毛细管电泳中的样品在线富集技术及其应用 被引量：12

1

作者 杜艳艳 刘海清 +1 位作者 贾丽 邢达 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期103-112,共10页

毛细管电泳作为一种快速、高效的分离分析技术,已应用于许多领域。该文就近年来毛细管电泳中的样品堆积、扫集、等速电泳、动态pH连接及固相萃取等样品富集方法的原理进行了简单介绍,并对它们的应用进行了总结和评述,引用文献161篇。

关键词 毛细管电泳 样品富集 样品堆积 扫集 等速电泳 动态pH连接 固相萃取

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溶胶-凝胶法制备硅胶整体柱技术的研究进展

2

作者 刘海清 杜艳艳 +1 位作者 贾丽 邢达 《中国科技成果》 2007年第1期25-27,共3页

整体柱因具有高比表面积、高渗透率、传质快等特点成为近年来柱技术研究领域的热点。在整体柱的制备技术中，溶胶-凝胶法可以在非常温和的条件下完成固定相的合成，可以通过调整反应物的配比，制备具有所要求结构及表面特性的固定相，... 整体柱因具有高比表面积、高渗透率、传质快等特点成为近年来柱技术研究领域的热点。在整体柱的制备技术中，溶胶-凝胶法可以在非常温和的条件下完成固定相的合成，可以通过调整反应物的配比，制备具有所要求结构及表面特性的固定相，是一种很有发展前景的拄制备技术。本文将从溶胶一凝胶法制备整体柱的原理、过程、影响因素以及应用等方面介绍硅胶整体柱的研究进展以及发展趋势。 展开更多

关键词 溶胶-凝胶法 硅胶整体柱 综述

原文传递

磁性微珠的制备及其在生物样品分离富集中的应用 被引量：20

3

作者 柳亚玲 贾丽 邢达 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1225-1232,共8页

磁性微珠作为一种新型的功能材料,广泛应用于磁性材料、生物医学、细胞学、生物工程及分离工程等诸多领域,并显示出强大的生命力。本文对磁性微珠的结构、性质、制备方法及其在生物样品的分离富集等方面的应用,进行了总结和评述,引用文... 磁性微珠作为一种新型的功能材料,广泛应用于磁性材料、生物医学、细胞学、生物工程及分离工程等诸多领域,并显示出强大的生命力。本文对磁性微珠的结构、性质、制备方法及其在生物样品的分离富集等方面的应用,进行了总结和评述,引用文献62篇。 展开更多

关键词 磁流体 磁性微珠 生物分离 富集 评述

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荧光共振能量转移技术对肺腺癌活细胞中消癌平诱导半胱氨酸天冬氨酸酶3活化过程的实时监测(英文) 被引量：12

4

作者 陈同生 王龙祥 +1 位作者 王会营 邢达 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第35期7102-7105,共4页

背景:将生物学技术和光学技术结合起来研究细胞增殖和凋亡的分子机制已成为生物工程学领域的研究热点。目的:应用共聚焦荧光显微成像技术和荧光共振能量转移技术在活细胞中观察消癌平诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制。设计:观察对比实验。单... 背景:将生物学技术和光学技术结合起来研究细胞增殖和凋亡的分子机制已成为生物工程学领域的研究热点。目的:应用共聚焦荧光显微成像技术和荧光共振能量转移技术在活细胞中观察消癌平诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制。设计:观察对比实验。单位:华南师范大学激光生命科学教育部重点实验室暨激光生命科学研究所。材料:实验于2006-10/2007-03在华南师范大学激光生命科学重点实验室暨激光生命科学研究所进行。人类肺腺癌细胞为本实验室培养。消癌平注射液为通化神源药业有限公司生产(国药准字Z20025869),G418购自华美生物公司。质粒SCAT3由Miura教授提供,酶标仪(infinite M200,Tecan,Austria),线粒体定位荧光探针购于Molecular Probe公司。方法:①利用细胞计数试剂盒技术检测不同剂量的消癌平对人类肺腺癌细胞活性的抑制作用。②利用共聚焦荧光显微成像技术和荧光共振能量转移技术在大半个活细胞中实时检测消癌平诱导半胱氨酸天冬氨酸酶3活化的动态过程。③利用荧光检测技术在活细胞中检测消癌平作用后不同时间点的SCAT3的荧光发射谱。主要观察指标:①消癌平作用细胞后检测细胞的活性。②消癌平作用后实时检测SCAT3荧光共振能量转移效率的动态变化。③消癌平作用后线粒体形态的动态变化。结果:①消癌平剂量依赖性抑制肿瘤细胞的活性。②消癌平诱导细胞内半胱氨酸天冬氨酸酶3的活化。③消癌平诱导细胞中线粒体变圆和破裂。结论:消癌平可以诱导人类肺腺癌细胞的凋亡,半胱氨酸天冬氨酸酶3参与了其调控过程。 展开更多

关键词 荧光共聚焦显微成像 荧光共振能量转移 消癌平 人类肺腺癌细胞 凋亡 生物医学工程

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利用基于扫描相机的荧光寿命成像显微技术研究细胞周期 被引量：7

5

作者 王岩 赵羚伶 +6 位作者 陈同生 许改霞 Artem Pliss Tymish Y.Ohulchanskyy Paras N.Prasad 屈军乐 牛憨笨 《中国激光》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第3期127-132,共6页

利用基于扫描相机的荧光寿命成像显微系统,以细胞周期为模型,研究转染绿色荧光蛋白的HeLa细胞的荧光寿命。结果表明,处于周期内不同进程的细胞的荧光寿命为2.50-3.00 ns。处于分裂期的细胞的荧光寿命在1 h内从2.86 ns下降到2.82 ns;在DN... 利用基于扫描相机的荧光寿命成像显微系统,以细胞周期为模型,研究转染绿色荧光蛋白的HeLa细胞的荧光寿命。结果表明,处于周期内不同进程的细胞的荧光寿命为2.50-3.00 ns。处于分裂期的细胞的荧光寿命在1 h内从2.86 ns下降到2.82 ns;在DNA合成前期的8 h内,荧光寿命从2.82 ns下降到2.78 ns。荧光寿命的差异反映了细胞周期中核浆内大分子浓度的变化,对了解细胞周期的分子机制有一定的意义。 展开更多

关键词 成像系统 扫描相机 荧光寿命成像 细胞周期 HELA细胞

原文传递

微流控振荡流反转录聚合酶链式反应快速检测烟草花叶病毒 被引量：7

6

作者 王海英 章春笋 李彧媛 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1286-1290,共5页

建立了一种基于毛细管的振荡流反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的微流控装置检测烟草花叶病毒(TMV)的新方法。根据TMV移动蛋白基因设计一对PCR引物,对粗提纯TMV颗粒直接进行RT-PCR。用0.025%小牛血清蛋白(BSA)对反应毛细管内壁进行静力学... 建立了一种基于毛细管的振荡流反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的微流控装置检测烟草花叶病毒(TMV)的新方法。根据TMV移动蛋白基因设计一对PCR引物,对粗提纯TMV颗粒直接进行RT-PCR。用0.025%小牛血清蛋白(BSA)对反应毛细管内壁进行静力学和动力学钝化,提高了PCR效率。在此微流控装置上进行RT-PCR,流速为70μL/min时,检出限为0.01μg cDNA;可以在17min内成功扩增出179bp的目的DNA片段。 展开更多

关键词 微流控 振荡流 反转录聚合酶链式反应 烟草花叶病毒

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激光技术在聚合酶链式反应微流控芯片中的应用 被引量：4

7

作者 章春笋 邢达 李彧媛 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期259-265,共7页

评述了激光技术在聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)微流控芯片领域中的应用进展,包括激光技术在PCR微流控芯片微加工、微流体物理参数测量、温度循环控制以及芯片上在线产物检测(包括荧光实时定量/终点和毛细管电泳检测)... 评述了激光技术在聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)微流控芯片领域中的应用进展,包括激光技术在PCR微流控芯片微加工、微流体物理参数测量、温度循环控制以及芯片上在线产物检测(包括荧光实时定量/终点和毛细管电泳检测)中的应用。最后,展望了激光技术在未来基于PCR的微全分析系统(micro-total analysis system,μTAS)中的新应用。 展开更多

关键词 激光技术 聚合酶链式反应(PCR) 微流控芯片 微细加工 微流体物理参数测量与控制 评述

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纳米金对PCR扩增效率影响的机制探讨 被引量：4

8

作者 李彧媛 章春笋 《激光生物学报》 CAS CSCD 2011年第4期427-433,共7页

近年来,纳米金粒子对聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的增效作用倍受关注,但是其具体的机制仍未明确提出。研究发现在PCR反应中,纳米粒子的增效作用是存在最佳浓度的,增加DNA聚合酶或者小牛血清蛋白(BSA)可以消除纳米金... 近年来,纳米金粒子对聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的增效作用倍受关注,但是其具体的机制仍未明确提出。研究发现在PCR反应中,纳米粒子的增效作用是存在最佳浓度的,增加DNA聚合酶或者小牛血清蛋白(BSA)可以消除纳米金粒子导致的抑制。我们认为,纳米金粒子可能起到了类似于聚合酶β亚基的作用,提高了DNA聚合酶的延伸能力;而过量纳米金对PCR的抑制作用可能与纳米金结合单链DNA产生的位阻效应有关。 展开更多

关键词 PCR 纳米金粒子 DNA聚合酶 机制

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硅胶整体柱的制备与应用研究进展 被引量：3

9

作者 吕志亮 贾丽 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2008年第B12期204-210,共7页

整体柱是近年来发展起来的一种新型色谱分离介质。其中硅胶基质整体柱具有理想的机械强度,通透性好,及在有机溶剂条件下稳定等优点,在分离科学中有良好的应用前景。本文结合近年来硅胶整体柱的研究成果,从制备方法及应用角度作了综述,... 整体柱是近年来发展起来的一种新型色谱分离介质。其中硅胶基质整体柱具有理想的机械强度,通透性好,及在有机溶剂条件下稳定等优点,在分离科学中有良好的应用前景。本文结合近年来硅胶整体柱的研究成果,从制备方法及应用角度作了综述,并对这一领域的未来发展进行了展望。 展开更多

关键词 硅胶整体柱 制备 应用 综述

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集在线荧光分析的连续流动反转录-聚合酶链式反应快速扩增检测食源致病性轮状病毒 被引量：3

10

作者 章春笋 李彧媛 王海英 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第5期645-651,共7页

采用含RNA反转录(Reverse transcription,RT)和在线荧光分析的连续流动聚合酶链式反应(Poly-merase chain reaction,PCR)微流控技术检测食源致病性轮状病毒。此RT-PCR微流控装置以加热铜块组成恒温带,以聚四氟乙烯毛细管微通道为反应体... 采用含RNA反转录(Reverse transcription,RT)和在线荧光分析的连续流动聚合酶链式反应(Poly-merase chain reaction,PCR)微流控技术检测食源致病性轮状病毒。此RT-PCR微流控装置以加热铜块组成恒温带,以聚四氟乙烯毛细管微通道为反应体系构建而成。采用循环水冷却退火区,此装置能获得低至31℃的退火温度,而且温度控制及其稳定性良好,因而能满足不同PCR的要求。为了充分体现PCR微流控技术的优越性,在线荧光分析被用于检测PCR产物。当流速为7.5 mm/s时,轮状病毒RNA的cDNA扩增和在线荧光分析能在约12 min完成(扩增约10 min,在线分析约2 min)。在此集成化的RT-PCR微流控装置上,1 h可完成轮状病毒RNA的RT-PCR以及其扩增产物的在线荧光分析,样品检出限达到6.4×104 copies/μL。 展开更多

关键词 连续流动反转录-聚合酶链式反应 在线荧光分析 微流控技术 食源致病性轮状病毒

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磁性ODS微粒的制备及其对污水中激素的富集应用 被引量：1

11

作者 柳亚玲 贾丽 徐卉 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期916-920,924,共6页

以甲苯为分散体系，以十八烷基三甲氧基硅烷为Fe3O4磁性粒子表面修饰剂，通过硅烷化法制备了分散性良好、表面带有—（CH2）17CH3活性官能团、平均几何粒径7．5μm、比表面积26．7m^2／g的磁性十八烷基（ODS）微粒。该磁粒经活化后可吸... 以甲苯为分散体系，以十八烷基三甲氧基硅烷为Fe3O4磁性粒子表面修饰剂，通过硅烷化法制备了分散性良好、表面带有—（CH2）17CH3活性官能团、平均几何粒径7．5μm、比表面积26．7m^2／g的磁性十八烷基（ODS）微粒。该磁粒经活化后可吸附疏水性的物质，用甲醇将所吸附的物质洗脱下来进行检测分析，即可以应用于环境中痕量疏水性物质的检测。该文将所制备的磁性ODS微粒应用于污水中雌性激素的提取富集，平均提取效率为23．0％～91．6％。处理后的样品用扫集胶束电动色谱技术（Sweeping MEKC）进行检测。应用该法成功地检测了污水中的痕量雌酮和雌三醇，其质量浓度分别为（5．60±0．08）μg/L和（5．24±0．06）μg/L。研究结果表明，将磁粒提取富集技术与扫集胶束电动色谱技术相结合可以提高污水中痕量物质的检测灵敏度，并减少样品基体中其它物质的干扰。 展开更多

关键词 磁性十八烷基微粒 硅烷化 扫集 胶柬电动色谱 激素

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微流控振荡流PCR快速检测单增李斯特氏菌 被引量：1

12

作者 章春笋 王海英 李彧媛 《激光生物学报》 CAS CSCD 2011年第3期398-403,共6页

一种高通量振荡流PCR微流控技术已被成功开发,借此来快速检测食品致病菌-单增李斯特氏菌(L.monocytogenes)。该PCR微流控装置主要由基于LabView的温度控制与采集系统、三个铜加热块以及聚四氟乙烯(PTFE)毛细管等构成。在该微流控装置上... 一种高通量振荡流PCR微流控技术已被成功开发,借此来快速检测食品致病菌-单增李斯特氏菌(L.monocytogenes)。该PCR微流控装置主要由基于LabView的温度控制与采集系统、三个铜加热块以及聚四氟乙烯(PTFE)毛细管等构成。在该微流控装置上,三个铜块维持PCR反应所需要的三个温度,而包埋在铜块沟槽中的PTFE毛细管作为PCR的反应通道。毛细管通道中的PCR溶液通过精密注射泵驱动实现往复振荡,从而实现基于振荡流PCR的DNA快速扩增。当流速为300μL/min时,135 bp DNA基因片段能在14min内成功扩增,L.monocytogenes检测极限为10 cfu/mL。目前开发的高通量振荡流PCR系统能同时检测水、牛奶、香蕉以及香肠中的L.monocytogenes。 展开更多

关键词 连续流动PCR 振荡流PCR 食品致病菌 单增李斯特氏菌

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具有单一热源的对流双温PCR微流控装置的研究

13

作者 章春笋 《传感器与微系统》 CSCD 北大核心 2011年第4期69-71,75,共4页

为了克服传统连续流动聚合酶链式反应(PCR)微系统经常需要多个加热源来获取PCR所需要的温度,且集成或者非集成的泵系统也需要用来驱动PCR溶液连续流动,从而实现PCR扩增的缺点,研究了一种具有单一热源的对流双温PCR微系统。通过复合肋片... 为了克服传统连续流动聚合酶链式反应(PCR)微系统经常需要多个加热源来获取PCR所需要的温度,且集成或者非集成的泵系统也需要用来驱动PCR溶液连续流动,从而实现PCR扩增的缺点,研究了一种具有单一热源的对流双温PCR微系统。通过复合肋片技术在沟槽铜片上形成对流双温PCR所需要的温度,由流体密度差形成的自然对流来驱动闭环通道中连续流动PCR。实验表明:开发的微流控PCR能在45 min内扩增112 bp的大肠杆菌DNA片段。 展开更多

关键词 微流控 对流 聚合酶链式反应 DNA扩增 单一热源

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