目的制备人膜联蛋白 V(Annexin V),应用联肼尼克酰胺(HYNIC)偶联后进行^(99)Tc^m 标记,评价^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 在健康小鼠体内的分布。方法采用基因工程方法构建 Annexin V 的原核载体并诱导其表达,与自行合成的双功能螯合剂 HY...目的制备人膜联蛋白 V(Annexin V),应用联肼尼克酰胺(HYNIC)偶联后进行^(99)Tc^m 标记,评价^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 在健康小鼠体内的分布。方法采用基因工程方法构建 Annexin V 的原核载体并诱导其表达,与自行合成的双功能螯合剂 HYNIC 偶联,并进行^(99)Tc^m 标记。测定^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 的标记率、放化纯,并研究其在健康小鼠体内的生物分布特性。结果 Annexin V在大肠杆菌中获得稳定表达,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及 Western Blot-ting 检测,得到纯度较高的蛋白质。Annexin V 经 HYNIC 偶联后,其^(99)Tc^m 标记率可达90%左右,放化纯>90%。小鼠体内分布结果表明,^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 血液清除迅速,主要从肾脏和肝脏排泄。结论 Annexin V 可在原核生物中稳定表达。其与 HYNIC 偶联后,^(99)Tc^m 标记率和放化纯较高,方法简单,条件温和。展开更多
文摘目的制备人膜联蛋白 V(Annexin V),应用联肼尼克酰胺(HYNIC)偶联后进行^(99)Tc^m 标记,评价^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 在健康小鼠体内的分布。方法采用基因工程方法构建 Annexin V 的原核载体并诱导其表达,与自行合成的双功能螯合剂 HYNIC 偶联,并进行^(99)Tc^m 标记。测定^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 的标记率、放化纯,并研究其在健康小鼠体内的生物分布特性。结果 Annexin V在大肠杆菌中获得稳定表达,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及 Western Blot-ting 检测,得到纯度较高的蛋白质。Annexin V 经 HYNIC 偶联后,其^(99)Tc^m 标记率可达90%左右,放化纯>90%。小鼠体内分布结果表明,^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 血液清除迅速,主要从肾脏和肝脏排泄。结论 Annexin V 可在原核生物中稳定表达。其与 HYNIC 偶联后,^(99)Tc^m 标记率和放化纯较高,方法简单,条件温和。
