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γ-亚麻酸生产菌深黄被孢霉原生质作的形成和再生 被引量:17
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作者 李明春 邢来君 《菌物系统》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期24-29,共6页
采用2%的溶壁酶加4%的蜗牛酶,从深黄被孢霉的菌丝中获得了大量的原生质体。同时对菌丝的培养时间、渗透压稳定剂、酶解系统和酶解温度等因素进行了系统的观察,从而获得了制备深黄被孢霉原生质体的最适条件。并对该原生质体在高渗培... 采用2%的溶壁酶加4%的蜗牛酶,从深黄被孢霉的菌丝中获得了大量的原生质体。同时对菌丝的培养时间、渗透压稳定剂、酶解系统和酶解温度等因素进行了系统的观察,从而获得了制备深黄被孢霉原生质体的最适条件。并对该原生质体在高渗培养基上进行了再生实验,其再生率为32%。 展开更多
关键词 深黄被孢霉 原生质体 Γ-亚麻酸 形成 再生
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发酵法生产γ-亚麻酸 被引量:1
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作者 李明春 邢来君 《中国食品添加剂》 CAS 1999年第2期62-66,共5页
关键词 Γ-亚麻酸 发酵法生产 性能 生产技术
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富硒酵母的筛选 被引量:1
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作者 李明春 张丽 邢来君 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期104-104,共1页
微量元素硒是一种人体必需的营养元素,是生物体多种生物大分子的活性成分,如谷胱甘肽过氧化物酶、甲基脱氢酶、甘氨酸还原酶、黄嘌呤脱氢酶等.这些化合物有保护机体免受氧化损伤,清除自由基,保持生物膜系的完整性,从而具有提高肌体的免... 微量元素硒是一种人体必需的营养元素,是生物体多种生物大分子的活性成分,如谷胱甘肽过氧化物酶、甲基脱氢酶、甘氨酸还原酶、黄嘌呤脱氢酶等.这些化合物有保护机体免受氧化损伤,清除自由基,保持生物膜系的完整性,从而具有提高肌体的免疫力,保护心脏和抗衰老作用.近年来许多流行病学和动物学实验表明:硒具有增强巨噬细胞的抗肿瘤活性,对多种癌细胞有明显的抑制作用.人体缺硒将影响体内血红素的利用,另外国内许多研究证实,克山病、大骨节病与病区环境和居民体内缺硒有着密切的关系.本文通过逐渐加硒驯化,采用分光光度法和原子荧光分析法测定硒含量.从5属30种酵母菌中筛选出2株具有耐硒且富硒特性的优良酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),对这2株菌进行了不同的加硒诱导浓度、不同的加硒时间、不同菌体生长时间、通气量及改变培养基配方等条件实验,当加硒浓度10^(-4)mol/L、加硒时间为生长20h、摇瓶装液量60mL(500mL 三角瓶),收获时间为48h时,干酵母硒含量达到800μg/g以上,最高批次可达1400μg/g干菌体. 展开更多
关键词 富硒酵母 加硒诱导 筛选
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一种快速、有效提取丝状真菌总RNA的方法 被引量:1
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作者 李明春 王俊琦 邢来君 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期101-101,共1页
从细胞中提取RNA的纯度和完整性对于许多分子生物学实验是至关重要的,如Northern杂交、寡聚纤维素选择分离mRNA、cDNA合成等实验的成败,很大程度上取决于RNA的质量.RNA极易降解,为了获得高质量的RNA,必须避免RNA酶的污染.RNA酶是一类生... 从细胞中提取RNA的纯度和完整性对于许多分子生物学实验是至关重要的,如Northern杂交、寡聚纤维素选择分离mRNA、cDNA合成等实验的成败,很大程度上取决于RNA的质量.RNA极易降解,为了获得高质量的RNA,必须避免RNA酶的污染.RNA酶是一类生物活性非常稳定的酶类,耐酸、耐碱、耐热,因此,在提取RNA的过程中应创造一个无RNA酶的环境.尽量减少外源和内源RNase的污染,外源性RNase主要是操作者的手及各种实验器皿、试剂等.可通过戴手套、高温干烤及DEPC处理除去;内源性RNase来自于样品的组织细胞.可通过强烈的RNase抑制剂如异硫氰酸胍等抑制.对于丝状真菌的RNA提取方法国内报道较少,尤其是针对丝状真菌深黄被孢霉菌丝细胞,既含有丰富的RNasc又含有大量的多糖的RNA提取,国内外未见报道.我们在采用Piot-er chomczynski—步热酚法未获得满意结果的基础上,进行了较大的改进:用6mol/L.异硫氰胍等高浓度的变性剂代替通常的4mol/L变性剂;舍弃将第1次RNA沉淀复溶于变性液及异丙醇再次沉淀这两步,改用水溶解富含多糖的RNA粗品;用NaAc沉淀,以除去高含量的多糖;改变原来的酚:氯仿:异戊醇抽提的浓度和比例,使蛋白清除干净,去除了DNA污染.总之.改进后的方法是一种适合于富含RNase和多糖的丝状真菌的RNA提取方法,该方法可获得完? 展开更多
关键词 丝状真菌 RNA 提取
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酿酒酵母类金属硫蛋白的研究
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作者 邢来君 李明春 邢小云 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期103-103,共1页
金属硫蛋白(Metallothionein,简称MT)是一类低分子量,富含半胱氨酸残基,能被金属诱导的金属结合蛋白.它广泛存在于生物体内,具有重要的生物学功能,主要参与微量元素的储存、运输和代谢;拮抗电离辐射;清除羟基自由基,其活性是SOD的1000... 金属硫蛋白(Metallothionein,简称MT)是一类低分子量,富含半胱氨酸残基,能被金属诱导的金属结合蛋白.它广泛存在于生物体内,具有重要的生物学功能,主要参与微量元素的储存、运输和代谢;拮抗电离辐射;清除羟基自由基,其活性是SOD的1000倍以上.国内从事金属硫蛋白的研究工作较晚,从90年代以来才陆续发表有关文章.主要是从哺乳动物肝、肾中分离纯化MT,并对其功能和结构进行研究.国际上对微生物产生MT研究起步较晚.1975年首次由Prinz.K等人从酿酒酵母中分离到了Cu-MT,由于从微生物分离的金属硫蛋白其基本结构、特性和功能与哺乳动物MT类似,故也称为类金属硫蛋白.国内类似的报道较少.本文是从诱导野生型酵母菌产生金属抗性入手.筛选出了1株富含类MT的酿酒酵母,并对其所产的类MT通过SephadexG-50和DEAE-cellulose柱层析进行了分离纯化,同时对该蛋白的理化性质进行了鉴定.结果为:每分子蛋白含20个巯基,结合11个铜原子.分子量约为18894kD.等电点为5.13,含丰富的半胱氨酸,碱性和酸性氨基酸.无酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸和蛋氨酸.选择酵母菌作为提取材料,主要是因为酵母菌是国际公认的人类可以食用的微生物,另一方面酵母菌容易通过发酵获得大量菌体.优于从动物脏器提取。 展开更多
关键词 酿酒酵母 金属硫蛋白 理化性质
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