR干扰载体。利... 目的:构建敲减人雄激素受体(AR)基因的慢病毒质粒,转染Hep3B细胞使其表达目的蛋白并探索其对PTEN、p-AKT蛋白表达的影响。方法:设计合成3对针对AR基因特异性敲减的寡核苷酸片段,分别连接于重组慢病毒载体pLKO.1,构建3条AR干扰载体。利用验证正确的3个慢病毒载体转染293T细胞得到慢病毒上清液。采用RT-PCR和Western blot在5株肝癌细胞中挑选AR高表达的细胞系进行AR慢病毒上清液感染。RT-PCR和Western blot检测3条AR干扰质粒在Hep3B细胞内的表达及其对PTEN、p-AKT蛋白表达的作用。结果:测序鉴定证实3条AR慢病毒干扰载体构建成功,干扰Hep3B细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示其中1条AR干扰后的mRNA和蛋白表达明显降低,细胞内PTEN蛋白表达升高,p-AKT表达降低。结论:成功构建3条AR干扰载体,其中1条干扰效率较高,能在Hep3B细胞中干扰AR的表达,感染细胞后上调抑癌基因PTEN的蛋白表达对p-AKT有抑制作用,提示AR和PTEN/AKT信号通路可能具有相关性。 展开更多
关键词 雄激素受体 慢病毒干扰 PTEN 肝癌
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浅谈如何利用科研平台开展本科细胞生物学实验教学
5
作者 祝珊珊 刘敏 +2 位作者 毕丽伟 李海浪 陈仲巍 《大学教育》 2022年第8期114-116,共3页
细胞生物学实验是生命科学最重要的基础实验之一,也是培养生命科学学科优秀创新型人才的主要课程之一。通过科研平台将细胞生物学实验教学课堂进行延伸,结合学生创新创业课题和教师科研项目,可为细胞生物学实验课构建新的教学手段,加强... 细胞生物学实验是生命科学最重要的基础实验之一,也是培养生命科学学科优秀创新型人才的主要课程之一。通过科研平台将细胞生物学实验教学课堂进行延伸,结合学生创新创业课题和教师科研项目,可为细胞生物学实验课构建新的教学手段,加强学生对细胞生物学实验技能的理解、领会和贯通,提高学生的综合实验能力和科研平台仪器的利用率。 展开更多
关键词 细胞生物学实验 开放性实验 教学改革 科研实验平台
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