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人CD59/MCP双基因对人血灌注转基因小鼠离体心脏功能的保护作用 被引量：2
1
作者 谢林 朱珉 +8 位作者 王树森 李荣 曾梦华 黄亚冰 王璐 郭晖 魏庆信 李文鑫 陈实 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第42期3001-3004,共4页
目的研究转人补体调节蛋白hCD59/hMCP双基因抑制人补体激活从而抑制补体介导的超急性反应、延长体外灌注小鼠心脏功能的作用。方法利用显微注射法建立转hCD59/hMCP双基因小鼠的模型,其子代中hCD59单基因阳性小鼠8只、hMCP单基因阳性小... 目的研究转人补体调节蛋白hCD59/hMCP双基因抑制人补体激活从而抑制补体介导的超急性反应、延长体外灌注小鼠心脏功能的作用。方法利用显微注射法建立转hCD59/hMCP双基因小鼠的模型,其子代中hCD59单基因阳性小鼠8只、hMCP单基因阳性小鼠11只和hCD59/hMCP双基因阳性小鼠8只分别为3个实验组,同窝非转基因小鼠10只为对照组。用新鲜人血浆体外灌注小鼠心脏,研究小鼠表达抑制人补体激活的人补体调节蛋白后,对补体介导的异种移植超急性排斥反应的抑制作用。结果转双基因组心脏搏动时间(138min±25min)明显长于单基因组(hCD59组78min±27min,hMCP组43min±21min)及非转基因组(20min±12min)(Dunnett′s T检验,均P<0.01);免疫荧光染色及免疫酶组织化学染色显示转双基因组心脏内补体C3c及C9沉积也明显减少。结论转人补体调节蛋白hCD59/hMCP双基因能够有效地抑制补体介导的异种移植超急性排斥反应。 展开更多
关键词 小鼠 转基因 移植 异种 血液灌注 抗原 CD59
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云南眼镜蛇毒因子用于预致敏大鼠同种心脏移植的实验研究
2
作者 李荣 陈刚 +6 位作者 郭晖 王大卫 谢琳 王树森 王婉瑜 熊郁良 陈实 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第21期1460-1463,共4页
目的观察纯化的云南眼镜蛇毒因子（Y-CVF）对预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的作用。方法BN大鼠到Lewis大鼠连续3次皮肤移植预致敏后行颈部异位心脏移植。将15对大鼠用随机数字法分成2组，实验组（n=8）于心脏移植前24h静脉给... 目的观察纯化的云南眼镜蛇毒因子（Y-CVF）对预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的作用。方法BN大鼠到Lewis大鼠连续3次皮肤移植预致敏后行颈部异位心脏移植。将15对大鼠用随机数字法分成2组，实验组（n=8）于心脏移植前24h静脉给予Y-CVF80μg／kg；对照组（n=7）不用Y-CVF。观察移植心的生存时间，移植心停跳后病理学检查排斥类型，免疫组织化学染色观察移植心IgG和补体C3的沉积。结果Lewis大鼠预致敏后抗BN大鼠抗体滴度由0升高至1：1028～1：2056。对照组移植心存活时间为12．71h±13．94h，实验组移植心存活时间为99．50h±38．72h，与对照组比较差异有统计学意义（t=5．599，P〈0．01）。病理检查结果证实，实验组均未发生急性体液排斥，仅见以大量单核淋巴细胞浸润为特征的急性细胞排斥反应。对照组则见以小血管内血栓形成为特征的急性体液排斥反应。免疫组织化学IgG染色实验组和对照组均为阳性，C3染色对照组为阳性，而实验组为阴性。结论使用Y-CVF可克服预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的发生。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒素 心脏移植 移植排斥
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采用核转染技术建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G_1的真核细胞系
3
作者 曾梦华 房崇芸 +6 位作者 王树森 朱珉 谢林 王璐 李荣 吴雄文 陈实 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1130-1133,共4页
目的建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1(solublehumanleucocyteantigenG1,sHLA-G1)的真核细胞系。方法采用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入不表达HLA-类分子的LCL721.221细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞,通过RT-PCR及Dot-ELISA... 目的建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1(solublehumanleucocyteantigenG1,sHLA-G1)的真核细胞系。方法采用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入不表达HLA-类分子的LCL721.221细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞,通过RT-PCR及Dot-ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达。结果采用核转染法LCL721.221细胞转染效率可以达到约14%。RT-PCR检测发现了sHLA-G1基因特异性条带;采用Dot-ELISA方法利用sHLA-G1特异性抗体MEM-G/9检测,存在sHLA-G1蛋白。结论通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA-G1的真核细胞系。 展开更多
关键词 可溶性人类白细胞抗原G1 核转染 真核细胞系
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