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人β神经生长因子在大肠杆菌中的高表达 被引量：2
1
作者 张剑 张锡然 +2 位作者 李朝军 张林元 柴建华 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期429-433,共5页
将编码人β神经生长因子(Huβ-HGF)的基因克隆到由T7噬菌体启动子控制的pET11c大肠杆菌表达载体中,重组质粒经鉴定含有Huβ-NGF基因,未解聚的表达产物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),结果显示出二聚体27kD的蛋白带。而完全解聚的... 将编码人β神经生长因子(Huβ-HGF)的基因克隆到由T7噬菌体启动子控制的pET11c大肠杆菌表达载体中,重组质粒经鉴定含有Huβ-NGF基因,未解聚的表达产物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),结果显示出二聚体27kD的蛋白带。而完全解聚的表达产物SDS-PAGE显示出一条13β5kD单体带。经凝胶电泳扫描,表达带占菌体总蛋白的14.5％。用兔抗鼠β—NGF的多克隆抗体进行的Western-Blot的结果表明,二聚体同单体都有免疫原性。在生物活性的鉴定中,菌体表达产物可以使小鸡鸡胚的背根神经节产生神经元突起,由此可以证明该表达产物有较高的生物活性。 展开更多
关键词 β神经生长因子 基因表达 大肠杆菌
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DIG核酸探针检测病鸡羽髓MDV的研究 被引量：1
2
作者 李光富 陈溥言 +4 位作者 蔡宝祥 张林元 邓小昭 刁振宇 陈华标 《中国畜禽传染病》 CSCD 1995年第5期10-11,共2页
拔取病鸡含羽髓的羽毛,用免疫琼扩试验检测,检出率为80％;将病鸡羽髓经超声波处理、SDS和蛋白酶K裂解、经酚和氯仿抽提后,用乙醇沉淀病毒核酸,用我们研制的以Digoxigenin标记的MDV核酸探针检测,检出率为100％。结果表明,核酸探针是检测... 拔取病鸡含羽髓的羽毛,用免疫琼扩试验检测,检出率为80％;将病鸡羽髓经超声波处理、SDS和蛋白酶K裂解、经酚和氯仿抽提后,用乙醇沉淀病毒核酸,用我们研制的以Digoxigenin标记的MDV核酸探针检测,检出率为100％。结果表明,核酸探针是检测MDV灵敏特异的方法。 展开更多
关键词 鸡病 马立克氏病 病毒 鸡羽髓 核酸探针
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干扰素与临床应用
3
作者 李光富 张林元 《河北医学》 CAS 1996年第1期66-69,共4页
干扰素与临床应用（２１００２２）南京军事医学研究所分子遗传室李光富，张林元１９５７年Ｉｓａｃｃｓ和Ｌｉｎｄｅｎｍａｎｎ发现了干扰素［１］。经几十年的研究和１０多年的临床应用表明，干扰素在同种细胞上具有广谱的抗病毒，抗... 干扰素与临床应用（２１００２２）南京军事医学研究所分子遗传室李光富，张林元１９５７年Ｉｓａｃｃｓ和Ｌｉｎｄｅｎｍａｎｎ发现了干扰素［１］。经几十年的研究和１０多年的临床应用表明，干扰素在同种细胞上具有广谱的抗病毒，抗肿瘤、抗细胞分裂、免疫调节等多种生... 展开更多
关键词 干扰素 临床应用 药理
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利用杆状病毒表达载体研制兽用重组疫苗的进展 被引量：2
4
作者 罗满林 张林元 +1 位作者 陈溥言 蔡宝祥 《中国畜禽传染病》 CSCD 1994年第5期55-57,共3页
利用杆状病毒表达载体研制兽用重组疫苗的进展罗满林，张林元，陈溥言，蔡宝祥（南京农业大学动物医学系）昆虫杆状病毒正受到人们的日益重视。这不仅因为它可以作为安全、有效、无害的生物防治剂，而且由于Ｓｍｉｔｈ和Ｓｕｍｍｅｒｓ... 利用杆状病毒表达载体研制兽用重组疫苗的进展罗满林，张林元，陈溥言，蔡宝祥（南京农业大学动物医学系）昆虫杆状病毒正受到人们的日益重视。这不仅因为它可以作为安全、有效、无害的生物防治剂，而且由于Ｓｍｉｔｈ和Ｓｕｍｍｅｒｓ［１］创立并发展起来的昆虫杆状病毒... 展开更多
关键词 杆状病毒 表达载体 兽用重组疫苗
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乙肝病毒e抗原基因在大肠杆茵中高表达 被引量：3
5
作者 邓小昭 张林元 +1 位作者 何亮 张志敏 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第5期290-293,共4页
取pZD 8703质粒DNA(本室构建的高表达乙肝核心抗原基因质粒)用Ava Ⅰ酶切开,Bal 31酶消化,加四种核甘酸dNTP、DNA聚合酶大片段酶补平后,用T_4 DNA连接酶连接,再用EcoRI酶消化,回收EcoRI小片段连接到pJLA 503的EcoRI位点,转化受体菌JM103... 取pZD 8703质粒DNA(本室构建的高表达乙肝核心抗原基因质粒)用Ava Ⅰ酶切开,Bal 31酶消化,加四种核甘酸dNTP、DNA聚合酶大片段酶补平后,用T_4 DNA连接酶连接,再用EcoRI酶消化,回收EcoRI小片段连接到pJLA 503的EcoRI位点,转化受体菌JM103,获得在P_RP_L启动子控制下,由温度调节CIts 857开启和关闭的高表达乙肝e抗原(HBeAg)的重组体。用抗HBe-β)单克隆酶标抗体配套的ELISA双抗体夹心法测定经超声波处理的细菌原液,HBeAg的终效价在1:10240以上,只含少量HBeAg。可以代替血清HBeAg用作配套检测试剂。 展开更多
关键词 基因 基因表达 乙型肝炎病毒 E抗原
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人α_1－干扰素基因真核表达载体的构建及其活性 被引量：1
6
作者 李光富 邓小昭 +3 位作者 张林元 刁振宇 陈华标 柴建华 《药物生物技术》 CAS CSCD 1996年第2期78-81,共4页
选用与ＨｕＩＦＮ－α１基因及其信号肽相应的引物，采用ＰＣＲ技术，从中国人血白细胞染色体中分离带有信号肽ＩＦＮ－α１基因片段，分别克隆到质粒Ｍ１３ｍｐ１９和Ｍ１３ｍｐ１８中，通过序列分析进行鉴定，然后克隆到家蚕多角体病... 选用与ＨｕＩＦＮ－α１基因及其信号肽相应的引物，采用ＰＣＲ技术，从中国人血白细胞染色体中分离带有信号肽ＩＦＮ－α１基因片段，分别克隆到质粒Ｍ１３ｍｐ１９和Ｍ１３ｍｐ１８中，通过序列分析进行鉴定，然后克隆到家蚕多角体病毒（１３０ｍｂｙｘｍｏｒｉＮｕｃｌｅａｒＰｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓＶｉｒｕｓ，ＢｍＮＰＶ）载体ＰＢＦ５的ＥｃｏＲＩ和ＸｂａＩ之间，用合成的相应寡核苷酸片段为引物进行双链测序，鉴定为阳性重组转移载体后，将其ＤＮＡ和ＢｍＮＰＶ基因组ＤＮＡ共转染家蚕细胞，筛选出重组病毒，再将其感染家蚕细胞，测得细胞培养上清中ＩＦＮ活性为１．０×１０６ＩＵ／ｍｌ。 展开更多
关键词 BMNPV 转移载体 基因表达 Α-干扰素
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杆状病毒基因工程进展
7
作者 邓小昭 张林元 陈宜峰 《生物工程进展》 CAS CSCD 1993年第6期7-11,共5页
近年来,应用昆虫杆状病毒作载体在昆虫细胞或虫体中高效表达外源基因的技术已得到广泛的推广应用。这一基因工程系统安全、高效、容量大,表达产物具有生物活性,是很有潜力的系统之一,已有数百种动物、植物、微生物,病毒的基因在这一系... 近年来,应用昆虫杆状病毒作载体在昆虫细胞或虫体中高效表达外源基因的技术已得到广泛的推广应用。这一基因工程系统安全、高效、容量大,表达产物具有生物活性,是很有潜力的系统之一,已有数百种动物、植物、微生物,病毒的基因在这一系统中成功表达,并有多篇综述文章和专著详细介绍这一载体表达系统。本文将概述杆状病毒分子生物学及基因工程的基本原理,主要介绍近几年来的研究与进展。 展开更多
关键词 遗传工程 杆状病毒 基因工程
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