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红景天苷通过抑制RAS轴减轻MPTP所致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的丢失 被引量：15
1
作者 胡婷婷 王新 +4 位作者 刘昊 王海涛 任博 王茜 张宇新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期597-602,共6页
目的:利用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型,探讨红景天苷(Sal)发挥多巴胺能神经元保护作用的可能机制。方法:将72只雄性C57/BL小鼠随机分为3组,每组24只。对照组腹腔注射生理盐水;模型... 目的:利用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型,探讨红景天苷(Sal)发挥多巴胺能神经元保护作用的可能机制。方法:将72只雄性C57/BL小鼠随机分为3组,每组24只。对照组腹腔注射生理盐水;模型组腹腔注射MPTP(每日30 mg/kg);治疗组腹腔注射MPTP(每日30 mg/kg)后1 h腹腔注射Sal(每日50 mg/kg),连续注射7 d,观察每组小鼠行为学表现,使用爬杆法测定小鼠运动能力;采用免疫组织化学图像分析,测定模型小鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶(TH)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶催化亚基(NOX2)阳性表达量;采用蛋白质印迹法,测定模型小鼠中脑TH、血管紧张素1型受体(AT1)和NOX2蛋白表达情况;使用试剂盒测定活性氧簇(ROS)产生水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠表现出典型的帕金森病样行为学表现,运动能力明显减退; TH阳性细胞减少61. 1%,TH蛋白表达降低67. 6%,AT1、NOX2表达与ROS生成均上升(P <0. 01)。与模型组相比,Sal治疗组小鼠行为学症状减轻,运动能力提高,TH表达升高,AT1、NOX2表达与ROS生成下降(P <0. 01)。结论:Sal在一定程度上可通过抑制肾素-血管紧张素系统(RAS)轴中AT1、NOX2过度表达与ROS过度生成,减轻氧化应激反应,从而发挥多巴胺能神经元保护效应。 展开更多
关键词 帕金森病 红景天苷 酪氨酸羟化酶 多巴胺能神经元 肾素-血管紧张素系统 氧化应激
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抑制JNK通路对蛛网膜下腔出血大鼠海马区神经细胞自噬与学习记忆功能的影响 被引量：9
2
作者 陈禹廷 刘俊杰 +5 位作者 丁家杉 赵雅宁 刘仁杰 徐继伟 李建民 田景瑞 《新疆医科大学学报》 CAS 2017年第2期196-200,205,共6页
目的探讨抑制c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal ki-nase,JNK)信号通路对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)大鼠海马区神经细胞自噬及其学习记忆功能的影响。方法成年雄性SpragueDawley大鼠36只(体质量350~450g),随机分成... 目的探讨抑制c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal ki-nase,JNK)信号通路对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)大鼠海马区神经细胞自噬及其学习记忆功能的影响。方法成年雄性SpragueDawley大鼠36只(体质量350~450g),随机分成正常对照组(Sham组)(n=12)、蛛网膜下腔出血组(SAH组)(n=12)和JNK抑制剂蛛网膜下腔出血组联合JNK抑制剂组(SP6001250组)(n=12)3组。使用血管内穿刺法制作SAH模型,Sham组只进行手术,不行血管穿刺,SP6001250组在造模前30 min应用大鼠脑立体定位仪给予脑室注射3μg/μL的SP600125溶液10μL。造模成功后24h应用Morris水迷宫实验观察大鼠学习记忆功能(包括定位航行实验与空间探索实验);HE染色法观察各组大鼠海马区神经元的形态和数量;免疫组织化学染色以及Western-Blot法对自噬标记蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白(LC3-Ⅱ)以及JNK通道表达蛋白p-JNK进行定性定量检测。结果与Sham组比较,SAH组的逃避潜伏期(passive avoidance latency,PLA)延长(P<0.05),穿越平台次数减少(P<0.05);与SAH组相比较,SP600125组的PLA缩短(P<0.05),穿越平台次数增加(P<0.05);与Sham相比,SAH组海马区神经细胞形态不规则,排列紊乱,数量减少(P<0.05);Beclin-1、LC3-Ⅱ表达水平均较高(P<0.05);p-JNK表达上升(P<0.05)。与SAH组相比,神经细胞细胞核异常现象减轻,形态排列正常的数目增多(P<0.05);Beclin-1、LC3-Ⅱ表达水平下降显著(P<0.05);p-JNK表达下降(P<0.05)。结论抑制JNK通路对SAH后在保护海马区神经元细胞同时对学习功能具有积极作用,其机制可能与抑制JNK信号通路的激活过度从而适度激活自噬有关。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 C-JUN氨基末端激酶 自噬 学习 SP600125
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硫氧环蛋白过氧化物酶-2对转化生长因子β1诱导的人胚肺成纤维细胞增殖及胶原合成的影响 被引量：10
3
作者 张钊 刘英宇 +5 位作者 刘岩 李倩 梁婷婷 洪凡 冯莉 孙影 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期7-12,共6页
目的探讨硫氧环蛋白过氧化物酶-2(Prx-2)过表达对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞增殖及胶原合成的影响。方法将人胚肺成纤维细胞随机分为对照组(DMEM培养液)、TGF-β1组(5μg/L TGF-β1)、阴性对照组(5μg/L TGF-β1+... 目的探讨硫氧环蛋白过氧化物酶-2(Prx-2)过表达对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞增殖及胶原合成的影响。方法将人胚肺成纤维细胞随机分为对照组(DMEM培养液)、TGF-β1组(5μg/L TGF-β1)、阴性对照组(5μg/L TGF-β1+慢病毒空载体)、Prx-2组(5μg/L TGF-β1+慢病毒Prx-2过表达载体)。采用MTT法检测各组细胞增殖情况,免疫荧光法检测8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量用以反映活性氧(ROS)水平,Western blot检测磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、p-P38、I和III型胶原蛋白及Prx-2水平。用SPSS 18.0软件进行统计分析,计量资料以±s表示,组间比较采用分差分析,两两比较用LSD-t检验。结果慢病毒成功转染,Prx-2组Prx-2蛋白水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β1组细胞增殖能力明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);与TGF-β1组比较,Prx-2组细胞增殖能力明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β1组细胞8-OHdG、p-JNK、p-P38及I、III型胶原蛋白水平均明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05);与TGF-β1组比较,Prx-2组8-OHdG、p-JNK、p-P38及I、III型胶原蛋白水平均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与TGF-β1组比较,阴性对照组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论Prx-2过表达可能通过抑制ROS和JNK、P38通路激活,抑制TGF-β1促成纤维细胞增殖和胶原合成的作用。 展开更多
关键词 矽肺 成纤维细胞 硫氧环蛋白过氧化物酶-2 活性氧 转化生长因子Β1
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维生素E对大鼠肾缺血再灌注后心肌损伤的影响 被引量：7
4
作者 弭小艺 岳清 +2 位作者 陈俊良 曹福源 张伟 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期65-71,共7页
目的 探讨维生素E(vitamin E,VE)对大鼠肾缺血再灌注(renal ischemia reperfusion,RIR)后心肌损伤的影响。方法 复制大鼠RIR模型,部分动物再灌注前4周灌胃给予VE 500 mg/kg/24 h,观察心肌组织丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、黄嘌呤氧... 目的 探讨维生素E(vitamin E,VE)对大鼠肾缺血再灌注(renal ischemia reperfusion,RIR)后心肌损伤的影响。方法 复制大鼠RIR模型,部分动物再灌注前4周灌胃给予VE 500 mg/kg/24 h,观察心肌组织丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、黄嘌呤氧化酶(XO)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)和血浆肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的变化;测定平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、收缩期左室内压上升最大速率(dp/dt max)和舒张期左室内压下降最大速率(-dp/dt max);光镜、免疫组化观察心肌形态和内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的表达。Western blot法检测心肌细胞P47phox蛋白表达。结果 大鼠RIR后,心肌组织MDA含量、MPO和XO活性及NO浓度增加而SOD活性减少,血浆CK、CK-MB升高,血流动力学指标下降,镜下心肌细胞水肿、e NOS阳性细胞数增加,p47phox蛋白表达增多;给予VE后,大鼠心肌组织中MDA含量、MPO和XO活性降低而SOD活性增加,血浆CK、CK-MB下降,血流动力学指标升高,NO浓度升高,镜下心肌损伤减轻,e NOS阳性细胞数增多,p47phox蛋白表达减少,差异均具有统计学意义。结论 VE可能通过抗炎、抗氧化、升高NO含量、减少P47phox表达等途径对RIR后的心肌发挥保护作用。 展开更多
关键词 维生素E 一氧化氮 再灌注损伤 心肌 P47phox 大鼠
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赖氨大黄酸与大黄酸对大鼠胆汁淤积性肝纤维化的疗效比较 被引量：7
5
作者 孔艺璇 刘章心怡 +4 位作者 张荣花 王琳 卫敬泽 甄永占 章广玲 《中国医药指南》 2019年第15期44-46,共3页
目的探讨赖氨大黄酸(rhein lysinat,RHL)和大黄酸对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠肝脏的保护作用,比较RHL与大黄酸对大鼠胆汁淤积性肝纤维化的疗效。方法采用胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)的方法制造了大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型,... 目的探讨赖氨大黄酸(rhein lysinat,RHL)和大黄酸对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠肝脏的保护作用,比较RHL与大黄酸对大鼠胆汁淤积性肝纤维化的疗效。方法采用胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)的方法制造了大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型,将大鼠随机分为5组:赖氨酸组、RHL组、大黄酸组、模型组、对照组。检测大鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TBIL)的含量,HE染色观察肝脏组织病理学改变,Masson三色染色观察肝脏纤维结缔组织改变,使用酶标仪通过试剂盒检测肝脏羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,免疫组化染色观察α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscleactin,α-SMA)的分布与表达,Western blotting检测α-SMA相对表达量的变化。结果与对照组相比较,模型组大鼠生长速率、肝脏与体质量比、血清中AST、ALT、TBA和TBIL的含量升高(P<0.05),肝小叶的结构被破坏,纤维异常增生,Hyp的含量升高,免疫组化染色显示α-SMA分布于胞膜和胞质且表达增多,Western blotting结果显示模型组大鼠α-SMA相对表达量升高,提示肝星形细胞活化增多;与模型组相比,用药组大鼠生长率、肝脏与体质量比虽无显著变化,但是血清中AST、ALT、TBA、TBIL水平明显降低;用药组大鼠肝脏组织中纤维成分经治疗后减少,Hyp含量降低,用药后大鼠肝脏组织中α-SMA表达含量亦相应减少(P<0.05),提示肝星形细胞活化减少,且RHL组较大黄酸组降低显著。结论RHL和大黄酸通过抑制肝星形细胞激活、肝脏纤维变性、蓄积来发挥对胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏的保护作用,且RHL的作用强于大黄酸,提示RHL有望成为防治胆汁淤积性肝纤维化的药物。 展开更多
关键词 胆汁淤积 肝纤维化 赖氨大黄酸
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Piezo1和VEGF在上皮性卵巢癌中的表达及意义 被引量：6
6
作者 熊艳杰 宋旭东 +6 位作者 白云 董丽儒 王潇飞 李双 唐慧 罗丹 孙红 《重庆医学》 CAS 2022年第6期964-968,共5页
目的研究上皮性卵巢癌组织中Piezo1和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况,并探讨其与微血管密度(MVD)和微血管面积(MVA)的临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测50例卵巢癌、15例卵巢交界性肿瘤组织、20例卵巢良性病变组织和15例卵巢... 目的研究上皮性卵巢癌组织中Piezo1和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况,并探讨其与微血管密度(MVD)和微血管面积(MVA)的临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测50例卵巢癌、15例卵巢交界性肿瘤组织、20例卵巢良性病变组织和15例卵巢正常组织中Piezo1及VEGF的表达情况。通过CD34标记血管内皮细胞计算MVD和MVA,分析MVD和MVA的表达与Piezo1和VEGF的表达的相关性。结果上皮性卵巢癌的Piezo1和VEGF阳性表达率分别为88.0%和84.0%,MVD为(36.8±13.0)个/HP,MVA为(3231.2±1072.48)pixel^(2)。上皮性卵巢癌Piezo1和VEGF阳性率及MVD和MVA水平明显高于卵巢交界性肿瘤、良性病变组织和正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。不同FIGO分期及有无淋巴结转移患者的Piezo1、VEGF、MVD和MVA比较,差异有统计学意义(P<0.05);临床分期高和有淋巴结转移者,Piezo1和VEGF蛋白表达增强。上皮性卵巢癌组织Piezo1、VEGF表达阳性者MVD和MVA水平高于表达阴性者,差异有统计学意义(P<0.05)。上皮性卵巢癌组织MVD与VEGF蛋白表达呈正相关(r=0.437,P=0.01)。结论Piezo1、VEGF与卵巢癌的发生、发展密切相关。 展开更多
关键词 卵巢癌 Piezo1 血管内皮生长因子 微血管密度 微血管面积
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胰腺癌细胞中CXXC4表达水平变化对其增殖、凋亡的影响
7
作者 周静 王璐瑶 +6 位作者 崔笑妍 张亚楠 张荣花 王梅梅 熊亚南 刘志勇 章广玲 《重庆医学》 CAS 2024年第18期2721-2729,共9页
目的探讨CXXC指蛋白4(CXXC4)对胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响。方法在线数据库分析胰腺癌组织中CXXC4的表达水平及其与患者预后和临床病理分期的关系。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人正常胰腺导管上皮细胞HPNE细胞... 目的探讨CXXC指蛋白4(CXXC4)对胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响。方法在线数据库分析胰腺癌组织中CXXC4的表达水平及其与患者预后和临床病理分期的关系。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人正常胰腺导管上皮细胞HPNE细胞及胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1和BxPC-3中CXXC4的mRNA表达。si-NC、si-CXXC4、pcDNA3.1和pcDNA3.1-CXXC4分别转染PANC-1细胞,Western bolt试验检测CXXC4敲降和过表达的有效性。CCK-8、集落形成、EdU和免疫荧光实验分析敲降或过表达CXXC4对PANC-1细胞增殖和凋亡的影响。生物信息学网站预测CXXC4的上游miRNA。Starbase数据库分析miR-450b-5p与CXXC4在胰腺癌组织中表达相关性。结果TCGA数据库结果显示,与癌旁胰腺组织相比,胰腺癌组织中CXXC4低表达(P<0.001),且与胰腺癌患者总体生存期和预后不良有关(P<0.05)。GEPIA数据库分析结果显示,与Ⅰ期胰腺癌相比,Ⅱ期胰腺癌中CXXC4表达降低(均P<0.05)。与HPNE细胞相比,在3种胰腺癌细胞中CXXC4表达降低(P<0.05)。与si-NC组相比,si-CXXC4组PANC-1细胞增殖和集落形成能力增强,增殖标志物Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)表达升高,凋亡标志物Bax、caspase-3及caspase-9表达降低;与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-CXXC4组PANC-1细胞得到与上述相反的结果(均P<0.05)。生物信息学网站预测miR-450b-5p为CXXC4的上游miRNA,胰腺癌组织中CXXC4与miR-450b-5p的表达呈负相关(r=-0.227),miR-450b-5p在多种哺乳动物中物种保守较高。结论CXXC4抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 CXXC指蛋白4 胰腺癌 PANC-1细胞 增殖 凋亡
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ZEB2调控胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭的实验研究 被引量：2
8
作者 张荣花 黄金平 +5 位作者 李景武 李亚琦 崔笑妍 熊亚南 刘艳坤 章广玲 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期558-564,共7页
目的研究锌指E-box结合同源异型盒2基因(zinc finger E-box binding homeobox transcription factor-2,ZEB2)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭能力及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的影响。方... 目的研究锌指E-box结合同源异型盒2基因(zinc finger E-box binding homeobox transcription factor-2,ZEB2)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭能力及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的影响。方法分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中胰腺癌组织和癌旁组织中ZEB2的表达。将胰腺癌PANC-1细胞分为si-NC组、si-ZEB2组、pcDNA3.1组和pcDNA3.1-ZEB2组,采用qRT-PCR技术和Western blot法验证ZEB2敲降或过表达的有效性。CCK-8实验、集落形成实验、划痕实验和Transwell实验分别检测ZEB2对PANC1细胞的增殖、集落形成、迁移和侵袭的影响。利用qRT-PCR技术和免疫荧光实验检测细胞中EMT标志物E-cadherin、vimentin的表达水平。通过STRING网站预测与ZEB2具有相互作用的蛋白。结果TCGA数据库分析显示,与癌旁组织相比,胰腺癌组织中ZEB2表达水平明显升高(P<0.05)。与si-NC组相比,si-ZEB2组PANC-1细胞的增殖、集落形成、迁移、侵袭能力减弱;与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-ZEB2组PANC-1细胞的增殖、集落形成、迁移、侵袭能力增强(均P<0.05)。qRT-PCR技术和免疫荧光实验结果提示,与si-NC组相比,si-ZEB2组PANC-1细胞的上皮标志物E-cadherin mRNA表达升高,而间质标志物vimentin mRNA和蛋白表达降低;与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-ZEB2组PANC-1细胞中上皮标志物Ecadherin mRNA表达减少,间质标志物vimentin mRNA和蛋白表达增加(均P<0.05)。STRING网站预测出10个蛋白与ZEB2作用密切。结论过表达ZEB2能够促进胰腺癌PANC-1细胞的迁移、侵袭和EMT进程。 展开更多
关键词 ZEB2 胰腺癌 PANC-1细胞 增殖 迁移 侵袭
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PPM1A/TGF-β1/Smads轴对胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响
9
作者 张荣花 崔笑妍 +5 位作者 周静 王梅梅 熊亚南 于笑涵 刘志勇 章广玲 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2024年第4期463-469,共7页
目的:探讨镁依赖性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)/TGF-β1/Smads轴对胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法:①通过组织芯片免疫组织化学染色检测88例胰腺癌组织和14例癌旁正常胰腺组织中PPM1A的表达情况。利用qRT-PCR、免疫... 目的:探讨镁依赖性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)/TGF-β1/Smads轴对胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法:①通过组织芯片免疫组织化学染色检测88例胰腺癌组织和14例癌旁正常胰腺组织中PPM1A的表达情况。利用qRT-PCR、免疫荧光实验检测胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1和BxPC-3与正常胰腺导管上皮细胞HPNE中PPM1A的表达情况。②取PANC-1细胞,采用脂质体转染法分4组,分别转染si-NC、si-PPM1A、pcDNA3.1、pcDNA3.1-PPM1A,通过CCK-8和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力,Western blot法检测TGF-β1、p-Smad2/Smad2和p-Smad3/Smad3蛋白的表达情况。③取PANC-1细胞,转染si-PPM1A或pcDNA3.1-PPM1A后,再加入TGF-β1信号通路抑制剂SB431542或活化因子TGF-β1,通过CCK-8实验检测细胞增殖能力。结果:①与癌旁正常胰腺组织相比,胰腺癌组织中PPM1A蛋白表达减少(P<0.05)。②与正常胰腺导管上皮细胞HPNE相比,胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1和BxPC-3中PPM1A mRNA和蛋白表达减少(P<0.05)。③与si-NC组相比,si-PPM1A组细胞增殖、迁移和侵袭能力增加,TGF-β1/Smads信号通路中TGF-β1、p-Smad2/Smad2和p-Smad3/Smad3表达水平升高(P<0.05);与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-PPM1A组细胞上述指标的变化相反(P<0.05)。④SB431542可逆转si-PPM1A对PANC-1细胞增殖的促进作用,TGF-β1可逆转pcDNA3.1-PPM1A对PANC-1细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。结论:PPM1A可能通过抑制TGF-β1/Smads信号通路抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 胰腺癌 PPM1A TGF-Β1 SMAD 细胞增殖 迁移 侵袭
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PPM1A抑制胰腺癌细胞PANC-1的迁移侵袭和EMT进程
10
作者 黄金平 张荣花 +2 位作者 王梅梅 熊亚南 章广玲 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第2期164-172,共9页
为研究镁依赖性蛋白磷酸酶1A(protein phosphatase magnesium-dependent 1A,PPM1A)对胰腺癌细胞迁移、侵袭及上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation, EMT)的影响,采用生物信息学技术以及细胞免疫荧光实验分析PPM1A在... 为研究镁依赖性蛋白磷酸酶1A(protein phosphatase magnesium-dependent 1A,PPM1A)对胰腺癌细胞迁移、侵袭及上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation, EMT)的影响,采用生物信息学技术以及细胞免疫荧光实验分析PPM1A在胰腺癌中的表达情况,划痕、Transwell、qRT-PCR、Western blot、细胞免疫荧光实验检测PPM1A对胰腺癌细胞PANC-1迁移、侵袭及EMT标志物表达水平的影响,生物信息学网站预测PPM1A的上游miRNA.结果表明,PPM1A在胰腺癌中低表达,抑制PANC-1细胞的迁移、侵袭和EMT进程,miR-105-5p为PPM1A的潜在上游miRNA.说明PPM1A和miR-105-5p可能是治疗胰腺癌新的靶点. 展开更多
关键词 PPM1A 上皮-间充质转化 胰腺癌 迁移 侵袭
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Ac-SDKP调节CREB、Smad信号抑制矽肺纤维化的作用 被引量：6
11
作者 张乙 刘燕 +5 位作者 李颖 朱丽艳 王建辉 杨秀红 徐洪 杨方 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第21期3539-3542,共4页
目的研究Ac-SDKP调节p-CREB、p-Smad2/3信号抑制矽肺纤维化的作用。方法 Wistar大鼠随机分为:对照组、矽肺模型组、Ac-SDKP抗纤维化治疗组、Ac-SDKP预防治疗组。Van Gieson染色观察肺组织形态,Western Blot检测α-SMA、cAMP、PKA、p-CRE... 目的研究Ac-SDKP调节p-CREB、p-Smad2/3信号抑制矽肺纤维化的作用。方法 Wistar大鼠随机分为:对照组、矽肺模型组、Ac-SDKP抗纤维化治疗组、Ac-SDKP预防治疗组。Van Gieson染色观察肺组织形态,Western Blot检测α-SMA、cAMP、PKA、p-CREB和p-Smad2/3蛋白表达;免疫荧光检测p-Smad2/3与α-SMA的共表达。结果矽肺模型组,纤维化病变区域可见胶原沉积,α-SMA、p-Smad2/3蛋白表达明显增多,cAMP、PKA及p-CREB表达显著减少。经Ac-SDKP干预后,cAMP、PKA及p-CREB的表达显著增加,α-SMA、p-Smad2/3的蛋白表达明显降低,肺组织损伤减轻,胶原沉积减少。结论 Ac-SDKP可通过cAMP/PKA/p-CREB信号抑制p-Smad2/3的表达,发挥抑制矽肺纤维化的作用。 展开更多
关键词 矽肺病 环磷酸腺苷 环磷腺苷应答元件结合蛋白 N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸
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颈内动脉刺破法制作大鼠蛛网膜下腔出血模型 被引量：6
12
作者 刘振刚 高建亮 +6 位作者 孙林林 郭鑫 王萌 庞智寅 付爱军 李建民 田景瑞 《中国比较医学杂志》 北大核心 2017年第6期37-45,共9页
目的通过图文结合的形式,详细介绍大鼠蛛网膜下腔出血模型的制作方法及过程;改进并创新模型,使其能更好的模拟临床动脉瘤破裂所致蛛网膜下腔出血。方法选取SD雄性大鼠,采用颈内动脉颅外段穿入颈内段法,建立SD雄性大鼠蛛网膜下腔出血模型... 目的通过图文结合的形式,详细介绍大鼠蛛网膜下腔出血模型的制作方法及过程;改进并创新模型,使其能更好的模拟临床动脉瘤破裂所致蛛网膜下腔出血。方法选取SD雄性大鼠,采用颈内动脉颅外段穿入颈内段法,建立SD雄性大鼠蛛网膜下腔出血模型,用呼吸、瞳孔、大小便及留置纤芯解剖大鼠头颈等方法对模型进行验证。通过观察死亡率和临床表现,探讨模型的可控性、可重复性。结果实现了刺破血管造成蛛网膜下腔出血,且纤芯到达的位置能准确的刺破所需要的血管。结论此法制作模型稳定,方法通俗易懂,操作精巧灵活,可重复性强,理解后短时间内就可造模成功,且成功造模所形成的蛛网膜下腔出血,能更好地模拟临床动脉瘤突然破裂出血,非常适用于蛛网膜下腔出血早期脑损害及其血管痉挛的研究。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 血管穿刺法 模型 大鼠 纤芯
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MicroRNA-105-5p/PPM1A对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究
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作者 赵丹 黄金平 +5 位作者 张亚楠 张荣花 熊亚南 王梅梅 刘志勇 章广玲 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第15期41-51,共11页
目的探讨microRNA-105-5p(miR-105-5p)/PPM1A对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭及上皮细胞向间质转化(EMT)进程的影响及其潜在作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-105-5p在人胰腺导管上皮细胞hTRET-HPNE和胰腺... 目的探讨microRNA-105-5p(miR-105-5p)/PPM1A对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭及上皮细胞向间质转化(EMT)进程的影响及其潜在作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-105-5p在人胰腺导管上皮细胞hTRET-HPNE和胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1、Bxpc-3中的表达。利用Kaplan-Meier Plotter在线工具探讨miR-105-5p与胰腺癌患者预后的关系。在PANC-1细胞中分别转染mimic NC、miR-105-5p mimic、inhibitor NC、miR-105-5p inhibitor。CCK-8法、划痕实验、Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、迁移及侵袭能力;qRT-PCR检测miR-105-5p对E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、ZEB1表达的影响。生物信息学方法预测miR-105-5p的候选靶基因,并对候选靶基因进行GO和KEGG富集分析。双萤光素酶实验检测miR-105-5p与PPM1A的靶向关系。qRT-PCR检测在PANC-1细胞中分别转染mimic NC、miR-105-5p mimic、inhibitor NC、miR-105-5p inhibitor后PPM1A的表达。免疫荧光实验检测PPM1A在人胰腺导管上皮细胞hTRET-HPNE和胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1、Bxpc-3中的表达。在PANC-1细胞中分别转染mimic NC+pcDNA3.1、mimic NC+pcDNA3.1-PPM1A、miR-105-5p mimic+pcDNA3.1-PPM1A后,通过挽救实验进一步研究miR-105-5p inhibitor与PPM1A在胰腺癌细胞中的相互作用关系。结果胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1、Bxpc-3中miR-105-5p mRNA相对表达量高于hTRET-HPNE细胞中miR-105-5p mRNA相对表达量(P<0.05),以PANC-1细胞中的相对表达量最高。miR-105-5p高表达与胰腺癌患者的不良预后有关(P<0.05)。miR-105-5p mimic组细胞增殖、迁移及侵袭能力均高于mimic NC组(P<0.05)。与mimic NC比较,miR-105-5p mimic下调E-cadherin mRNA表达,上调N-cadherin、Vimentin、ZEB1 mRNA表达(P<0.05)。转染miR-105-5p inhibitor后得到相反的结果。双萤光素酶实验证实miR-105-5p与PPM1A存在靶向关系。免疫荧光实验显示在胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1、Bxpc-3中PPM1A的荧光强度低于人胰腺导管上皮细胞 展开更多
关键词 胰腺癌 microRNA-105-5p PANC-1细胞 PPM1A 迁移 侵袭
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刺五加内生放线菌对马铃薯疮痂病菌拮抗作用初探 被引量：6
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作者 徐红艳 王卫 +1 位作者 王彬 袁丽杰 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1742-1748,共7页
初步探究刺五加内生放线菌对马铃薯疮痂病菌的拮抗作用,采用平板纸片法检测265株刺五加内生放线菌发酵产物对马铃薯疮痂病菌的拮抗活性;运用PCR技术检测活性菌株次级代谢产物合成相关基因PKSⅠ、PKSⅡ、NRPS、Halo、CYP;利用BOX-PCR检... 初步探究刺五加内生放线菌对马铃薯疮痂病菌的拮抗作用,采用平板纸片法检测265株刺五加内生放线菌发酵产物对马铃薯疮痂病菌的拮抗活性;运用PCR技术检测活性菌株次级代谢产物合成相关基因PKSⅠ、PKSⅡ、NRPS、Halo、CYP;利用BOX-PCR检测活性菌株,选取谱带差异较大菌株进行16SrRNA基因序列同源性分析。结果表明,56株(21.13%)内生放线菌具有不同程度的抗性,抑菌活性较好的菌株大部分都能检测到至少一种功能基因,活性菌株分布于3个亚目、4个科、4个属。可见,刺五加内生来源放线菌是筛选马铃薯疮痂病拮抗菌的重要来源,筛选所获得活性菌株为马铃薯疮痂病生防菌剂研究奠定良好基础。 展开更多
关键词 马铃薯疮痂病 刺五加 内生放线菌 拮抗活性 次级代谢产物合成相关基因 多样性
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早期炎症和心室重构在急性心肌梗死后作用机制的研究进展
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作者 王伟潼 陆林肯 +2 位作者 卢嘉骏 陈静 孙红 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2024年第2期188-193,共6页
急性心肌梗死(AMI)是一种常见且严重的心血管疾病,其发病机制涉及复杂的炎症反应和心肌组织的重构。早期炎症反应在AMI后起关键作用,促进心肌损伤和修复。同时,心室重构作为AMI后的一种生理过程,涉及心肌肥厚、纤维化、扩张和重塑,对心... 急性心肌梗死(AMI)是一种常见且严重的心血管疾病,其发病机制涉及复杂的炎症反应和心肌组织的重构。早期炎症反应在AMI后起关键作用,促进心肌损伤和修复。同时,心室重构作为AMI后的一种生理过程,涉及心肌肥厚、纤维化、扩张和重塑,对心脏功能及预后产生深远影响。因此,深入了解早期炎症和心室重构在AMI后的作用机制具有重要意义。主要对早期炎症和心室重构在AMI后的作用机制进行系统梳理,重点探讨炎症介质在AMI后的动态变化,以及心室重构与预后的相关性,期望为AMI的预防、治疗及预后提供指导和借鉴。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 早期炎症 心室重构
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雷帕霉素对大鼠肾缺血再灌注后心肌损伤的作用及机制研究 被引量：4
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作者 邓宇 李丽娜 +3 位作者 王鹏帆 张营帅 曹福源 张伟 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第4期40-45,共6页
目的探究雷帕霉素(rapaycin,RAPA)对大鼠肾缺血再灌注(renal ischemia reperfusion,RIR)后远隔器官心脏损伤的影响。方法40只大鼠随机平均分为四组:空白组、假手术组、RIR组和雷帕霉素处理组,每组10只。雷帕霉素处理组的大鼠接受雷帕霉... 目的探究雷帕霉素(rapaycin,RAPA)对大鼠肾缺血再灌注(renal ischemia reperfusion,RIR)后远隔器官心脏损伤的影响。方法40只大鼠随机平均分为四组:空白组、假手术组、RIR组和雷帕霉素处理组,每组10只。雷帕霉素处理组的大鼠接受雷帕霉素灌胃给药。术后24 h处死每组大鼠,收集血液,脾和心脏。测定血浆中肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)的水平。用PAS染色半定量分析表示心脏病理损伤程度。TUNEL试剂盒检测细胞凋亡情况。流式细胞仪检测NKT细胞数量的百分比。RT-qPCR方法检测CXC趋化因子配体10(CXCL10)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factoR-1α,HIF-1α)mRNA和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达。结果RIR组血清BUN值和SCr值高于假手术组。雷帕霉素处理组血清CK值和CK-MB值水平低于模型组。心脏病理损伤的半定量评分表明,雷帕霉素处理组的病理损伤评分明显低于RIR组。雷帕霉素处理组心脏和外周血NKT细胞百分比明显高于RIR组。雷帕霉素处理组脾NKT细胞百分比低于RIR组。雷帕霉素处理组HIF-1αmRNA和VEGF mRNA的表达程度低于RIR组。雷帕霉素处理组CXCL10 mRNA的表达水平高于RIR组。结论RAPA可以显著上调CXCL10的表达水平,促进NKT细胞从脾到外周血在心脏中的集聚。RAPA还可以抑制HIF-1α表达水平从而对RIR后心脏发挥保护作用。 展开更多
关键词 肾缺血再灌注损伤 雷帕霉素 缺氧诱导因子-1Α CXC趋化因子配体10
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放线菌的次级代谢产物及其抗菌抗肿瘤活性 被引量：5
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作者 王彬 吴景华 袁丽杰 《标记免疫分析与临床》 CAS 2017年第8期951-955,共5页
如今,临床耐药菌株的迅速出现和癌症威胁的不断上升迫使人类不断寻找新的化合物来治疗顽疾。纵观新化合物的发现史,它们中的大多数来自资源微生物。其中广泛存在于自然界多种生境中的放线菌(Actinomycetes,ACT),因其次级代谢产物结构新... 如今,临床耐药菌株的迅速出现和癌症威胁的不断上升迫使人类不断寻找新的化合物来治疗顽疾。纵观新化合物的发现史,它们中的大多数来自资源微生物。其中广泛存在于自然界多种生境中的放线菌(Actinomycetes,ACT),因其次级代谢产物结构新颖、作用独特,有着广泛的抗菌、抗肿瘤活性,成为开发新型抗菌、抗肿瘤药物的宝贵资源,具有巨大的应用价值。目前临床上广泛使用的天然源抗生素有超过三分之二是放线菌产生的,其中链霉菌属放线菌作为放线菌家族的优势菌种,已经成为探索和发现新型生物活性化合物的重要宝库。放线菌可以产生多种不同类别抗生素,例如β-内酰胺类、氨基糖苷类、糖肽类、大环内酯类、四环素类、多烯类和烯二炔类等。本文重点介绍放线菌具有抗菌抗肿瘤活性的次级代谢产物及其作用机制。 展开更多
关键词 放线菌 次级代谢产物 抗菌活性 抗肿瘤活性
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miR-192-5p对胰腺癌细胞系AsPC-1增殖、迁移和侵袭的调控作用 被引量：3
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作者 张青 李景武 +5 位作者 张荣花 刘艳坤 苏静慧 李玉凤 王梅梅 章广玲 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1817-1824,共8页
本研究旨在揭示miR-192-5p对胰腺癌(pancreatic cancer,PC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响,为胰腺癌的临床诊断和治疗提供实验依据。采用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)检测miR-192-5p在人正常胰腺上皮细胞hTERT-HPN... 本研究旨在揭示miR-192-5p对胰腺癌(pancreatic cancer,PC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响,为胰腺癌的临床诊断和治疗提供实验依据。采用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)检测miR-192-5p在人正常胰腺上皮细胞hTERT-HPNE和胰腺癌细胞系AsPC-1中的表达水平;利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)、集落形成、划痕以及Transwell实验检测miR-192-5p对AsPC-1细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力的影响;生物信息学方法预测miR-192-5p的候选靶基因,并通过双萤光素酶报告实验对miR-192-5p的靶基因进行验证;RT-qPCR检测miR-192-5p对E盒锌指结合同源框2(Zinc finger E-box binding homeobox 2,ZEB2)mRNA表达的影响。结果显示,miR-192-5p在胰腺癌细胞系AsPC-1中的表达水平明显低于正常胰腺上皮细胞hTERT-HPNE中的;胰腺癌细胞系AsPC-1中转染miR-192-5p mimics后其miR-192-5p的表达水平显著升高,并能抑制ZEB2 mRNA的表达,抑制胰腺癌细胞系AsPC-1的增殖、集落形成、迁移和侵袭;胰腺癌细胞系AsPC-1中转染miR-192-5p inhibitor后其miR-192-5p的表达显著降低,促进ZEB2 mRNA的表达,促进胰腺癌细胞系AsPC-1的增殖、集落形成、迁移和侵袭;双萤光素酶报告实验表明ZEB2是miR-192-5p的功能靶基因。本研究结果提示miR-192-5p可能通过靶向ZEB2而抑制胰腺癌细胞系AsPC-1的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 miR-192-5p 胰腺癌 增殖 迁移 侵袭
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重组人KNDC1腺病毒表达载体的构建及其促HUVEC衰老作用 被引量：5
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作者 李开济 郝晓方 +4 位作者 章广玲 魏静波 魏洁 林雅军 甄永占 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第11期1447-1452,共6页
目的构建人KNDC1腺病毒表达载体,观察其在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的表达及功能。方法扩增KNDC1基因并与腺病毒骨架载体进行体外重组连接,经筛选、测序确认后转染进HEK293A细胞进行包装;按p Adeno X试剂盒的步骤纯化重组腺病毒,通过... 目的构建人KNDC1腺病毒表达载体,观察其在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的表达及功能。方法扩增KNDC1基因并与腺病毒骨架载体进行体外重组连接,经筛选、测序确认后转染进HEK293A细胞进行包装;按p Adeno X试剂盒的步骤纯化重组腺病毒,通过终点稀释法测定病毒滴度;用p AdenoⅩ-KNDC1感染HUVEC,48 h后用Western blot检测KNDC1蛋白表达水平;用SA-β-gal染色检测细胞衰老情况。结果经测序确认目的基因KNDC1成功克隆入腺病毒载体中。转染HEK293A细胞后观察到细胞变圆、部分细胞漂浮的特征性病变效应,病毒滴度达到1×1011PFU。感染了p AdenoⅩ-KNDC1的HUVEC中KNDC1蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。随着p AdenoⅩ-KNDC1剂量的增加,衰老HUVEC数量增多。结论人KNDC1腺病毒表达载体构建成功并能促进HUVEC衰老。 展开更多
关键词 KNDC1 腺病毒 同源重组 脐静脉内皮细胞
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Ac-SDKP对炎性因子MRP-14(S100A9)的调节在硅肺大鼠纤维化病变中的作用 被引量：5
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作者 邓海静 王瑾 +2 位作者 侯晓丽 高学敏 杨方 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期69-73,共5页
目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)是否通过抑制炎性因子髓系相关蛋白14(myeloid-related protein14,MRP-14)以及胶原蛋白的表达,从而阻抑硅肺大鼠纤维化病变中硅结节的形成和胶原蛋白的沉积。方法采用一次性支... 目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)是否通过抑制炎性因子髓系相关蛋白14(myeloid-related protein14,MRP-14)以及胶原蛋白的表达,从而阻抑硅肺大鼠纤维化病变中硅结节的形成和胶原蛋白的沉积。方法采用一次性支气管灌注二氧化硅(SiO 2)粉尘的方法制备大鼠硅肺动物模型,60只SPF级健康成年大鼠随机分为对照4周组、对照8周组、硅肺模型4周组、硅肺模型8周组、Ac-SDKP预防治疗组和Ac-SDKP抗纤维化治疗组,每组10只。免疫组织化学技术检测MRP-14蛋白在硅肺模型组织内的定位表达;Western blot法检测MRP-14以及胶原蛋白在硅肺模型组织内的表达。结果与相应的对照组相比,硅肺模型组大鼠硅肺纤维化区域MRP-14和胶原蛋白的表达增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。与硅肺模型8周组相比,给予Ac-SDKP干预后MRP-14和胶原蛋白表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Ac-SDKP可通过抑制炎性因子MRP-14的表达而发挥其抗硅肺纤维化的作用。 展开更多
关键词 N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP) 髓系相关蛋白14 胶原蛋白 硅结节 硅肺纤维化
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