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黄瓜花叶病毒2b蛋白在大肠杆菌中的表达及抗血清制备 被引量:1
1
作者 马中良 李艳利 +1 位作者 刘迎 黎晶晶 《药物生物技术》 CAS CSCD 2006年第1期6-8,共3页
从黄瓜花叶病毒(CMV)中提取总RNA,通过反转-录PCR(RT-PCR)扩增得到其运动蛋白2 b基因,将扩增产物克隆到pMD-18T载体上。DNA序列分析表明,所得到2 b基因全长为303 bp与已发表CMV序列相同。将目的片段亚克隆到表达载体pET-30 a上,并在大... 从黄瓜花叶病毒(CMV)中提取总RNA,通过反转-录PCR(RT-PCR)扩增得到其运动蛋白2 b基因,将扩增产物克隆到pMD-18T载体上。DNA序列分析表明,所得到2 b基因全长为303 bp与已发表CMV序列相同。将目的片段亚克隆到表达载体pET-30 a上,并在大肠杆菌JM109诱导表达,诱导9 h后,融合蛋白表达量最大。经SDS-PAGE检测,融合蛋白以可溶形式存在。制备的抗血清,效价为1:4 000。 展开更多
关键词 黄瓜花叶病毒 运动蛋白 抗血清 融合蛋白表达
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转醛醇酶在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达及其亚型的分离和鉴定 被引量:1
2
作者 顾冬民 程志祥 +2 位作者 刘颖 朱慧 德伟 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期465-467,473,共4页
目的:研究转醛醇酶在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达并分离鉴定其亚型。方法:应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白免疫印迹(Westernblotting)对转醛醇酶在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达进行半定量分析,同时利用双向电泳免疫印迹... 目的:研究转醛醇酶在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达并分离鉴定其亚型。方法:应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白免疫印迹(Westernblotting)对转醛醇酶在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达进行半定量分析,同时利用双向电泳免疫印迹技术分离、鉴定转醛醇酶的亚型。结果:①转醛醇酶在生后1周小鼠睾丸中表达量平均比成年高47.8%(P<0.005)。②双向电泳Westernblotting示小鼠睾丸转醛醇酶共有10余个亚型,生后1周小鼠睾丸中a8亚型表达量极低,而在成年小鼠睾丸中a8亚型高表达。结论:①生后1周小鼠生长发育快,合成代谢旺盛,转醛醇酶基因绝对表达量高。②a8亚型可能与生殖功能(精子发生、睾酮生成)密切相关。 展开更多
关键词 转醛醇酶 发育 小鼠 睾丸 双向电泳免疫印迹 分离 鉴定
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一株新粘细菌生物学性质的研究 被引量:16
3
作者 李艳利 张荫雷 +1 位作者 刘迎 马中良 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1888-1891,共4页
对粘细菌纤维堆囊菌Socecpu-1生物学特性进行了研究。结果表明,该粘细菌能利用如滤纸或玉米秸杆等纤维素。Socecpu-1次级代谢产物的抑菌实验表明,该粘细菌具有广谱抗菌活性;对人白血病细胞K562有较好的抑制效果。
关键词 粘细菌 纤维素 次级代谢产物 生物活性
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咪喹莫特抑制哮喘大鼠气道炎症转录水平的研究 被引量:10
4
作者 吴巧珍 殷凯生 +2 位作者 王祥 熊俊 德伟 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期176-178,共3页
目的 探讨咪喹莫特拮抗支气管哮喘气道炎症的分子机制。方法 卵清蛋白腹腔注射与雾化吸入建立大鼠哮喘模型,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定了不同剂量咪喹莫特对哮喘大鼠肺组织白介素(IL)-4mRNA、IL-5mRNA、IL-12mRNA和干扰素(IF... 目的 探讨咪喹莫特拮抗支气管哮喘气道炎症的分子机制。方法 卵清蛋白腹腔注射与雾化吸入建立大鼠哮喘模型,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定了不同剂量咪喹莫特对哮喘大鼠肺组织白介素(IL)-4mRNA、IL-5mRNA、IL-12mRNA和干扰素(IFN)-γmRNA表达的影响。结果 咪喹莫特各治疗组及地塞米松组能显著抑制哮喘大鼠肺组织中IL-4、IL-5mRNA的表达(与哮喘组比,均为P<0.001;与空白对照组比,均为P>0.05),各咪喹莫特组同时能显著增加IL-12、IFN-γmRNA表达(与哮喘组比,均为P<0.001;与空白对照组比,均为P>0.05),而地塞米松组不能增加IL-12、IFN-γ mRNA的表达(与哮喘组比,均为P>0.05;与空白对照组比,均为P<0.001)。咪喹莫特各治疗组间无显著性差异。结论 咪喹莫特能降低哮喘大鼠肺组织中IL-4和IL-5基因转录,增加IL-12和IFN-γ基因转录,进而抑制嗜酸性粒细胞的聚集、活化,发挥其抗气道炎症的作用。 展开更多
关键词 哮喘 咪喹莫特 气道炎症 逆转录-聚合酶链反应
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探讨分子生物学虚拟实验的构建要素 被引量:8
5
作者 德伟 王子杰 +3 位作者 陈雅 徐爱明 沙珊 张爱萍 《南京医科大学学报(社会科学版)》 2013年第2期166-168,共3页
随着虚拟实验技术的发展,虚拟实验逐渐成为分子生物学教学改革的方向之一。南京医科大学生化教研组构建了一套分子生物学虚拟实验,具备界面友好、操作性强,素材、动画写实性,实用性,内容微观性以及测试性等要素,在试点教学中广受师生好评。
关键词 分子生物学 虚拟实验 构建要素
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地塞米松抑制肥大细胞脱颗粒及其机制初探 被引量:6
6
作者 袁栎 郭薇 刘水平 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2003年第6期642-644,共3页
目的 :研究糖皮质激素对Ⅰ型超敏反应中的肥大细胞脱颗粒反应是否有直接作用。方法 :利用流式细胞仪技术观察地塞米松对RBL 2H3细胞 (大鼠嗜碱粒细胞 )脱颗粒程度的影响 ,利用westernblot分析ERK1 ERK2信号的改变。结果 :地塞米松预先... 目的 :研究糖皮质激素对Ⅰ型超敏反应中的肥大细胞脱颗粒反应是否有直接作用。方法 :利用流式细胞仪技术观察地塞米松对RBL 2H3细胞 (大鼠嗜碱粒细胞 )脱颗粒程度的影响 ,利用westernblot分析ERK1 ERK2信号的改变。结果 :地塞米松预先作用于RBL 2H3细胞 ,使AnnexinV标记的细胞阳性率较致敏原活化组明显下降 ,MAPK活性明显降低。结论 :地塞米松抑制肥大细胞脱颗粒反应 。 展开更多
关键词 药效学 地塞米松 肥大细胞 RBL-2H3 脱颗粒 ANNEXIN V MAPK
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卵泡刺激素受体短肽的表达及纯化 被引量:1
7
作者 袁栎 侯道荣 +3 位作者 徐荣 夏彪 德伟 王心如 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第11期2057-2060,共4页
目的:表达人卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)N端第18-34氨基酸片段。方法:将FSHRN端第18-34氨基酸片段克隆至pGEX4T-1中,构建成重组质粒pGEX4T-1-FSHRN(18-34位氨基酸)。将该重组质粒转化E.coliBL21后,IPT... 目的:表达人卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)N端第18-34氨基酸片段。方法:将FSHRN端第18-34氨基酸片段克隆至pGEX4T-1中,构建成重组质粒pGEX4T-1-FSHRN(18-34位氨基酸)。将该重组质粒转化E.coliBL21后,IPTG诱导其表达,经亲和层析进行分离纯化,western blot鉴定。结果:克隆成功,并表达FSHRN端第18-34氨基酸片段,所表达的融合蛋白中60%为可溶性蛋白。结论:成功克隆、表达、纯化了人FSHRN端第18-34氨基酸片段,为后续动物免疫试验提供抗原。 展开更多
关键词 FSHR 表达 纯化
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抑癌基因p15对人胆管癌细胞增殖的影响 被引量:1
8
作者 傅赞 赵翰林 +2 位作者 王若宁 德伟 武正炎 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1433-1435,共3页
目的 通过构建稳定高表达抑癌基因p15的人胆管癌细胞模型 ,探讨 p15对胆管癌细胞增殖的影响。方法 将抑癌基因 p15的cDNA构建到高效真核表达的质粒载体 pcDNA -neo中的EcoRⅠ /XbaⅠ位点 ,构建成 p15真核表达质粒pcDNA3 p15 ;通过脂... 目的 通过构建稳定高表达抑癌基因p15的人胆管癌细胞模型 ,探讨 p15对胆管癌细胞增殖的影响。方法 将抑癌基因 p15的cDNA构建到高效真核表达的质粒载体 pcDNA -neo中的EcoRⅠ /XbaⅠ位点 ,构建成 p15真核表达质粒pcDNA3 p15 ;通过脂质体法将 pcDNA3p15质粒传染人胆管癌细胞系QBC93 9,经G418筛选 ,获得稳定高表达p15的人胆管癌细胞模型及相应的表达空载体的对照细胞模型 ,并经Wistern分子杂交分析证实。结果 与对照组相比 ,p15高表达的人胆管癌细胞生长速率明显下降 ,第 4天细胞增殖结果被抑制了 3 8.6% ;克隆形成能力降低 ,克隆抑制率达 5 5 % ;S期的细胞明显减少 ,G1期、G2 期的细胞均有增加 ;癌基因c myc蛋白水平低。结论 在人胆管癌细胞中高表达抑癌基因p15抑制了细胞增殖 ;p15同时阻遏细胞由G1期向S期及G2 期向M期转换 ;癌基因c myc蛋白水平降低可能是p15抑制作用的分子机理之一。 展开更多
关键词 人胆管癌 抑癌基因 高表达 癌细胞增殖 C-MYC蛋白 PCDNA3 癌细胞生长 阻遏 克隆 分子杂交
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p15、p16对人胆管癌细胞增殖影响的实验研究 被引量:2
9
作者 傅赞 赵翰林 +2 位作者 王若宁 德伟 武正炎 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2003年第3期153-155,共3页
目的研究抑癌基因p15、p16对人胆管癌细胞的生长抑制作用。方法将抑癌基因p15、p16的cDNA构建到真核表达的质粒载体pcDNA3 neo中形成p15真核表达质粒pcDNA3p15及p16真核表达质粒pcDNA3p16。通过脂质体法将重组质粒pcDNA3p15、pcDNA3p16... 目的研究抑癌基因p15、p16对人胆管癌细胞的生长抑制作用。方法将抑癌基因p15、p16的cDNA构建到真核表达的质粒载体pcDNA3 neo中形成p15真核表达质粒pcDNA3p15及p16真核表达质粒pcDNA3p16。通过脂质体法将重组质粒pcDNA3p15、pcDNA3p16质粒分别转染人胆管癌细胞系QBC939,获得稳定高表达p15或p16的人胆管癌细胞模型。用MTT法测定细胞生长曲线 ,流式细胞光度术测定细胞生长周期。结果p15、p16高表达的人胆管癌细胞QBC939的增殖受到抑制 ,p15、p16均明显阻遏细胞由G1期向S期的转换。结论抑癌基因p15、p16均参与了细胞周期的阻抑作用。 展开更多
关键词 P15 P16 胆管癌 细胞增殖 实验研究
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IRE1α通过UPR影响非洲爪蟾胚胎发育 被引量:2
10
作者 李昕昕 冯娇娇 +4 位作者 侯道荣 郭静 王学军 王宁 袁栎 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1399-1402,共4页
目的:探讨IRE1α在非洲爪蟾胚胎发育中是否介导未折叠蛋白反应(UPR),并在衣霉素(tunicamycin,TM)诱导的胚胎发育畸形中发挥挽救作用。方法:利用TM处理胚胎激发内质网应激;应用显微注射mRNA方法实现基因过表达,通过注射特异的反义寡核苷... 目的:探讨IRE1α在非洲爪蟾胚胎发育中是否介导未折叠蛋白反应(UPR),并在衣霉素(tunicamycin,TM)诱导的胚胎发育畸形中发挥挽救作用。方法:利用TM处理胚胎激发内质网应激;应用显微注射mRNA方法实现基因过表达,通过注射特异的反义寡核苷酸morpholino(MO)实现基因封闭;RT-PCR检测XBP1剪切情况。结果:XBP1剪切随IRE1α过表达及封闭而增加或减少;TM处理导致胚胎发育畸形,XBP1剪切增加,封闭XBP1可部分挽救发育畸形;封闭IRE1a可明显挽救发育畸形,XBP1剪切恢复。结论:IRE1α在非洲爪蟾胚胎发育中介导UPR,封闭IRE1α可逆转TM诱导的胚胎发育畸形,部分通过XBP1途径发挥作用。 展开更多
关键词 IRE1α 非洲爪蟾 胚胎发育
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MIA影响非洲爪蟾胚胎中胚层的形成 被引量:1
11
作者 冯娇娇 殷晨阳 +5 位作者 李昕昕 徐校佩 郭静 王学军 王宁 袁栎 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期426-431,共6页
目的:探讨黑色素瘤抑制蛋白(melanoma inhibitory activity,MIA)在非洲爪蟾早期胚胎发育中的作用。方法:根据热带爪蟾MIA序列在非洲爪蟾EST数据库中找到MIA序列,利用RT-PCR扩增全长序列并克隆至pCS2+,用于测序。利用RT-PCR检测胚胎发育... 目的:探讨黑色素瘤抑制蛋白(melanoma inhibitory activity,MIA)在非洲爪蟾早期胚胎发育中的作用。方法:根据热带爪蟾MIA序列在非洲爪蟾EST数据库中找到MIA序列,利用RT-PCR扩增全长序列并克隆至pCS2+,用于测序。利用RT-PCR检测胚胎发育各阶段MIA mRNA的表达。通过显微注射特异的反义寡核苷酸morpholino(MO)敲降MIA;利用整胚原位杂交检测胚层标志性基因的表达。结果:克隆出非洲爪蟾MIA全长序列。在胚胎发育过程中MIA从受精卵开始持续表达。敲降MIA导致胚胎胚孔闭合延缓,中胚层标志基因xbra表达明显受抑,而内胚层标志性基因sox17α表达无明显改变。结论:MIA表达于非洲爪蟾胚胎发育各阶段,敲降MIA抑制中胚层的形成。 展开更多
关键词 黑色素瘤抑制蛋白 非洲爪蟾 胚胎发育 中胚层
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血管内皮抑素的原核表达及多克隆抗体的制备 被引量:1
12
作者 张一鸣 王若宁 +5 位作者 李艳利 顾冬民 程志祥 熊俊 德伟 陈丙莺 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第9期957-960,共4页
背景与目的:本实验拟在原核系统中表达并纯化人血管内皮抑素(endostatin),制备鼠抗人血管内皮抑素多克隆抗体。方法:设计引物扩增内皮抑素的cDNA,重组入原核表达载体并在大肠杆菌中诱导表达,应用纯化产物免疫3只小鼠。结果:构建成制备... 背景与目的:本实验拟在原核系统中表达并纯化人血管内皮抑素(endostatin),制备鼠抗人血管内皮抑素多克隆抗体。方法:设计引物扩增内皮抑素的cDNA,重组入原核表达载体并在大肠杆菌中诱导表达,应用纯化产物免疫3只小鼠。结果:构建成制备人血管内皮抑素的原核表达载体pQE-30,并转化入大肠杆菌BL21中得到表达产物,经Ni亲和层析柱纯化后进行SDS-PAGE鉴定结果为单一组分。利用纯化的人血管内皮抑素成功制备高滴度的鼠抗人血管内皮抑素多克隆抗体,并由Westernblot分析证实。结论:高纯度表达产物及多克隆抗体的制得为今后的研究提供了素材。 展开更多
关键词 制备 血管生成因子 血管内皮抑素 胶原ⅩⅧ 原核表达 多克隆抗体
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肌醇依赖性激酶1α对心脏发育的影响
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作者 陶正贤 冯娇娇 +2 位作者 李昕昕 殷晨阳 袁栎 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第20期2365-2367,F0002,共4页
目的探讨肌醇依赖性激酶1α(IRE1α)对非洲爪蟾心脏发育的影响。方法通过显微注射IRE1αmRNA实现基因过表达,注射IRE1α或其下游基因XBP1特异性反义寡核苷酸(MO)实现基因封闭;利用全胚胎原位杂交方法检测基因表达,免疫组化方法检测体节... 目的探讨肌醇依赖性激酶1α(IRE1α)对非洲爪蟾心脏发育的影响。方法通过显微注射IRE1αmRNA实现基因过表达,注射IRE1α或其下游基因XBP1特异性反义寡核苷酸(MO)实现基因封闭;利用全胚胎原位杂交方法检测基因表达,免疫组化方法检测体节形成。结果过表达IRE1α对心脏发育无明显影响;利用MO封闭IRE1α或XBP1后,心脏明显减小,形态异常,心脏发育相关基因nkx2.5表达下降,但对体节无影响。结论 IRE1α影响非洲爪蟾心脏的发育,可能是通过XBP1发挥作用。 展开更多
关键词 肌醇依赖性激酶1α 非洲爪蟾 心脏发育
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封闭内质网蛋白激酶IRE1α对肠道发育的影响
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作者 陶正贤 李昕昕 +1 位作者 冯娇娇 袁栎 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期1489-1491,共3页
目的探讨肌醇酶1α(IRE1α)在非洲爪蟾胚胎发育中的作用。方法利用全胚胎原位杂交法检测IRE1α在胚胎发育晚期的表达;设计合成特异性封闭IRE1α的反义寡核苷酸(MO),通过显微注射方法实现基因封闭。结果 IRE1α在胚胎发育晚期高表达于胰... 目的探讨肌醇酶1α(IRE1α)在非洲爪蟾胚胎发育中的作用。方法利用全胚胎原位杂交法检测IRE1α在胚胎发育晚期的表达;设计合成特异性封闭IRE1α的反义寡核苷酸(MO),通过显微注射方法实现基因封闭。结果 IRE1α在胚胎发育晚期高表达于胰腺。在体外翻译系统中,IRE1αMO可以阻断IRE1α蛋白质的合成。封闭IRE1α对胚胎发育早期无明显影响;但在发育晚期导致肠道结构消失,胚胎发育明显异常。结论 IRE1α对非洲爪蟾胚胎发育早期无影响,但在晚期导致肠道发育异常。 展开更多
关键词 肌醇酶1α 非洲爪蟾 胚胎发育
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p15对人胆管癌细胞增殖影响的实验研究及机理的初步分析
15
作者 傅赞 赵翰林 +2 位作者 王若宁 德伟 武正炎 《实用临床医药杂志》 CAS 2004年第5期35-38,共4页
目的 通过构建稳定高表达抑癌基因 p15的人胆管癌细胞模型 ,研究p15对胆管癌细胞增殖的影响。 方法 将抑癌基因p15的cDNA构建到高效真核表达的质粒载体 pcDNA3 neo中的EcoRⅠ /XbaⅠ位点 ,构建成p15真核表达质粒 pcD NA3 p15 ;通过... 目的 通过构建稳定高表达抑癌基因 p15的人胆管癌细胞模型 ,研究p15对胆管癌细胞增殖的影响。 方法 将抑癌基因p15的cDNA构建到高效真核表达的质粒载体 pcDNA3 neo中的EcoRⅠ /XbaⅠ位点 ,构建成p15真核表达质粒 pcD NA3 p15 ;通过脂质体法将pcDNA3 p15质粒转染人胆管癌细胞系QBC93 9,经G 418筛选 ,获得稳定高表达 p15的人胆管癌细胞模型及相应的表达空载体的对照细胞模型 ,并经Western分子杂交分析证实。结果 与对照组相比 ,p15高表达的人胆管癌细胞QBC93 9的增殖受到明显抑制 ;流式细胞光度术表明 p15同时阻遏细胞由G1 期向S期及G2 期向M期的转换。结论 Western免疫印迹分析结果表明 ,癌基因c myc的蛋白水平表达下降可能是p15抑制细胞增殖的分子机理之一。 展开更多
关键词 抑癌基因p15 人胆管癌细胞 细胞周期 感染
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p16对人胆管癌细胞增殖影响及其机制的研究 被引量:1
16
作者 陆文熊 傅赞 +2 位作者 王若宁 德伟 赵翰林 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期762-765,共4页
目的:通过构建稳定高表达抑癌基因p16的人胆管癌细胞模型,研究p16对胆管癌细胞增殖的影响及其相关机制。方法:将抑癌基因p16的cDNA构建到高效真核表达的质粒载体pcDNA3-neo中的EcoRⅠ/XbaⅠ位点,构建成p16真核表达质粒pcDNA3p16;通过脂... 目的:通过构建稳定高表达抑癌基因p16的人胆管癌细胞模型,研究p16对胆管癌细胞增殖的影响及其相关机制。方法:将抑癌基因p16的cDNA构建到高效真核表达的质粒载体pcDNA3-neo中的EcoRⅠ/XbaⅠ位点,构建成p16真核表达质粒pcDNA3p16;通过脂质体法将pcDNA3p16质粒转染人胆管癌细胞系QBC939,经G-418筛选,获得稳定高表达p16的人胆管癌细胞模型。用MTT法测定细胞生长曲线,并测定细胞克隆形成能力,用流式细胞光度术测定细胞周期。用Western分子杂交分析癌基因c-myc的蛋白表达水平。结果:与对照组相比,p16高表达的人胆管癌细胞QBC939的增殖受到明显抑制;流式细胞光度术表明p16的高表达导致了较为明显的G1期阻滞作用,但对细胞周期的其他时相并无影响;Western免疫印迹分析结果表明癌基因c-myc的蛋白水平表达下降。结论:抑癌基因p16下调癌基因c-myc的表达是p16抑制细胞增殖的分子机制之一。 展开更多
关键词 抑癌基因P16 人胆管癌细胞 细胞周期
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细胞结构动力学——实时调控细胞力学的因素分析
17
作者 张小寒 郭军 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第6期540-542,共3页
机械力普遍存在于活细胞的生命活动中,而细胞内力学活动必须依赖骨架结构传递,这种独特的力学形式被称为细胞结构力学.单位时间内细胞结构力学变化受多因素调控,如外力、渗透压、动力分子、张力敏感性离子通道、胞内力学感受器及骨架组... 机械力普遍存在于活细胞的生命活动中,而细胞内力学活动必须依赖骨架结构传递,这种独特的力学形式被称为细胞结构力学.单位时间内细胞结构力学变化受多因素调控,如外力、渗透压、动力分子、张力敏感性离子通道、胞内力学感受器及骨架组装等,构成了细胞结构动力学研究的重要内容.基于荧光共振能量转移(FRET)原理开发的荧光张力探针能整合到细胞骨架内,将细胞结构力学变化转化为光学信号,可能带来细胞力学研究的革命.随着细胞结构动力学研究内容的不断深入,特别是太空时代细胞力学稳态的打破,细胞结构动力学将在生命及医学研究领域显露出越来越重要的地位. 展开更多
关键词 细胞骨架 结构力学 动力学 FRET 荧光张力探针
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瘢痕疙瘩组织中转醛醇酶活性的研究
18
作者 张一鸣 顾冬民 +2 位作者 张锐 徐桦 德伟 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期357-358,共2页
关键词 瘢痕疙瘩 转醛醇酶活性 逆转录-聚合酶链反应 蛋白质印迹法 测定
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