肺癌组织中端粒酶基因表达的研究

1

作者 熊小熊 周宏远 +2 位作者 周清华 陈蔚蔚 丁兰 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第S1期226-229,共4页

运用RT PCR扩增法 ,检测 6 8例肺癌组织、6 8例癌旁组织、2 0例良性病变组织中hTR ,hEST2 的表达 ,结果显示 :6 8例肺癌组织中hTR ,hEST2 的阳性率分别为 85.3% ,86 .7% .在癌旁组织中hTRhEST2 的阳性率为 32 .3% ,12 % .2 0例良性病变... 运用RT PCR扩增法 ,检测 6 8例肺癌组织、6 8例癌旁组织、2 0例良性病变组织中hTR ,hEST2 的表达 ,结果显示 :6 8例肺癌组织中hTR ,hEST2 的阳性率分别为 85.3% ,86 .7% .在癌旁组织中hTRhEST2 的阳性率为 32 .3% ,12 % .2 0例良性病变中hTR ,hEST2的阳性率分别为 2 5% ,10 % ,hEST2 ,hTR基因的表达水平随肺癌的分化降低 ,而淋巴结转移呈上升趋势 ,与端粒酶活性的调控作用尚有待进一步的研究 . 展开更多

关键词 肺癌 HTR hEST_2

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毫米波辐射对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：2

2

作者 王艳萍 袁淑兰 +3 位作者 陈晓禾 杨燕 宋毅 陈念永 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第S1期264-268,共5页

目的　探讨毫米波对人鼻咽癌CNE1细胞系抑制生长、诱导凋亡的生物学效应及作用机制 .方法　以波长为 7.1mm ,频率为 4 2 .2GHz ,功率密度为 1mW /cm2 进行幅射 ,通过细胞计数法检测毫米波对该细胞系生长的影响 ;用光学显微镜、流式细胞... 目的　探讨毫米波对人鼻咽癌CNE1细胞系抑制生长、诱导凋亡的生物学效应及作用机制 .方法　以波长为 7.1mm ,频率为 4 2 .2GHz ,功率密度为 1mW /cm2 进行幅射 ,通过细胞计数法检测毫米波对该细胞系生长的影响 ;用光学显微镜、流式细胞仪研究毫米波诱导细胞凋亡及对凋亡相关基因 p53,Fas ,Bcl 2及Bax蛋白表达的影响 .结果　利用上述条件的毫米波辐射 ,1次 /d ,30min/次 ,照射 4次以上 ,细胞生长抑制率和克隆形成抑制率分别为52 .2 %和 30 .5% ,光镜下可见到明显的凋亡细胞 ,FCM示凋亡百分比显著增加 ,但对细胞周期分布影响不明显 ,可使细胞Bcl 2表达下降 ,Fas表达增加 ,而对 p53和Bax的表达无影响 .结论　一定频率和能量的毫米波辐照适当的时间后 ,能显著抑制CNE1细胞生长、诱导细胞凋亡 ,其凋亡诱导作用机制可能是非p53依赖的过程 ,与细胞周期的调控无关 ,而主要通过调节Bcl 2和Fas等基因的表达来实现 . 展开更多

关键词 毫米波 鼻咽癌 细胞株 细胞凋亡 基因表达

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叶酸诱导人肝癌细胞凋亡及其机制的研究 被引量：5

3

作者 袁淑兰 王艳萍 +3 位作者 李良平 陈晓禾 宋毅 杨燕 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期242-245,共4页

目的　研究叶酸诱导人肝癌细胞凋亡的作用及其机制。方法　应用叶酸连续处理体外培养的人肝癌细胞(SMMC 772 1) ,4天后光镜及电镜观察细胞形态改变 ,细胞计数测定细胞生长及增殖情况 ,DNA凝胶电泳分析DNA改变 ,流式细胞仪检测细胞周期... 目的　研究叶酸诱导人肝癌细胞凋亡的作用及其机制。方法　应用叶酸连续处理体外培养的人肝癌细胞(SMMC 772 1) ,4天后光镜及电镜观察细胞形态改变 ,细胞计数测定细胞生长及增殖情况 ,DNA凝胶电泳分析DNA改变 ,流式细胞仪检测细胞周期分布、细胞凋亡指数及凋亡相关基因及其表达的改变。结果　 10 μg/ml叶酸可诱导SMMC 772 1细胞出现凋亡特征性形态改变 ,其细胞DNA电泳呈现“梯状”断裂现象 ,细胞凋亡指数为 16 8% (空白对照组为6 9% ) ,S期细胞减少 ,细胞生长和增殖被明显抑制 ,且凋亡相关基因fas和p5 3表达增加 ,而bcl 2和TGF β1表达降低。结论　叶酸具有诱导人肝癌细胞凋亡的作用 。 展开更多

关键词 叶酸 肿瘤细胞 p53 BCL-2 FAS TGF-Β1 基因产物 凋亡 肝癌

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肺癌树突状融合细胞的制备及其生物学特征 被引量：6

4

作者 陆燕蓉 林苹 +4 位作者 张洁 王修杰 周宏远 黄孝忠 宁奇志 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期60-63,共4页

目的探讨利用杂交瘤技术制备肿瘤疫苗的方法 ,研究肺癌树突状融合细胞的生物学特征。方法　用 PEG法将 HGPRT缺陷型 L ewis肺癌细胞株 AL990 1 与小鼠骨髓诱生的树突状细胞进行融合 ,HAT筛选融合克隆 ;S- P免疫细胞化学法鉴定融合细胞表... 目的探讨利用杂交瘤技术制备肿瘤疫苗的方法 ,研究肺癌树突状融合细胞的生物学特征。方法　用 PEG法将 HGPRT缺陷型 L ewis肺癌细胞株 AL990 1 与小鼠骨髓诱生的树突状细胞进行融合 ,HAT筛选融合克隆 ;S- P免疫细胞化学法鉴定融合细胞表型 ;对融合细胞进行生长曲线、克隆形成和体内成瘤等鉴定。结果树突状细胞与 AL990 1 以 6∶ 1比例融合 ,融合率约为 30 %。融合细胞 FL D- A1 1 可在体外传代培养 ,表型为 CD80 + 、CD40 + 、H- 2 Kb + 、MIDC+ 和肺癌抗原阳性。 FL D- A1 1不能在软琼脂培养基中形成克隆 ,动物体内不能形成肿瘤。结论利用杂交瘤技术制备的 FL D- A1 1 细胞 ,具备了在体内激活抗特异性地抗肿瘤细胞免疫功能的分子表型 ;该细胞不存在体内成瘤的危险。本研究为 FL D- A1 1 作为肿瘤疫苗 。 展开更多

关键词 肺癌 树突状细胞 细胞融合 生物学特征

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叶酸诱导肝癌细胞凋亡及其分子机制的研究 被引量：4

5

作者 袁淑兰 王艳萍 +3 位作者 李良平 陈晓禾 宋毅 杨燕 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第S1期259-263,共5页

应用叶酸连续处理体外培养的人肝癌细胞 (SMMC 772 1) ,4d后光镜及电镜观察细胞形态改变 ,通过细胞生长曲线测定细胞生长及增殖情况 ,流式细胞仪检测细胞周期分布、细胞凋亡指数及凋亡相关基因及其表达的改变 ,以探讨叶酸诱导肝癌细胞... 应用叶酸连续处理体外培养的人肝癌细胞 (SMMC 772 1) ,4d后光镜及电镜观察细胞形态改变 ,通过细胞生长曲线测定细胞生长及增殖情况 ,流式细胞仪检测细胞周期分布、细胞凋亡指数及凋亡相关基因及其表达的改变 ,以探讨叶酸诱导肝癌细胞凋亡的作用及其分子机制 .结果显示 ,10 μg/mL叶酸可诱导SMMC 772 1细胞出现凋亡特征性形态改变 ,细胞凋亡指数为 16 .8% (空白对照组为 6 .9% ) ,S期细胞减少、细胞生长和增殖被明显抑制 ,且凋亡相关基因fas和p53表达降低 ,而bcl 2和TGF β1表达增加 .研究提示 ,叶酸具有诱导人肝癌细胞凋亡的作用 ,其分子机制可能与调控细胞凋亡相关基因的表达有关 . 展开更多

关键词 叶酸 肝癌细胞 凋亡

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恶性肿瘤染色体端粒行为异常与癌变发生的关系研究 被引量：1

6

作者 周宏远 肖林 +3 位作者 严军 陈蔚蔚 刘永惠 周清华 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2001年第1期1-3,共3页

目的　探讨恶性肿瘤染色体端粒行为异常与癌变发生的关系。方法　粒端联合采用微量全血培养法制备淋巴细胞染色体 ;端粒长度用 Southern杂交法 ;端粒酶活性用 TRAP- PCR法。结果　食管癌、鼻咽癌、肺癌染色体端粒联合率分别为 1 4.38%、... 目的　探讨恶性肿瘤染色体端粒行为异常与癌变发生的关系。方法　粒端联合采用微量全血培养法制备淋巴细胞染色体 ;端粒长度用 Southern杂交法 ;端粒酶活性用 TRAP- PCR法。结果　食管癌、鼻咽癌、肺癌染色体端粒联合率分别为 1 4.38%、35.0 7%、2 4 .40 % ,均高于对照组9.83%、2 0 .2 7%、1 5.60 % (P<0 .0 1 ) ;鼻咽癌、肺癌端粒长度变化分别为伸长 1 6.67%、1 6.67% ,缩短 76.67%、69.0 4 % ,长度无变化 6.66%、1 4.2 9% ;端粒酶活性阳性率为鼻咽癌 82 .1 4% ,肺癌 (非小细胞肺癌 NSCLC 78.3% ,小细胞肺癌 SCLC 1 0 0 % )。结论　端粒联合率的增高、端粒长度的缩短及端粒酶活性表达与细胞癌变密切相关。 展开更多

关键词 恶性肿瘤 端粒 端粒酶 癌变

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恶性肿瘤细胞株端粒酶活性的研究 被引量：1

7

作者 陈蔚蔚 周宏远 +2 位作者 张洁 王艳萍 陈晓禾 《四川肿瘤防治》 2000年第2期73-75,共3页

目的 :探讨非放射性定量的端粒重复序列扩增法(TRAP)在检测人类恶性肿瘤细胞株端粒酶活性中的应用价值。方法 :采用银染定量的TRAP方法检测SMMC 7721、K562、CNE 1、A549、HL 60细胞株的端粒酶活性。结果 :9株人类恶性肿瘤细胞株中8株... 目的 :探讨非放射性定量的端粒重复序列扩增法(TRAP)在检测人类恶性肿瘤细胞株端粒酶活性中的应用价值。方法 :采用银染定量的TRAP方法检测SMMC 7721、K562、CNE 1、A549、HL 60细胞株的端粒酶活性。结果 :9株人类恶性肿瘤细胞株中8株呈端粒酶的阳性而其经热处理的标本均为阴性。结论 :非放射性银染定量的TRAP方法具有高可信度、特异性及敏感性 ,且8株人类恶性肿瘤细胞株均有端粒酶活性表达。 展开更多

关键词 端粒酶 恶性肿瘤细胞株 端粒征段重复序列扩增法

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人肺癌染色体端粒联合的比较观察 被引量：2

8

作者 严军 周宏远 +4 位作者 肖林 周清华 吴纯清 赵峰 王允 《中国肺癌杂志》 CAS 2000年第2期94-97,共4页

目的　探讨人肺癌细胞染色体端粒联合异常的规律。方法　应用染色体制备法检测人肺腺癌细胞株A5 49细胞、15例肺癌患者外周血淋巴细胞的端粒联合率 ,并以 15例良性疾病和正常人作对照。结果　肺癌组和非癌对照组的端粒联合率存在显著差... 目的　探讨人肺癌细胞染色体端粒联合异常的规律。方法　应用染色体制备法检测人肺腺癌细胞株A5 49细胞、15例肺癌患者外周血淋巴细胞的端粒联合率 ,并以 15例良性疾病和正常人作对照。结果　肺癌组和非癌对照组的端粒联合率存在显著差异 (P <0 .0 0 5 ) ,人肺腺癌细胞株A5 49中端粒联合率显著高于肺癌组和非癌对照组 (P <0 .0 0 5 ) ;肺癌组细胞染色体中B、C、D组的端粒联合率明显高于非癌对照组 (B组P <0 .0 5 ,C、D组P <0 .0 0 5 )。结论　与非癌对照组比较 ,人肺腺癌细胞株A5 49及肺癌患者外周血淋巴细胞染色体存在着更显著的端粒联合现象 ,且多发于染色体的B、C、D组 ,可为肺癌诊断和预后的进一步研究提供有价值的细胞遗传学资料。 展开更多

关键词 肺肿瘤 染色体 端粒联合 细胞遗传学

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毫米波辐照诱导鼻咽癌细胞凋亡及分子机制的实验研究 被引量：1

9

作者 王艳萍 袁淑兰 +3 位作者 陈晓禾 杨燕 宋毅 陈念永 《红外与毫米波学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第4期283-286,共4页

采用细胞计数、光镜和 FCM等方法检测毫米波对人鼻咽癌 CNE1 细胞增殖、细胞凋亡及相关基因表达的影响 ,结果发现 :波长为 7.1mm,频率为 42 .2 GHz,功率密度为 1m W/ cm2 的毫米波辐照 ,1次 /日 ,30 min/次 ,照射 4次 ,能显著抑制 CNE1... 采用细胞计数、光镜和 FCM等方法检测毫米波对人鼻咽癌 CNE1 细胞增殖、细胞凋亡及相关基因表达的影响 ,结果发现 :波长为 7.1mm,频率为 42 .2 GHz,功率密度为 1m W/ cm2 的毫米波辐照 ,1次 /日 ,30 min/次 ,照射 4次 ,能显著抑制 CNE1 细胞增殖和克隆形成 ;并诱导细胞凋亡 ,光镜下可见到明显的凋亡细胞 ,FCM示凋亡百分比显著增加 .FCM结果表明其增殖抑制作用与 P2 1表达上调及 Cyclin D1 表达下调有关 ,其凋亡诱导机制可能是非P5 3依赖的途径 ,而主要通过上调 c- Myc、下调 Bcl- 2和 展开更多

关键词 毫米波 鼻咽癌细胞株 凋亡 基因表达 分子机制

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肺癌染色体端粒行为异常与癌变的关系 被引量：1

10

作者 严军 周宏远 +4 位作者 肖林 周清华 王允 张文安 翟朝阳 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期362-363,共2页

关键词 肺癌 染色体端粒行为异常 癌变

原文传递

小鼠肺癌B_(7)融合细胞的制备及生物学性质 被引量：1

11

作者 林苹 陆燕蓉 +2 位作者 张洁 黄孝忠 江映红 《中国肺癌杂志》 CAS 2000年第6期438-440,共3页

目的　改善肿瘤细胞共刺激分子B7的表达。方法　将ALA970 2 肺癌细胞与活化的B淋巴细胞用聚乙二醇进行细胞融合 ,经ELISA及免疫细胞化学筛选后 ,用S P免疫细胞化学染色观察融合细胞的肺癌抗原及B7分子的表达 ,并观察融合细胞的体内外生... 目的　改善肿瘤细胞共刺激分子B7的表达。方法　将ALA970 2 肺癌细胞与活化的B淋巴细胞用聚乙二醇进行细胞融合 ,经ELISA及免疫细胞化学筛选后 ,用S P免疫细胞化学染色观察融合细胞的肺癌抗原及B7分子的表达 ,并观察融合细胞的体内外生长情况。结果　经筛选获得一株融合细胞FLB2C。融合细胞既表达肺癌抗原 ,又表达B7分子。体外培养显示其贴壁性较ALA970 2 肺癌细胞减弱 ,生长明显变缓 ,细胞倍增时间延长 ,不能在软琼脂中形成集落。接种融合细胞亦不能在小鼠体内成瘤 ,而接种ALA970 2 细胞的 10只小鼠中 6例腋下出现肿瘤生长 ,3例还发生肺转移。结论　通过细胞融合方法可以有效改善肿瘤细胞的B7分子表达 ,从而提高肿瘤细胞的抗原性。融合细胞FLB2C的致瘤性明显减弱 ,为制备更有效的肺癌疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 肺癌融合细胞 B_(7)分子表达 构建 生物学性质

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小鼠肺癌细胞与树突状细胞融合的研究 被引量：1

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作者 林苹 陆燕蓉 +2 位作者 张洁 黄孝忠 宁其志 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期245-246,256,共3页

目的使肺癌细胞表达共刺激分子,探讨其作为疫苗的可能性。方法小鼠骨髓细胞在体外经GM-CSF和TNF-α诱导,使之成为成熟树突状细胞(BmDC)。将其与小鼠Lewis肺癌细胞系AL9901融合,并以S-P免疫细胞化学染色法检测融合细胞和BmDC上有关分子... 目的使肺癌细胞表达共刺激分子,探讨其作为疫苗的可能性。方法小鼠骨髓细胞在体外经GM-CSF和TNF-α诱导,使之成为成熟树突状细胞(BmDC)。将其与小鼠Lewis肺癌细胞系AL9901融合,并以S-P免疫细胞化学染色法检测融合细胞和BmDC上有关分子的表达。结果通过GM-CSF和TNF-α诱导获得BmDC,以诱导5d时收获为佳。获得的BmDC能高表达B7-1和CD40分子,与肺癌细胞融合后,获得的融合细胞仍能高表达B7-1和CD40分子。结论通过将小鼠肺癌细胞与树突状细胞融合,使肺癌细胞获得了BmDC表达的B7-1和CD40分子,从而提高了其免疫原性,为制备肺癌疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 肺癌细胞 树突状细胞 细胞融合 实验研究

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抗8-氮鸟嘌呤小鼠肺癌细胞株ALA_(9702)的建立 被引量：1

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作者 林苹 陆燕蓉 +2 位作者 周宏远 张洁 黄孝忠 《中国胸心血管外科临床杂志》 CAS 1999年第3期140-142,共3页

目的　为了通过细胞融合研制肺癌疫苗，需要建立有适合细胞融合的肺癌抗原细胞。方法　用８氮鸟嘌呤（８ａｚａｇｕａｎｉｎｅ，８ Ａ Ｇ）从小鼠肺癌细胞 Ｌ Ａ７９５ 诱导抗８ Ａ Ｇ 细胞株 Ａ Ｌ Ａ９７０２ ，并鉴定其生... 目的　为了通过细胞融合研制肺癌疫苗，需要建立有适合细胞融合的肺癌抗原细胞。方法　用８氮鸟嘌呤（８ａｚａｇｕａｎｉｎｅ，８ Ａ Ｇ）从小鼠肺癌细胞 Ｌ Ａ７９５ 诱导抗８ Ａ Ｇ 细胞株 Ａ Ｌ Ａ９７０２ ，并鉴定其生物学特性及成瘤性。结果　 Ａ Ｌ Ａ９７０２ 细胞在１．３１×１０－ ４ｍ ｏｌ／ Ｌ ８ Ａ Ｇ 培养液中生长了１ 年，在 Ｈ Ａ Ｔ培养液中不能形成集落，并保持了来源细胞 Ｌ Ａ７９５ 的生长特性、染色体数目、成瘤性及肺转移性。　结论　 Ａ Ｌ Ａ９７０２细胞保持了来源细胞的生物学性质及成瘤性质，是一株稳定的抗８ Ａ Ｇ的小鼠肺癌细胞株，将作为适合细胞融合的抗原细胞，为研制肺癌疫苗，建立对肺癌有效的特异性免疫治疗奠定良好的基础。 展开更多

关键词 8-氮鸟嘌呤 肺癌 细胞株 疫苗 抗原细胞

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表达B_7分子的小鼠肺癌细胞的构建

14

作者 林苹 陆燕蓉 +1 位作者 张洁 黄孝忠 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期66-67,71,共3页

目的改善肿瘤细胞B7分子表达。方法将小鼠ALA9702肺癌细胞与活化的B淋巴细胞用PEG进行细胞融合,经ELISA及免疫细胞化学筛选后,观察了融合细胞的体外生长曲线,并用S-P免疫细胞化学染色观察了融合细胞的肺癌抗原及B7分子的表达。结果经筛... 目的改善肿瘤细胞B7分子表达。方法将小鼠ALA9702肺癌细胞与活化的B淋巴细胞用PEG进行细胞融合,经ELISA及免疫细胞化学筛选后,观察了融合细胞的体外生长曲线,并用S-P免疫细胞化学染色观察了融合细胞的肺癌抗原及B7分子的表达。结果经筛选获得1株融合细胞FLB2C,既表达肺癌抗原又表达B7分子,该细胞在体外培养中贴壁性减弱,生长变慢。结论通过细胞融合方法可以有效改善肿瘤细胞的B7分子表达,从而提高肿瘤细胞的抗原性。 展开更多

关键词 融合细胞 B7分子表达 构建 肺肿瘤

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鼻咽癌染色体端粒长度变化的研究

15

作者 肖林 周宏远 +2 位作者 严军 刘永惠 宋毅 《华西医科大学学报》 CSCD 1999年第3期262-264,共3页

为探讨人鼻咽癌染色体端粒行为异常与癌变的关系，应用 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 印迹杂交对 ３０ 例鼻咽癌和３０例与之年龄、性别配对的正常对照进行了分析。结果：鼻咽癌的端粒长度与对照相比显著缩短。在鼻咽癌中，１６１７％ 显示端粒... 为探讨人鼻咽癌染色体端粒行为异常与癌变的关系，应用 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 印迹杂交对 ３０ 例鼻咽癌和３０例与之年龄、性别配对的正常对照进行了分析。结果：鼻咽癌的端粒长度与对照相比显著缩短。在鼻咽癌中，１６１７％ 显示端粒伸长，７６．６７％ 显示端粒缩短，而６．６７％ 显示与对照相同的端粒长度。分析了 ３０ 例正常人外周血淋巴细胞端粒长度的变化，可见染色体端粒的长度随年龄增长而逐渐缩短（ｒ＝ － ０．３９１３， Ｐ＜ ０．０５），并且端粒每年平均缩短 ３９ｂｐ 的核苷酸。结果提示：人鼻咽癌染色体不稳定可能与端粒长度缩短有关。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 染色体 端粒 端粒长度

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