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转录因子诱骗性寡核苷酸转染猪血管内皮细胞抑制人补体介导的异种细胞毒作用
1
作者 黄亚冰 王璐 +3 位作者 尹注增 李荣 郭晖 陈实 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期594-597,共4页
目的探讨转录因子SP，诱骗性寡核苷酸（decoyODNs）转染的猪血管内皮细胞对人血清补体介导的异种细胞毒作用的影响。方法将培养的永生化猪血管内皮细胞系细胞株SV40-PED分为3组。转染组：SV-40PED转染了SP，decoyODNs；错配组：S驴4D—... 目的探讨转录因子SP，诱骗性寡核苷酸（decoyODNs）转染的猪血管内皮细胞对人血清补体介导的异种细胞毒作用的影响。方法将培养的永生化猪血管内皮细胞系细胞株SV40-PED分为3组。转染组：SV-40PED转染了SP，decoyODNs；错配组：S驴4D—PED转染了错配的decoyODNs；空转染组：SV-40PED仅用转染试剂oligofectamine作用。转染后26h，采用细胞爬片免疫荧光技术、蛋白印迹法、逆转录聚合酶链反应及乳酸脱氢酶释放试验进行检测，分别观察各组SV40-PED胞膜a半乳糖残基（regal）、蛋白质和α1，3-半乳糖基转移酶（α1，3-GT）mRNA等表达的变化，以及转染了SP，decoyODNs的SV-40PED对人血清补体介导的细胞毒作用的影响。结果转染组SV-40-PED胞膜α—G1的荧光表达明显减弱，部分胞膜可见点状荧光缺损，而空转染组和错配组仍可见明亮的绿色荧光。转染组蛋白表达水平均有不同程度的下降，相对吸光度（A值）仅为未转染组的52．6％。转染组α1，3GT基因异构体1和2mRNA的相对表达量分别为0．42±0．20和0．27±0．12，空转染组分别为0．72±0．17和0．50±0．19，两组比较，差异有统计学意义（P〈0.05）；错配组与空转染组相比，差异无统计学意义（P〉0.05）。体积分数为20％和40％的人血清对空转染组和错配组SV40-PED均有不同程度的杀伤，而对转染组SV-40-PED的杀伤明显减弱（P〈0.，05）。结论经SP，decoyODNs转染的猪血管内皮细胞可以抑制人血清补体介导的异种细胞毒作用。 展开更多
关键词 转录因子 SP1 寡核苷酸类 补体 内皮细胞
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雷帕霉素对人肝癌裸鼠原位移植瘤生长的抑制作用 被引量：13
2
作者 张翔 张伟杰 +3 位作者 李开艳 陈必成 郭晖 汤高枫 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期560-562,共3页
目的探讨雷帕霉素对人肝癌裸鼠原位移植瘤生长的影响及其机制。方法建立人肝癌棵鼠肝原位移植瘤模型32只,随机分为空白对照组、FK506组、雷帕霉素常规剂量组和高剂量组。用药两周后观察肿瘤体积的变化,免疫组织化学法检测肝癌组织中增... 目的探讨雷帕霉素对人肝癌裸鼠原位移植瘤生长的影响及其机制。方法建立人肝癌棵鼠肝原位移植瘤模型32只,随机分为空白对照组、FK506组、雷帕霉素常规剂量组和高剂量组。用药两周后观察肿瘤体积的变化,免疫组织化学法检测肝癌组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达。结果对照组、FK506组、雷帕霉素常规剂量组、高剂量组平均肿瘤体积分别为:(310．15±40．16)、(605．59±116．23)、(99．19±15．27)、(151．61±27．81) mm3。与对照组相比,雷帕常规剂量组及高剂量组肿瘤体积明显缩小,PCNA、VEGF的表达均显著下调(P<0．01);FKS06组肿瘤体积与对照组相比明显增大,差异有统计学意义(P<0．01),PC- NA、VEGF的表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0．01)。结论雷帕霉素具有显著抑制肝癌生长的作用,其机制可能是抑制了肝癌细胞的恶性增殖及VEGF的产生。 展开更多
关键词 雷帕霉索 他克莫司 癌 肝细胞
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RNA干扰在猪内皮细胞抵御补体介导的细胞毒中的作用 被引量：4
3
作者 朱珉 夏振雄 +6 位作者 王树森 曹荣华 祁洪刚 陈栋 刘斌 张伟杰 陈实 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第16期1133-1136,共4页
目的　评价RNA干扰(RNAi)是否能有效抵御补体介导的对猪内皮细胞的细胞毒作用。方法　将小分子干扰RNA(SiRNA)转染猪内皮细胞系PED,检测PED转染前后α1,3 半乳糖转移酶(α1,3 GT)mRNA及α- 半乳糖糖链(αGal)抗原表位的表达,并评价RNAi... 目的　评价RNA干扰(RNAi)是否能有效抵御补体介导的对猪内皮细胞的细胞毒作用。方法　将小分子干扰RNA(SiRNA)转染猪内皮细胞系PED,检测PED转染前后α1,3 半乳糖转移酶(α1,3 GT)mRNA及α- 半乳糖糖链(αGal)抗原表位的表达,并评价RNAi对补体介导的细胞毒的影响。结果　SiRNA 1/PED的α1,3 GT基因异构体(isoform)表达量与空转组(Mock)相比减少了70%(isoform1,69%;isoform2,72%)(P<0 05),但SiRNA 2/PED的α1,3 GT表达量与错配组及空转组相比差异无统计学意义(P>0. 05),流式细胞学检查显示,SiRNA 1/PED的αGal平均荧光强度(52 9)明显小于错配组(493 9,P<0 01)及空转组(505 7,P<0. 01)。标准4h51Cr释放实验中SiRNA 1/PED的细胞溶解率较空转组分别减少了70%(20%正常人血清组)和60%(40%正常人血清组)(P<0. 05)。结论　PED在转染SiRNA- 1后发生了基因沉默,猪内皮细胞可以成为RNAi作用的靶细胞。本研究为更深层次探讨RNAi在异种移植中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 补体介导 流式细胞学检查 猪 半乳糖转移酶 RNAi 平均荧光强度 PED 细胞毒作用 内皮细胞系 SiRNA 抗原表位 GT基因 释放实验 基因沉默 异种移植 表达量 人血清 转染 小分子 异构体 统计学 Gal 溶解率 靶细胞 相比
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移植免疫抑制治疗中“3 Over”的现象危害及对策
4
作者 陈忠华 《临床肾脏病杂志》 2004年第2期83-84,共2页
一、肾移植免疫抑制治疗中“3 Over”现象及危害 免疫抑制手段及制剂的应用是器官移植成功的保障。出于对排异反应的担忧或恐惧，长期以来免疫抑制治疗中一直存在“3 Over”现象：即过量(Overdose)、过长(Overtime)、免疫抑制剂联合应... 一、肾移植免疫抑制治疗中“3 Over”现象及危害 免疫抑制手段及制剂的应用是器官移植成功的保障。出于对排异反应的担忧或恐惧，长期以来免疫抑制治疗中一直存在“3 Over”现象：即过量(Overdose)、过长(Overtime)、免疫抑制剂联合应用种类过多(Overlap)。为此所付出的代价则是感染、中毒、肿瘤、消化道出血、糖尿病和骨髓抑制等各种不同程度的免疫抑制剂毒副作用，直接影响移植效果。 展开更多
关键词 免疫抑制治疗 “3 Over”现象 危害 肾移植 排异反应 免疫抑制剂
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公民逝世后器官捐献供肾的病理学评估 被引量：16
5
作者 郭晖 陈知水 陈实 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-8,共8页
肾移植是治疗终末期肾病的最有效方法,但供体器官的严重短缺一直是阻碍肾移植发展的最大障碍。随着2015年以来我国器官移植尸体供体完全转变为公民逝世后器官捐献,移植例数稳步增长,更多的患者得到救治。但公民逝世后器官捐献因供体高... 肾移植是治疗终末期肾病的最有效方法,但供体器官的严重短缺一直是阻碍肾移植发展的最大障碍。随着2015年以来我国器官移植尸体供体完全转变为公民逝世后器官捐献,移植例数稳步增长,更多的患者得到救治。但公民逝世后器官捐献因供体高龄、原有系统性疾病等因素导致供肾质量存在差异,而移植前的供肾病理学诊断是一项重要评估方法。本文综述了供肾病理学评估的活组织检查时机、活组织检查方法、病理学标本处理技术和目前国际上采用的组织病理学评估标准,以供大家参考,籍此希望我国更多的移植中心针对目前器官移植的实际情况对此展开更深入的研究。 展开更多
关键词 肾移植 病理组织学 供肾 公民逝世后器官捐献 心脏死亡器官捐献(DCD) 扩展标准供体(ECD) 活组织检查 组织病理学评分标准
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移植肺病理学及其进展 被引量：4
6
作者 杨树东 蔡颖 +1 位作者 夏钰弘 郭晖 《实用器官移植电子杂志》 2017年第6期454-458,共5页
自1983年多伦多医院第一次肺移植手术成功以来,肺移植已成为终末期呼吸衰竭的主要治疗方案。迄今为止,全球进行了超过45 000例肺移植,肺移植受者术后1年和5年存活率已分别达83%和50%。然而,还有很多问题需要解决,包括原发性移植肺功能... 自1983年多伦多医院第一次肺移植手术成功以来,肺移植已成为终末期呼吸衰竭的主要治疗方案。迄今为止,全球进行了超过45 000例肺移植,肺移植受者术后1年和5年存活率已分别达83%和50%。然而,还有很多问题需要解决,包括原发性移植肺功能衰竭、 展开更多
关键词 移植肺 病理学 肺移植手术 多伦多医院 5年存活率 肺功能衰竭 治疗方案 呼吸衰竭
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马蹄肾供肾肾移植2例报告 被引量：3
7
作者 张学 丁左川 +6 位作者 杨敏 苗妍 郭晖 蒋继贫 张伟杰 周平 昌盛 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 2016年第7期401-405,共5页
目的探讨马蹄肾作为供肾的临床肾移植效果及手术经验总结。方法回顾分析2015年8月1例心脏死亡供者捐献的马蹄肾作为供肾，成功为2例尿毒症患者施行肾移植术的临床资料。供者因自发性脑出血发生心脏死亡，符合中国二类标准进行器官捐献... 目的探讨马蹄肾作为供肾的临床肾移植效果及手术经验总结。方法回顾分析2015年8月1例心脏死亡供者捐献的马蹄肾作为供肾，成功为2例尿毒症患者施行肾移植术的临床资料。供者因自发性脑出血发生心脏死亡，符合中国二类标准进行器官捐献。捐献前供者尿量及血肌酐正常，未发现肾脏先天畸形以及相关病史。受者1为男性，年龄49岁，慢性肾炎，肾功能衰竭，透析治疗9个月余；受者2为男性，年龄42岁，IgA肾病，慢性肾炎肾功能衰竭，透析治疗1个月余。供肾获取时，采用低位髂血管插管灌注；供肾修整时仔细分离各动静脉分支，最后结扎峡部小分支动脉，分离峡部，并U形缝合峡部断端。左肾动脉双支，分别带主动脉袖片与受者1的髂外动脉行2个端侧吻合；单支肾静脉与受者髂外静脉行端侧吻合。右肾动脉3支，其中2支与受者2的髂外动脉端侧吻合，肾下极1支与远心端髂外动脉行端端吻合；静脉双支带下腔静脉行延长后，与受者2的髂外静脉行端侧吻合。双侧输尿管肾盂段均有轻度扩张，余无异常，均与受者膀胱行常规隧道包埋法吻合。2例受者术后均采用他克莫司＋吗替麦考酚酯＋泼尼松预防排斥反应。结果肾移植手术耗时3h左右。术后受者尿量均在2000ml／d以上，血肌酐逐渐下降至正常，恢复满意，均于2周左右出院。结论在供肾功能良好，充分评估及仔细操作的情况下，马蹄肾可以作为安全的供肾。 展开更多
关键词 马蹄肾 马蹄肾供肾 肾移植
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应用改良流式法检测猕猴和食蟹猴体内血型抗体水平的分布情况 被引量：2
8
作者 张弛 王筱啸 +6 位作者 王璐 向莹 魏晴 王婉瑜 熊郁良 陈实 陈刚 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期56-61,共6页
绝大部分灵长类动物存在与人类相似的ABO血型系统,该研究采用改良流式法(flow cytometry method,FCM)检测猕猴及食蟹猴血清中血型抗体水平的分布情况。以流式细胞术为基础,使用商品化人源红细胞为靶细胞,并通过加入特异性荧光标记的抗人... 绝大部分灵长类动物存在与人类相似的ABO血型系统,该研究采用改良流式法(flow cytometry method,FCM)检测猕猴及食蟹猴血清中血型抗体水平的分布情况。以流式细胞术为基础,使用商品化人源红细胞为靶细胞,并通过加入特异性荧光标记的抗人IgM或IgG二抗,对收集的实验用猕猴及食蟹猴的血清样本进行检测,以人类健康受试者的血清样本为对照,比较两者血型抗体水平的差异。结果显示:预先用人O型浓缩红细胞吸附猴血清中所含种属间非特异性抗体后,FCM法能够准确检测其血型抗体水平及分型,并且发现猴血清中天然血型抗体的水平明显低于健康人(P<0.05)。由此得出:通过预处理清除非特异性抗体的干扰后,FCM法同样适用于灵长类动物血清中血型抗体的检测,也为构建灵长类动物模拟人ABO血型不合器官移植模型提供了技术保障和实验数据。 展开更多
关键词 流式检测法 ABO血型抗体 猕猴 食蟹猴
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肾移植后移植物抗宿主病一例的诊治 被引量：1
9
作者 杜敦峰 周平 +3 位作者 郭晖 赵圆圆 陈知水 蒋继贫 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期203-208,共6页
目的 探讨实体器官移植后发生移植物抗宿主病（GVHD）的诊治方法和可能的发病机制.方法 回顾性分析1例罕见肾移植术后GVHD受者的诊治经过并复习相关文献.受者肾移植术后50d因皮肤散发皮损再次入院,皮肤活体组织检查病理提示为GVHD.为明... 目的 探讨实体器官移植后发生移植物抗宿主病（GVHD）的诊治方法和可能的发病机制.方法 回顾性分析1例罕见肾移植术后GVHD受者的诊治经过并复习相关文献.受者肾移植术后50d因皮肤散发皮损再次入院,皮肤活体组织检查病理提示为GVHD.为明确诊断,进一步对患者进行了外周血CD3＋淋巴细胞富集后的短串联重复序列（short tandem repeats,STR）嵌合分析和皮肤组织供者特异性人类白细胞抗原（HLA）抗体免疫荧光实验,同时进行降低免疫抑制为主导的治疗.结果 STR分析结果显示,患者外周血淋巴细胞嵌合率为0,但皮肤组织供者特异性HLA抗体免疫荧光结果证实,皮肤组织大量浸润淋巴细胞为供者来源,从而确诊为肾移植术后GVHD.经过降低免疫抑制治疗,小剂量甲泼尼龙冲击治疗后,该患者迅速好转出院,目前肾功能正常.结论 结合文献复习,外周血STR嵌合分析和供者特异性HLA染色是确诊实体器官移植后的GVHD有力手段;肾移植术后的GVHD预后较好;推测实体器官移植后GVHD可能是免疫抑制的结果. 展开更多
关键词 肾移植 移植物抗宿主病 短串联重复序列 免疫荧光
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