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血管形成抑制剂Canstatin在鼻咽癌中表达鉴定及基因克隆 被引量：2
1
作者 方唯意 刘真 +8 位作者 杨慧玲 周宏珍 王爽 刘腾飞 李欣 刘求真 江庆萍 谢思明 姚开泰 《南华大学学报（医学版）》 2007年第6期813-816,共4页
目的检测Canstatin基因在鼻咽癌发病过程中的表达变化及克隆其编码序列。方法利用半定量RT-PCR方法检测Canstatin在鼻咽癌组织、鼻咽癌细胞和正常鼻咽组织中的表达,比较它们之间的表达差异。设计含酶切位点的PCR引物,利用RT-PCR方法从... 目的检测Canstatin基因在鼻咽癌发病过程中的表达变化及克隆其编码序列。方法利用半定量RT-PCR方法检测Canstatin在鼻咽癌组织、鼻咽癌细胞和正常鼻咽组织中的表达,比较它们之间的表达差异。设计含酶切位点的PCR引物,利用RT-PCR方法从相对正常鼻咽组织中获取Can-statin蛋白编码序列,T/A克隆入pMD18载体中。利用PCR和酶切鉴定获得阳性重组子。重组子最后经测序证实。结果与相对正常鼻咽组织相比,Canstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失。RT-PCR法成功获得Canstatin基因编码区全长cDNA序列。重组克隆质粒插入片段经DNA测序后与Gen-Bank中Canstatin基因相应序列比较,100%同源。结论Canstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失。采用T/A技术成功克隆鼻咽组织中Canstatin基因,为Canstatin亚克隆入真核表达载体pEGFP-N1,探索其在鼻咽癌生长和转移中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 CANSTATIN 胶原Ⅳ 鼻咽癌 血管生成抑制因子
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