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题名南昆山毛叶茶三种多酚的分离纯化及抗氧化研究
被引量:3
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作者
旷小珊
高雄
林晓蓉
陈忠正
李斌
张媛媛
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机构
华南农业大学食話学院
广东省微生物研究所
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出处
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2020年第5期31-39,共9页
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基金
现代农业产业技术体系专项资金(CARS-23)
广东省自然科学基金自由申请项目(2018A030313917)
+2 种基金
广东珍稀茶树资源南昆山毛叶茶抗炎活性组分的相互作用研究
广东省普通高校青年创新人才项目(2017KQNCX019)
广东特色资源南昆山毛叶茶纳米聚集体的功能特性研究
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文摘
本研究以南昆山毛叶绿茶为材料,通过30%乙醇、乙酸乙酯提取,进而采用羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)柱层析和制备型高效液相色谱分离纯化得到3种多酚单体物质;通过高效液相色谱-串联质谱、核磁共振和红外光谱鉴定单体结构;以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2′-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)两种自由基的清除能力、铁离子还原能力(FRAP)和氧自由基的吸收能力(ORAC)为指标,运用L-O2肝细胞氧化应激模型,综合评价3种多酚单体物质的抗氧化活性。结果:从南昆山毛叶茶中分离得到3种多酚单体物质,分别为没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、1,2,4,6-四没食子酰葡萄糖(1,2,4,6-GA-glc)、儿茶素-3,5-二没食子酸酯(GC-3,5-diGA),其中后2种为茶叶中的特殊多酚物质;纯度分别为98%、96%、97%,得率分别为2.45%、0.55%、0.31%;DPPH、ABTS和FRAP三种化学抗氧化结果基本一致:GCG>GC-3,5-diGA>1,2,4,6-GA-glc,ORAC法的结果与此相反,1,2,4,6-GA-glc的作用强于GCG和GC-3,5-diGA;高剂量的GCG、1,2,4,6-GA-glc和GC-3,5-diGA预处理后,受氧化应激的L-O2细胞存活率分别提高了26.98%±1.96%、70.87%±3.61%和35.58%±5.37%。结论:通过Sephadex LH-20柱层析和制备型高效液相色谱技术,得到高纯度的GCG、1,2,4,6-GA-glc和GC-3,5-diGA;抗氧化结果显示,GCG具有较强的化学抗氧化能力,1,2,4,6-GA-glc和GC-3,5-diGA具有强细胞抗氧化能力。
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关键词
南昆山毛叶茶
分离鉴定
多酚单体物质
抗氧化
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Keywords
Camellia ptilophylla Chang
isolation and identification
polyphenol monomer
antioxidation
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分类号
TS201.1
[轻工技术与工程—食品科学]
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题名茶叶CHS基因表达特性及其与儿茶素积累的关系
被引量:1
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作者
施婧
张雪
张媛媛
林晓蓉
李斌
陈忠正
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机构
华南农业大学食話学院
广东省功能食品活性物重点实验室
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出处
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2020年第5期101-106,112,共7页
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基金
广东省科技计划项目(2015A030302065)
国家自然科学基金项目(31770727,31270726)
+1 种基金
现代茶叶产业技术体系(CARS-19)
广州市科技计划项目(201607010139)
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文摘
本研究用高效液相色谱法(HPLC)测定两种茶叶的儿茶素含量,通过RT-PCR克隆英红9号(YH)和南昆山毛叶茶(MY)的CHS基因进行比对分析,借助烟草瞬时表达技术对基因表达蛋白进行亚细胞定位;结合生物信息学分析选取特定肽段经人工合成后作为抗原制备CHS基因特异抗体;用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术和Western blot技术测定比较两种茶叶CHS基因在转录、翻译水平的差异,并对比分析了两种茶叶间儿茶素含量差异与相应CHS基因表达的关系。结果表明:YH和MY中的儿茶素含量分别为181.51 mg/g和106.02 mg/g,前者显著高于后者并达到1.71倍;两种茶叶中所克隆的CHS基因具有单核苷酸差异但编码相同的氨基酸序列,其表达蛋白亚细胞定位于细胞质、细胞膜和细胞核;制备的CHS蛋白兔源抗体效价为1∶80000;CHS基因在YH中的表达无论在转录水平还是在翻译水平均显著高于MY,前者分别是后者的3.9倍和1.7倍,两种茶叶中CHS合成酶基因在转录、翻译水平的表达均与其对应的儿茶素积累水平一致。实验研究证明,茶叶儿茶素积累水平与其合成通路关键酶基因CHS的表达呈正相关。
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关键词
茶叶
儿茶素
查尔酮合成酶
基因表达
蛋白表达
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Keywords
tea
catechins
chalcone synthase
gene expression
protein expression
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分类号
TS201.3
[轻工技术与工程—食品科学]
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