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IL-12-CAR-T细胞诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立及观察
被引量:
4
1
作者
黎陈铖
刘细细
+6 位作者
陈碧清
田芳
张玮光
杨箐
任江涛
邢芸
朱学军
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期28-34,共7页
目的:通过构建表达IL-12的小鼠CAR-T细胞,探讨经尾静脉将其输注于小鼠体内建立细胞因子释放综合征(CRS模型的方法。方法:构建基于靶向鼠源CD19的CAR分子,包装逆转录病毒载体并感染小鼠T细胞构建mCD19-CAR-T、mCD19/IL-12-CAR-T细胞。通...
目的:通过构建表达IL-12的小鼠CAR-T细胞,探讨经尾静脉将其输注于小鼠体内建立细胞因子释放综合征(CRS模型的方法。方法:构建基于靶向鼠源CD19的CAR分子,包装逆转录病毒载体并感染小鼠T细胞构建mCD19-CAR-T、mCD19/IL-12-CAR-T细胞。通过构建小鼠体内胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型,检测mCD19/IL-12-CAR-T细胞的抗肿瘤活性,ELISA法检测两种CAR-T细胞IL-12和IFN-γ分泌水平;经小鼠尾静脉输注mCD19/IL-12-CAR-T细胞构建CAR-T细胞CRS小鼠模型,流式细胞术检测小鼠血清中IL-6、MCP-1、IL-1、IL-10、TNF-α、IFN-γ等细胞因子的含量,H-E染色法观察荷瘤小鼠肝、脾、肺和肾的病理组织学变化。结果:经过培养扩增的mCD19/IL-12-CAR-T细胞能有效分泌IL-12,CAR阳性率达(56.9±5.4)%;与非靶细胞Panc02或靶细胞Panc02-CD19共培养时,均能高分泌IFN-γ。成功构建小鼠胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型,经小鼠尾静脉注射1×10^(6)个mCD19/IL-12-CAR-T细胞能显著抑制移植瘤的生长,但未能诱发严重CRS;输注2×10^(6)个mCD19/IL-12-CAR-T细胞后,小鼠出现体质量减轻、血清炎性因子水平升高、组织损伤,最终导致死亡等一系列典型CRS表现。结论:成功构建IL-12-CAR-T细胞诱发的小鼠CRS模型,其稳定性好、重复性高,具有广泛的应用前景。
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关键词
嵌合抗原受体
白细胞介素-12
CAR-T细胞疗法
细胞因子释放综合征
胰腺癌细胞
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职称材料
题名
IL-12-CAR-T细胞诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立及观察
被引量:
4
1
作者
黎陈铖
刘细细
陈碧清
田芳
张玮光
杨箐
任江涛
邢芸
朱学军
机构
南京
中医药大学附属医院
南京
中医药大学第一临床医学院
南京
中医药大学附属医院江苏省中医院中心实验室
南京
中医药大学附属医院江苏省中医院血液科
南京
北
恒生
物
科技
有限公司
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期28-34,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.82001206)
江苏省中医院高峰学术人才培养工程(No.y2021rc42)
+2 种基金
医学免疫学国家重点实验室开放课题(No.NKMI2021K18)
江苏省中医药科技发展计划项目(No.ZT202106)
江苏省研究生科研与实践创新计划项目(No.SJCX22_0750,No.KYCX22_1899)。
文摘
目的:通过构建表达IL-12的小鼠CAR-T细胞,探讨经尾静脉将其输注于小鼠体内建立细胞因子释放综合征(CRS模型的方法。方法:构建基于靶向鼠源CD19的CAR分子,包装逆转录病毒载体并感染小鼠T细胞构建mCD19-CAR-T、mCD19/IL-12-CAR-T细胞。通过构建小鼠体内胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型,检测mCD19/IL-12-CAR-T细胞的抗肿瘤活性,ELISA法检测两种CAR-T细胞IL-12和IFN-γ分泌水平;经小鼠尾静脉输注mCD19/IL-12-CAR-T细胞构建CAR-T细胞CRS小鼠模型,流式细胞术检测小鼠血清中IL-6、MCP-1、IL-1、IL-10、TNF-α、IFN-γ等细胞因子的含量,H-E染色法观察荷瘤小鼠肝、脾、肺和肾的病理组织学变化。结果:经过培养扩增的mCD19/IL-12-CAR-T细胞能有效分泌IL-12,CAR阳性率达(56.9±5.4)%;与非靶细胞Panc02或靶细胞Panc02-CD19共培养时,均能高分泌IFN-γ。成功构建小鼠胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型,经小鼠尾静脉注射1×10^(6)个mCD19/IL-12-CAR-T细胞能显著抑制移植瘤的生长,但未能诱发严重CRS;输注2×10^(6)个mCD19/IL-12-CAR-T细胞后,小鼠出现体质量减轻、血清炎性因子水平升高、组织损伤,最终导致死亡等一系列典型CRS表现。结论:成功构建IL-12-CAR-T细胞诱发的小鼠CRS模型,其稳定性好、重复性高,具有广泛的应用前景。
关键词
嵌合抗原受体
白细胞介素-12
CAR-T细胞疗法
细胞因子释放综合征
胰腺癌细胞
Keywords
chimeric antigen receptor(CAR)
IL-12
CAR-T cell therapy
cytokine release syndrome(CRS)
pancreatic cancer cell
分类号
R730.51 [医药卫生—肿瘤]
R735.9 [医药卫生—临床医学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
IL-12-CAR-T细胞诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立及观察
黎陈铖
刘细细
陈碧清
田芳
张玮光
杨箐
任江涛
邢芸
朱学军
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
4
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