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改良小鼠酒精性肝损伤模型的建立 被引量：8
1
作者 朱强 王科 +5 位作者 钱晓锋 饶建华 王学浩 李相成 吕凌 张峰 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2010年第9期52-55,共4页
目的探索建立简便和稳定的酒精性肝病(ALD)的动物模型。方法利用简易胃造漏的方法,将实验动物分为四组,A组为正常小鼠(n=12);B组为胃造瘘后给予生理盐水(n=12);C组为胃造瘘后给予酒精(18g·kg-1·d-1)(n=22);D组小鼠给予自制的Z... 目的探索建立简便和稳定的酒精性肝病(ALD)的动物模型。方法利用简易胃造漏的方法,将实验动物分为四组,A组为正常小鼠(n=12);B组为胃造瘘后给予生理盐水(n=12);C组为胃造瘘后给予酒精(18g·kg-1·d-1)(n=22);D组小鼠给予自制的ZQ液(n=22)。实验动态观察12周,分别在第4周、6周、8周、12周测四组小鼠肝重、体重值并检测肝脏ALT和AST水平,同时收集肝脏标本经HE染色后光镜观察肝组织的结构变化。结果 C组模型与A组和B组比较也出现不同程度的肝脏损害,但损害的程度较D组轻。D组小鼠在4周开始出现了肝细胞脂肪变性,8周开始出现酒精性肝炎和轻度的肝纤维化,12周时出现肝脏纤维化的表现。结论简易胃造瘘法配合ZQ液可以建立简便和稳定的酒精性肝损伤模型。 展开更多
关键词 肝疾病 酒精性 胃造口术 肝损伤 疾病模型 动物
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肝移植术后不放置腹腔引流管的安全性评价 被引量：7
2
作者 施卫东 吕凌 +5 位作者 张传永 陆森 王平 陆华虎 庄海文 张峰 《器官移植》 CAS 2011年第3期149-151,174,共4页
目的评价肝移植术后不放置腹腔引流管的安全性。方法原位肝移植术后不放置腹腔引流管患者32例,观察其术后引流管相关并发症(胆瘘、腹腔出血、腹腔感染、腹腔积液、切口感染)的发生情况。结果 32例患者术后无发生胆瘘、腹腔出血、腹腔感... 目的评价肝移植术后不放置腹腔引流管的安全性。方法原位肝移植术后不放置腹腔引流管患者32例,观察其术后引流管相关并发症(胆瘘、腹腔出血、腹腔感染、腹腔积液、切口感染)的发生情况。结果 32例患者术后无发生胆瘘、腹腔出血、腹腔感染、切口感染等并发症,9例出现腹水较多,经行腹腔穿刺抽液后病情好转。结论肝移植术后不置腹腔引流管是安全可靠的。 展开更多
关键词 肝移植 腹腔引流 并发症 安全性
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悬浮搅拌法培养和扩增诱导多能干细胞 被引量：1
3
作者 俞悦 游伟 王学浩 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期707-709,共3页
目的建立一种新的搅拌培养法，大量培养、快速扩增诱导多能干细胞（iPSCs）。方法采用搅拌式细胞培养器悬浮培养iPSCs，每4d为1个周期，第4天检测细胞聚集球的直径；经8次传代后，计算细胞倍增时间和细胞数量，经实时定量聚合酶链反应（... 目的建立一种新的搅拌培养法，大量培养、快速扩增诱导多能干细胞（iPSCs）。方法采用搅拌式细胞培养器悬浮培养iPSCs，每4d为1个周期，第4天检测细胞聚集球的直径；经8次传代后，计算细胞倍增时间和细胞数量，经实时定量聚合酶链反应（Real一timePCR）检测多能性标志物0ct4、Nanog和性别决定区Y框蛋白2（SOX2）mRNA表达，免疫荧光法检测0ct4蛋白表达，组织染色法检测碱性磷酸酶（AIJP）活性。结果搅拌式培养iPSCs，细胞倍增时间为（20．82±1．27）h；培养1d后，细胞形成微小聚集球，经1个周期4d的培养，细胞球直径达到最大（184．1±7．2）±m，经传代8次，可以扩增到起始细胞数量的1014倍；Real-timePCR和免疫组织化学结果显示这些iPSCs仍然高表达多能性标记。结论这种新方法能够快速、大量扩增iPSCs，并且这样培养的iPSCs能够保持其多能性。 展开更多
关键词 多能干细胞 培养 细胞扩增
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肝癌切除术对肝癌患者外周血CD4^+CD25^+T调节细胞的影响
4
作者 饶建华 张峰 +2 位作者 吕凌 浦立勇 钱晓峰 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1370-1373,共4页
目的:探讨肝癌切除术对肝癌患者外周血CD4+CD25+T调节细胞(Treg)的影响及临床意义。方法:42例原发性肝癌患者均行肝癌切除术,采用流式细胞术检测患者手术前及术后1个月外周血中Treg占单个核细胞(PBM)的比例,同样的方法检测肝癌组织和正... 目的:探讨肝癌切除术对肝癌患者外周血CD4+CD25+T调节细胞(Treg)的影响及临床意义。方法:42例原发性肝癌患者均行肝癌切除术,采用流式细胞术检测患者手术前及术后1个月外周血中Treg占单个核细胞(PBM)的比例,同样的方法检测肝癌组织和正常肝组织中Treg占单个核细胞的比例;采用ELISA检测肝癌组织和正常肝组织中转化生长因子-β(TGF-β),白介素-10(IL-10)的水平。结果:肝癌患者外周血及肝癌组织中Treg比例明显高于对照组(13.98±3.03)%vs(8.23±2.15)%,(17.74±4.12)%vs(6.98±2.36)%,P均<0.05,且Ⅲ～Ⅳ期患者外周血中Treg比例显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者。肝癌切除术后1个月外周血Treg较术前明显减少(13.98±3.03)%vs(9.87±2.78)%,P<0.05。肿瘤组织中TGF-β、IL-10的水平明显高于正常肝组织(P<0.05)。结论:肝癌患者外周血Treg水平明显升高,且与TNM分期呈正相关。肝癌切除术能明显降低外周血Treg比例,这可能与手术切除肿瘤微环境中高水平Treg、TGF-β、IL-10有关。 展开更多
关键词 肝癌 肝癌切除术 CD4^+CD25^+T调节细胞 转化生长因子-Β 白介素-10
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Th17细胞在移植排斥反应中的作用
5
作者 饶建华 吕凌 张峰 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期383-384,共2页
以往认为，参与细胞免疫的CD4^＋T淋巴细胞可分为Th1和Th2等细胞亚群，他们各自以不同的角色参与免疫应答。近年来，研究发现了一类新型的效应性T淋巴细胞亚群Th17细胞。Th17细胞是一种炎症细胞，介导炎症反应，主要分泌白细胞介素17（I... 以往认为，参与细胞免疫的CD4^＋T淋巴细胞可分为Th1和Th2等细胞亚群，他们各自以不同的角色参与免疫应答。近年来，研究发现了一类新型的效应性T淋巴细胞亚群Th17细胞。Th17细胞是一种炎症细胞，介导炎症反应，主要分泌白细胞介素17（IL-17）。而移植排斥反应的本质就是炎症反应。因此，我们对Th17细胞及其分泌的细胞因子IL-17在移植排斥反应中的作用，综述如下。 展开更多
关键词 T淋巴细胞亚群 移植排斥反应 CD4^+T淋巴细胞 介导炎症反应 白细胞介素 IL-17 细胞免疫 免疫应答
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我国肝移植现状与面临的挑战 被引量：15
6
作者 王学浩 李国强 《中华消化外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期641-643,共3页
经过20余年的发展，我国目前已成为世界上肝移植发展较快的国家之一，无论在年移植例数还是术后患者生存率方面均接近国际先进水平。但是，肝移植在快速发展的同时却面临着许多亟待解决的问题，如供肝来源和分配体系不完善、基础研究成... 经过20余年的发展，我国目前已成为世界上肝移植发展较快的国家之一，无论在年移植例数还是术后患者生存率方面均接近国际先进水平。但是，肝移植在快速发展的同时却面临着许多亟待解决的问题，如供肝来源和分配体系不完善、基础研究成果缺乏创新和核心竞争力、临床研究水平滞后等。南京医科大学第一附属医院对扩大供肝来源，临床技术改进，加强基础研究方面开展了一系列工作，做出了有益尝试。 展开更多
关键词 肝移植 边缘供肝 心脏死亡器官捐献
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微RNA-26a在肝内胆管癌中的表达及其意义 被引量：7
7
作者 黄昌俊 田原 +2 位作者 王东 韩晟 李相成 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期898-903,共6页
目的探讨微RNA－26a（miR26a）在肝内胆管癌中的表达情况，分析其作用机制及临床意义。方法收集46例肝内胆管细胞癌及癌旁组织标本，荧光定量逆转录－PCR法检测miR26a的表达，分析其与临床病理特征及预后的关系。肝内胆管癌细胞株HCCC－... 目的探讨微RNA－26a（miR26a）在肝内胆管癌中的表达情况，分析其作用机制及临床意义。方法收集46例肝内胆管细胞癌及癌旁组织标本，荧光定量逆转录－PCR法检测miR26a的表达，分析其与临床病理特征及预后的关系。肝内胆管癌细胞株HCCC－9810及RBE分别用lipo—fectamine2000转染miR26a仿品及miR26a抑制剂。CCK－8法测生长曲线，划痕及transwell实验分析迁移及侵袭能力，流式细胞仪测细胞周期，蛋白印迹检测分析其可能机制。结果miR－26a在肝内胆管癌组织中的表达较癌旁组织上调（P〈o．05h且有血管侵犯、TNMⅢ～Ⅳ期和有淋巴结转移组上调更为明显（P〈O．05）。miR－26a的变化与性别、年龄、肿瘤数目、肿瘤直径、肿瘤包膜、肿瘤分化的相关性差异无统计学意义（P〉0．05）。肝内胆管癌细胞HCCC-9810的miR-26a表达水平上调可以促进增殖及侵袭，加快G0／G1期到s期转换，抑制PTEN进而激活AKT信号通路。肝内胆管癌细胞RBE的miR-26a表达水平下调可以抑制增殖及侵袭，导致G0／G1期阻滞，PTEN表达增加而AKT激活受抑，PTENmRNA表达水平与miR－26a表达水平负相关（r＝-0．8272，P〈0．01）。miR26a高表达组总体生存率较低表达组差（P〈0．05）。miR26a高表达、多发肿瘤及有淋巴结转移是影响肝内胆管癌患者总体生存的独立风险因素（P〈0．01）。结论miR-26a在肝内胆管癌组织中高表达，可以影响肝内胆管癌的临床病理特征及总体生存率，并可能通过PTEN／AKT通路促进肿瘤的增殖及转移。 展开更多
关键词 胆管肿瘤 微RNAS 预后
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