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年龄对人细胞毒性T淋巴细胞和自然杀伤细胞中穿孔素表达的影响 被引量：5
1
作者 李芳秋 方蓉 +1 位作者 章金春 孟奎 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期562-564,共3页
目的　通过研究健康儿童、成人和老年人外周血淋巴细胞 (PBL)中细胞毒效应分子穿孔素 (PFP)的表达水平的变化 ,了解细胞毒性T细胞 (CTL )的杀伤活性随年龄增长而下降的分子机制。方法　利用抗人PFP、抗人CD3和抗人CD5 6单克隆抗体 (mAb... 目的　通过研究健康儿童、成人和老年人外周血淋巴细胞 (PBL)中细胞毒效应分子穿孔素 (PFP)的表达水平的变化 ,了解细胞毒性T细胞 (CTL )的杀伤活性随年龄增长而下降的分子机制。方法　利用抗人PFP、抗人CD3和抗人CD5 6单克隆抗体 (mAb) ,采用单标记免疫组化染色法 ,检测外周血单个核细胞 (PBMC)中PFP的表达。采用双标记免疫组化染色法 ,检测上述细胞表面标志CD3或CD5 6的表达和细胞内PFP的表达。结果　儿童组、成人组及老年组PBL中表达PFP阳性细胞的百分率 (% ) ,分别为 (2 6 .4± 2 .7) % ,(2 1.6± 3.2 ) %和 (13.4± 2 .0 ) % ,老年组明显下降 ,与其他两组相比较P <0 .0 0 1。 3个年龄组CD3+ T细胞表达PFP的阳性率 (% ) ,分别为 (30 .1± 4 .8) %、(2 1.4± 7.3) %和 (18.8± 4 .2 ) % ,随年龄的增长而显著下降。3个年龄组CD5 6 +NK细胞PFP的表达差别不显著。结论　健康人PBL中PFP的表达随年龄增长而递减 ,CD3+ T细胞亚群PFP表达水平的下降尤其显著。 展开更多
关键词 年龄 穿孔素 细胞毒性T淋巴细胞 自然杀伤细胞 双标记免疫组化染色法
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人亲环素A基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
2
作者 李芳秋 赵权 +1 位作者 武建国 单祥年 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期210-211,共2页
人亲环素Ａ基因的克隆及在大肠杆菌中的表达李芳秋赵权武建国单祥年环孢素Ａ（ＣｓＡ）是防治器官移植免疫排斥及自身免疫病的重要药物，该药发挥作用必须由体内受体蛋白，即亲环素（ＣｙＰ）来介导。ＣｙＰ是一个功能相关的蛋白家族，... 人亲环素Ａ基因的克隆及在大肠杆菌中的表达李芳秋赵权武建国单祥年环孢素Ａ（ＣｓＡ）是防治器官移植免疫排斥及自身免疫病的重要药物，该药发挥作用必须由体内受体蛋白，即亲环素（ＣｙＰ）来介导。ＣｙＰ是一个功能相关的蛋白家族，具有肽基脯氨酸顺／反异构酶（ＰＰＩ... 展开更多
关键词 亲环素A 基因克隆 大肠杆菌 表达
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全长人穿孔素cDNA的克隆与3′端部分表达 被引量：1
3
作者 李芳秋 周向阳 等 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第6期472-474,共3页
目的 克隆人穿孔素（perforin,PFP)基因并选择性地体外表达抗原特异性C端肽段。方法 利用RT－PCR技术，从人肝总RNA中克隆全长PFP cDNA并进行序列测定分析。将编码PFPC端（hPFP-C)125个氨基酸的cDNA片段亚克隆，并插入载体pGEX-2T中... 目的 克隆人穿孔素（perforin,PFP)基因并选择性地体外表达抗原特异性C端肽段。方法 利用RT－PCR技术，从人肝总RNA中克隆全长PFP cDNA并进行序列测定分析。将编码PFPC端（hPFP-C)125个氨基酸的cDNA片段亚克隆，并插入载体pGEX-2T中用IPTG诱导融合蛋白表达。目的肽段采用谷胱基肽琼脂糖亲和层析和凝血酶酶切纯化，并用血法测定其生物学活性。结果 克隆的全长人PFP cDNA与已发表的PFP基因序列相比较，有4个碱基不同，导致3个氨基酸残基改变。重组基因在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达的融合蛋白的相对分子质量（Mr)为４００００,纯化后的hPFP-C肽段Mr为14000。重组hPFP-C肽段与兔红细胞共育，呈现钙依赖的血活性。结论 人PFP基因可能存在多态性，其C端肽段亦有溶解兔红细胞的活性。 展开更多
关键词 穿孔素 基因克隆 基因表达 溶血活性
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